1.一种核酸分子,所述核酸分子包含形态发生基因盒,所述形态发生基因盒包含组织偏好性启动子,所述组织偏好性启动子具有选自下组的核苷酸序列,该组由以下组成:
(a)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录;
(b)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录;
(c)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在植物细胞中起始转录;
(d)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的片段或变体,其中所述核苷酸序列的片段或变体在植物细胞中起始转录;或者
(e)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸,其中所述核苷酸序列的至少100个连续核苷酸在植物细胞中起始转录;
其中(a)-(e)的组织偏好性启动子可操作地连接至形态发生基因。
2.一种表达盒,所述表达盒包含如权利要求1所述的形态发生基因盒。
3.一种载体,所述载体包含如权利要求2所述的表达盒。
4.一种植物细胞,所述植物细胞包含如权利要求2所述的表达盒。
5.如权利要求4所述的植物细胞,其中所述植物细胞来自单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。
6.如权利要求5所述的植物细胞,其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组:玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属(eucalyptus)、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属(capsicum)、竹子、黑小麦属(triticale)、甜瓜或芸苔属(brassica)。
7.如权利要求4所述的植物细胞,其中所述形态发生基因编码wus/wox同源盒多肽,
其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
8.如权利要求4所述的植物细胞,其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物:植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生的起始、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或其组合。
9.如权利要求4所述的植物细胞,其中所述表达盒还包含性状基因盒,所述性状基因盒包含异源多核苷酸,所述异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力。
10.如权利要求9所述的植物细胞,其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
11.如权利要求10所述的植物细胞,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
12.如权利要求11所述的植物细胞,其中所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒在所述植物细胞中瞬时表达,并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物细胞的基因组中。
13.如权利要求11所述的植物细胞,其中从所述植物细胞切离所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒,并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物细胞的基因组中。
14.一种植物,所述植物包含如权利要求2所述的表达盒。
15.如权利要求14所述的植物,其中所述植物是单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。
16.如权利要求15所述的植物,其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组:玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜或芸苔属。
17.如权利要求14所述的植物,其中所述形态发生基因编码wus/wox同源盒多肽,
其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
18.如权利要求14所述的植物,其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物:植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或其组合。
19.如权利要求14所述的植物,其中所述表达盒还包含性状基因盒,所述性状基因盒包含异源多核苷酸,所述异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力。
20.如权利要求19所述的植物,其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
21.如权利要求20所述的植物,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usblzmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
22.如权利要求21所述的植物,其中所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒在所述植物中瞬时表达,并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物的基因组中。
23.如权利要求22所述的植物的种子,其中所述种子包含所述表达盒的所述性状基因盒。
24.如权利要求21所述的植物,其中从所述植物切离所述表达盒的所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒,并且所述表达盒的所述性状基因盒被稳定地掺入所述植物的基因组中。
25.如权利要求24所述的植物的种子,其中所述种子包含所述表达盒的所述性状基因盒。
26.一种表达盒,所述表达盒包含重组多核苷酸,所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列具有选自由以下组成的组的核苷酸序列的至少100个连续核苷酸:seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中所述能够起始转录的核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。
27.一种表达盒,所述表达盒包含重组多核苷酸,所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的功能片段或变体,其中所述功能片段或变体衍生自选自由以下组成的组的核苷酸序列:seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中能够起始转录的所述功能片段或变体可操作地连接至形态发生基因。
28.一种表达盒,所述表达盒包含重组多核苷酸,所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列与选自由以下组成的组的核苷酸序列具有至少70%同一性:seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。
29.一种表达盒,所述表达盒包含重组多核苷酸,所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列与选自由以下组成的组的核苷酸序列具有至少95%同一性:seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。
30.一种表达盒,所述表达盒包含重组多核苷酸,所述重组多核苷酸包含能够在植物或植物细胞中起始转录的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列选自由以下组成的组:seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中能够起始转录的所述核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因。
31.一种生产转基因植物的方法,所述方法包括:
用重组表达盒转化植物细胞,所述重组表达盒包含(a)组织偏好性启动子盒,其中所述组织偏好性启动子盒包含选自由以下组成的组的核苷酸序列:
(i)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(ii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iv)作为seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;或者
(v)作为seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的至少100-bp片段的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录,其中(i)-(v)的核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因以及(b)性状基因盒,所述性状基因盒包含目的异源多核苷酸,所述目的异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力;
选择具有所述重组表达盒的转基因植物细胞;并且
从所述转基因植物细胞再生所述转基因植物。
32.如权利要求31所述的方法,其中所述植物细胞是单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。
33.如权利要求32所述的方法,其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组:玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜或芸苔属。
34.如权利要求31所述的方法,其中所述形态发生基因编码wus/wox同源盒多肽,
其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
35.如权利要求31所述的方法,其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物:植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或组合。
36.如权利要求31所述的方法,其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
37.如权利要求36所述的方法,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
38.如权利要求37所述的方法,其还包括从所述重组表达盒中切离所述组织偏好性启动子盒和所述位点特异性重组酶盒。
39.通过如权利要求38所述的方法产生的转基因植物。
40.如权利要求39所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
41.如权利要求31所述的方法,其中所述组织偏好性启动子盒包含第一t-dna,并且所述性状基因盒包含第二t-dna。
42.如权利要求41所述的方法,其中所述第一t-dna和所述第二t-dna位于用于转化所述植物细胞的相同细菌菌株中。
43.如权利要求42所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
44.通过如权利要求43所述的方法产生的转基因植物。
45.如权利要求44所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
46.如权利要求41所述的方法,其中所述第一t-dna位于第一细菌菌株中,并且所述第二t-dna位于第二细菌菌株中,并且所述第一细菌菌株和所述第二细菌菌株以一定比例混合用于转化所述植物细胞。
47.如权利要求46所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
48.通过如权利要求47所述的方法产生的转基因植物。
49.如权利要求48所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
50.一种改善体细胞胚成熟效率的方法,所述方法包括:
用重组表达盒转化植物细胞,所述重组表达盒包含(a)组织偏好性启动子盒,其中所述组织偏好性启动子盒包含选自由以下组成的组的核苷酸序列:
(i)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(ii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iv)作为seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(v)作为seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的至少100-bp片段的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录,其中(a)-(e)的核苷酸序列可操作地连接至形态发生基因以及(b)性状基因盒,所述性状基因盒包含目的异源多核苷酸,所述目的异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力;
选择具有所述重组表达盒的转基因植物细胞;并且
从所述转基因植物细胞再生所述转基因植物,其中,当与不包含所述重组表达盒的转基因植物细胞相比时,所述重组表达盒导致改善的体细胞胚成熟效率。
51.如权利要求50所述的方法,其中所述植物细胞是单子叶植物、双子叶植物或裸子植物。
52.如权利要求51所述的方法,其中所述单子叶植物、所述双子叶植物和所述裸子植物选自由以下组成的组:玉蜀黍、苜蓿、高粱、稻、粟、大豆、小麦、棉花、向日葵、大麦、燕麦、黑麦、亚麻、甘蔗、香蕉、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、竹子、黑小麦属、甜瓜或芸苔属。
53.如权利要求50所述的方法,其中所述形态发生基因编码wus/wox同源盒多肽,
其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
54.如权利要求50所述的方法,其中所述形态发生基因编码参与以下的基因产物:植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或组合。
55.如权利要求50所述的方法,其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
56.如权利要求55所述的方法,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
57.如权利要求56所述的方法,其还包括从所述重组表达盒中切离所述组织偏好性启动子盒和所述位点特异性重组酶盒。
58.通过如权利要求57所述的方法产生的转基因植物。
59.如权利要求58所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
60.如权利要求50所述的方法,其中所述组织偏好性启动子盒包含第一t-dna,并且所述性状基因盒包含第二t-dna。
61.如权利要求60所述的方法,其中所述第一t-dna和所述第二t-dna位于用于转化所述植物细胞的相同细菌菌株中。
62.如权利要求61所述的方法,还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
63.通过如权利要求62所述的方法产生的转基因植物。
64.如权利要求63所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
65.如权利要求60所述的方法,其中所述第一t-dna位于第一细菌菌株中,并且所述第二t-dna位于第二细菌菌株中,并且所述第一细菌菌株和所述第二细菌菌株以一定比例混合用于转化所述植物细胞。
66.如权利要求65所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
67.通过如权利要求66所述的方法产生的转基因植物。
68.如权利要求67所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
69.一种产生转基因双子叶植物或转基因裸子植物的方法,所述方法包括:
用重组表达盒转化双子叶植物细胞或裸子植物细胞,所述重组表达盒包含(a)组织偏好性启动子盒,其中所述组织偏好性启动子盒包含选自由以下组成的组的核苷酸序列:
(i)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(ii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iii)与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70%同一性的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列在所述植物细胞中起始转录;
(iv)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体,其中所述片段或变体在所述植物细胞中起始转录;
(v)seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的至少100-bp片段,其中所述核苷酸序列的所述至少100-bp片段在所述植物细胞中起始转录,其中在所述植物细胞中起始转录的(i)-(v)的核苷酸序列可操作地连接至编码wus/wox同源盒多肽的核苷酸序列以及(b)性状基因盒,所述性状基因盒包含目的异源多核苷酸,所述目的异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力;
使所述重组表达盒在每个转化的植物细胞中表达以形成体细胞胚或芽;并且
使所述体细胞胚萌发或培养所述芽以形成所述转基因双子叶植物或所述转基因裸子植物,其中所述转基因双子叶植物或所述转基因裸子植物包含所述目的异源多核苷酸。
70.如权利要求69所述的方法,其中在转化所述双子叶植物细胞或所述裸子植物细胞起始后约21至约28天内形成所述体细胞胚或芽。
71.如权利要求69所述的方法,其中所述裸子植物植物细胞选自由以下组成的组:松树和道格拉斯冷杉。
72.如权利要求69所述的方法,其中所述双子叶植物细胞选自由以下组成的组:苜蓿、大豆、棉花、向日葵、亚麻、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、甜瓜或芸苔属。
73.如权利要求69所述的方法,其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
74.如权利要求69所述的方法,其中编码所述wus/wox同源盒多肽的核苷酸序列编码参与以下的基因产物:植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或组合。
75.如权利要求69所述的方法,其中所述表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
76.如权利要求75所述的方法,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
77.如权利要求76所述的方法,其还包括从所述重组表达盒中切离所述组织偏好性启动子盒和所述位点特异性重组酶盒。
78.通过如权利要求77所述的方法产生的转基因植物。
79.如权利要求78所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
80.如权利要求69所述的方法,其中所述组织偏好性启动子盒包含第一t-dna,并且所述性状基因盒包含第二t-dna。
81.如权利要求80所述的方法,其中所述第一t-dna和所述第二t-dna位于用于转化所述植物细胞的相同细菌菌株中。
82.如权利要求81所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
83.通过如权利要求82所述的方法产生的转基因植物。
84.如权利要求83所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
85.如权利要求80所述的方法,其中所述第一t-dna位于第一细菌菌株中,并且所述第二t-dna位于第二细菌菌株中,并且所述第一细菌菌株和所述第二细菌菌株以一定比例混合用于转化所述植物细胞。
86.如权利要求85所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
87.通过如权利要求86所述的方法产生的转基因植物。
88.如权利要求86所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
89.一种产生转基因双子叶植物或转基因裸子植物的方法,所述方法包括:
(a)用重组表达盒转化双子叶植物外植体或裸子植物外植体的细胞,所述重组表达盒包含含有目的异源基因的性状基因盒和含有编码wus/wox同源盒多肽的核苷酸序列的形态发生基因盒;
(b)使(a)的重组表达盒在每个转化的细胞中表达以形成体细胞胚或芽;并且
(c)使所述体细胞胚萌发或培养所述芽以形成所述转基因双子叶植物或所述转基因裸子植物。
90.如权利要求89所述的方法,其中在转化所述细胞起始后约21至约28天内形成所述细胞胚或芽。
91.如权利要求89所述的方法,其中所述双子叶植物或裸子植物选自由以下组成的组:苜蓿、大豆、棉花、向日葵、亚麻、木薯、菜豆、豇豆、番茄、马铃薯、甜菜、葡萄、桉属、杨树、松树、道格拉斯冷杉、柑橘、番木瓜、可可、黄瓜、苹果、辣椒属、甜瓜或芸苔属。
92.如权利要求89所述的方法,其中所述wus/wox同源盒多肽包含以下氨基酸序列:seqidno:61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146或148中的任何;或其中所述wus/wox同源盒多肽由以下核苷酸序列编码:seqidno:60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145或147中的任何。
93.如权利要求89所述的方法,其中所述wus/wox同源盒多肽参与植物代谢、器官发育、干细胞发育、细胞生长刺激、器官发生、再生、体细胞胚发生、加速的体细胞胚成熟、顶端分生组织的起始和/或发育、芽分生组织的起始和/或发育、芽的起始和/或发育、或组合。
94.如权利要求89所述的方法,其中所述wus/wox同源盒多肽可操作地连接至启动子,所述启动子选自由以下组成的组:组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子、或受发育调控的启动子。
95.如权利要求94所述的方法,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a,lea-d34,seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个,与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少95%同一性的核苷酸序列,与seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个具有至少70%同一性的核苷酸序列,seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的片段或变体,或seqidno:1-59、108-110、124-126、149-152和189中的至少一个的至少100-bp片段。
96.如权利要求89所述的方法,其中所述目的异源多核苷酸编码基因产物,所述基因产物赋予营养增强、产量增加、非生物胁迫耐受性、干旱耐受性、冷耐受性、除草剂耐受性、有害生物抗性、病原体抗性、昆虫抗性、氮利用效率(nue)、疾病抗性或改变代谢途径的能力。
97.如权利要求89所述的方法,其中所述重组表达盒还包含位点特异性重组酶盒,所述位点特异性重组酶盒包含编码选自下组的位点特异性重组酶的核苷酸序列,该组由以下组成:flp、flpe、kd、cre、ssv1、λint、phic31int、hk022、r、b2、b3、gin、tn1721、cinh、para、tn5053、bxb1、tp907-1或u153,其中所述位点特异性重组酶与组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子或受发育调控的启动子可操作地连接。
98.如权利要求97所述的方法,其中所述组成型启动子、所述诱导型启动子、所述组织特异性启动子或所述受发育调控的启动子选自由以下组成的组:ubi,lldav,evcv,dmmv,bsv(ay)pro,cymvprofl,ubizmpro,si-ub3pro,sb-ubipro(alt1),usb1zmpro,zm-gos2pro,zm-h1bpro(1.2kb),in2-2,nos,35s的-135形式,zm-adfpro(alt2),axig1,dr5,xve,glb1,ole,ltp2,hsp17.7,hsp26,hsp18a,at-hsp811,at-hsp811l,gm-hsp173b,四环素、胺苯磺隆或氯磺隆激活的启动子,pltp,pltp1,pltp2,pltp3,sdr,lgl,lea-14a或lea-d34。
99.如权利要求98所述的方法,还包括从所述重组表达盒中切离所述形态发生基因盒和所述位点特异性重组酶盒。
100.通过如权利要求99所述的方法产生的转基因植物。
101.如权利要求100所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
102.如权利要求89所述的方法,其中所述形态发生基因盒包含第一t-dna,并且所述性状基因盒包含第二t-dna。
103.如权利要求102所述的方法,其中所述第一t-dna和所述第二t-dna位于用于转化所述双子叶植物细胞的相同细菌菌株中。
104.如权利要求103所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
105.通过如权利要求104所述的方法产生的转基因植物。
106.如权利要求105所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
107.如权利要求102所述的方法,其中所述第一t-dna位于第一细菌菌株中,并且所述第二t-dna位于第二细菌菌株中,并且所述第一细菌菌株和所述第二细菌菌株以一定比例混合用于转化所述植物细胞。
108.如权利要求107所述的方法,其还包括使所述第一t-dna与所述第二t-dna分离。
109.通过如权利要求108所述的方法产生的转基因植物。
110.如权利要求109所述的转基因植物的种子,其中所述种子包含所述重组表达盒的所述性状基因盒。
111.如权利要求89所述的方法,其中萌发包括将所述体细胞胚或芽转移到成熟培养基或萌发培养基中,并形成所述转基因植物。