一种从刺梨中提取鞣花酸的方法与流程

本发明涉及一种从刺梨中提取鞣花酸的方法，属于药品保健品化妆品技术的领域。

背景技术：

刺梨(rosaroxburghiitratt)是一种药食两用的蔷薇科植物，主要分布于中国西南部地区。近年来，刺梨在贵州的种植面积呈明显上升的趋势，其果实经加工成饮料、果脯、糕点等产品，深受广大消费者喜爱。刺梨果、刺梨根和刺梨叶收载于2003年版《贵州省中药材、民族药材质量标准》。刺梨果具有消食健脾，收敛止泻等功效，刺梨根用于治疗食积腹痛，牙痛，久咳，泄泻，带下等疾病，刺梨叶可用于健胃消食。

有文献报道刺梨果中含有鞣花酸以及3种鞣花酸糖苷[zengff,gezw,jarukittl,etal.antioxidantandtyrosinaseinhibitoryactivityofrosaroxburghiifruitandidentificationofmainbioactivephytochemicalsbyuplc-triple-tof/ms[j].intjfoodscitech,2017(52):897-905.],鞣花酸(ellagicacid)又叫并没食子酸，是没食子酸的二聚衍生物，它具有抗氧化、抗癌变/抗诱变作用，还兼备抗菌、抗病毒作用，广泛应用于食品、医药、医疗和化妆品等领域，价格比较昂贵。

天然鞣花酸存在于多种水果(蔓越莓，草莓、树莓等)和多种植物中(如石榴叶、栗子等)，但是游离鞣花酸在其中的含量都比较低，自然界中以游离形式存在的鞣花酸较少，主要以鞣花单宁的形式存在。

鞣花酸的制备方法主要有直接提取法、五倍子单宁氧化制备法、发酵制备法、酸水解制备法、化学合成法等方法；刺梨不同药用部位中天然鞣花酸含量丰富，但目前尚未见从刺梨不同药用部位刺梨果、刺梨根、刺梨叶中提取鞣花酸的方法。因此，发明一种从刺梨中提取鞣花酸的方法对于鞣花酸的制备具有重要意义

技术实现要素：

本发明的目的在于，提供一种从刺梨中提取鞣花酸的方法。本发明制备方法简单，高效节能，得到鞣花酸的纯度60％以上；鞣花酸的提取量高，刺梨果中鞣花酸的提取量为20-50mg/g，刺梨根中鞣花酸的提取量为10-20mg/g，刺梨叶中鞣花酸的提取量为80-200mg/g。

本发明的技术方案：一种从刺梨中提取鞣花酸的方法，通过将刺梨提取部位晒干后粉碎过筛，经酸水解和碱溶-酸沉-水洗纯化后收集、干燥制得。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法是将刺梨果、刺梨根或刺梨叶晒干，粉碎过筛后加入硫酸溶液搅拌反应，反应后收集滤渣，并用水冲洗去掉硫酸，滤渣经碱溶-酸沉-水洗纯化后收集、干燥制得鞣花酸。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法是将刺梨果、刺梨根或刺梨叶晒干，粉碎过筛后加入硫酸溶液搅拌反应，反应后收集滤渣，并用水冲洗滤渣去掉硫酸，随后将滤渣溶于naoh溶液，离心收集上清液，向上清液加hcl溶液至ph为4，析出沉淀，取沉淀水洗，滤干后烘干，即得鞣花酸。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法中加入的硫酸溶液为1％-5％的硫酸溶液。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法中naoh溶液为0.6％-2％的naoh溶液。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法中hcl溶液为6％hcl溶液。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法是按以下步骤进行：

①将刺梨果、刺梨根或刺梨叶晒干，粉碎，过40目筛，得粉末；

②取1重量份步骤①的粉末，置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶加入16重量份的3％硫酸溶液；

③将圆底烧瓶放入磁力搅拌的油浴锅中，120℃下搅拌反应14h；

④取下圆底烧瓶，趁热过滤，收集滤渣，并用水冲洗去掉滤渣中硫酸，得a品；

⑤将a品溶于6重量份的1.2％naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，得沉淀a和上清液a；将沉淀a溶于6重量份的1.2％naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，得沉淀b和上清液b；

⑥合并上清液a和上清液b，加入6％hcl至ph为4，待溶液中的沉淀c析出，得混悬液；

⑦将混悬液于8000r/min离心10min，收集沉淀，得b品；

⑧往b品中加入10重量份的水进行水洗，10000r/min高速离心20min，收集沉淀，得c品；

⑨取c品，按步骤⑤-⑧重复纯化一次，得d品；

⑩将d品移到干净的滤纸上，置烘箱中60℃烘干，即得鞣花酸。

前述的一种从刺梨中提取鞣花酸的方法中，所述方法中刺梨果、刺梨根或刺梨叶是分别进行提取的。

与现有技术相比，本发明是通过向刺梨提取部位(刺梨果、刺梨根、刺梨叶)晒干后磨粉，向粉末中加入3％硫酸溶液120℃酸水解14h，1.2％naoh溶液提取2次，每次2h，用6％hcl调至ph为4进行酸沉，10倍水洗，重复碱溶-酸沉-水洗一次即得纯度在60％以上的鞣花酸。

综上所述，本发明制备方法简单，高效节能，得到鞣花酸的纯度为60％以上；鞣花酸的提取量高，刺梨果中鞣花酸的提取量为20-50mg/g，刺梨根中鞣花酸的提取量为10-20mg/g，刺梨叶中鞣花酸的提取量为80-200mg/g。

附图说明

图1是本发明从刺梨果中提取鞣花酸色谱图；

图2是本发明从刺梨根中提取鞣花酸色谱图；

图3是本发明从刺梨叶中提取鞣花酸色谱图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。

实施例1：一种从刺梨中提取鞣花酸的方法，按照以下步骤进行：

①将刺梨果晒干，粉碎，过40目筛备用；

②称刺梨果粉末50g，并转移到1l的圆底烧瓶中，加入800ml3％的硫酸溶液；

③将圆底烧瓶放入磁力搅拌的油浴锅中，120℃下搅拌反应14h；

④取下圆底烧瓶，趁热过滤，收集滤渣并用水冲洗去掉残余硫酸；

⑤将滤渣溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；沉淀又溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；

⑥将⑤中两次离心得到的上清液合并，加6％hcl至ph为4，待溶液中的鞣花酸完全析出；

⑦将⑥析出鞣花酸沉淀的混悬液8000r/min离心10min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑧往⑦沉淀中加入50ml水进行两次水洗，10000r/min高速离心20min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑨重复步骤⑤-⑧再进行一次“碱溶-酸沉-水洗”，将沉淀转移到干净的滤纸上，置烘箱中60℃烘干得鞣花酸1.4930g，用hplc定量，干燥刺梨果中鞣花酸的提取量为25mg/g。

实施例2：一种从刺梨中提取鞣花酸的方法，按照以下步骤进行：

①将刺梨根晒干，粉碎，过40目筛备用；

②称刺梨根粉末50g，并转移到1l的圆底烧瓶中，加入800ml3％的硫酸溶液；

③将圆底烧瓶放入磁力搅拌的油浴锅中，120℃下搅拌反应14h；

④取下圆底烧瓶，趁热过滤，收集滤渣并用水冲洗去掉残余硫酸；

⑤将滤渣溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；沉淀又溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；

⑥将⑤中两次离心得到的上清液合并，加6％hcl至ph为4，待溶液中的鞣花酸完全析出；

⑦将⑥析出鞣花酸沉淀的混悬液8000r/min离心10min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑧往⑦沉淀中加入50ml水进行两次水洗，10000r/min高速离心20min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑨重复步骤⑤-⑧再进行一次“碱溶-酸沉-水洗”，将沉淀转移到干净的滤纸上，置烘箱中60℃烘干得鞣花酸0.6746g，用hplc定量，干燥刺梨根中鞣花酸的提取量为11mg/g。

实施例3：一种从刺梨中提取鞣花酸的方法，按照以下步骤进行：

①将刺梨叶晒干，粉碎，过40目筛备用；

②称刺梨叶粉末50g，并转移到1l的圆底烧瓶中，加入800ml3％的硫酸溶液；

③将圆底烧瓶放入磁力搅拌的油浴锅中，120℃下搅拌反应14h；

④取下圆底烧瓶，趁热过滤，收集滤渣并用水冲洗去掉残余硫酸；

⑤将滤渣溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；沉淀又溶于300ml1.2％的naoh溶液中，磁力搅拌器搅拌溶解2h，8000r/min离心10min，收集上清液备用；

⑥将⑤中两次离心得到的上清液合并，加6％hcl至ph为4，待溶液中的鞣花酸完全析出；

⑦将⑥析出鞣花酸沉淀的混悬液8000r/min离心10min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑧往⑦沉淀中加入100ml水进行两次水洗，10000r/min高速离心20min，丢弃上清液收集沉淀备用；

⑨重复步骤⑤-⑧再进行一次“碱溶-酸沉-水洗”，将沉淀转移到干净的滤纸上，置烘箱中60℃烘干得鞣花酸6.4652g，用hplc定量，干燥刺梨叶中鞣花酸的提取量为107mg/g。