本发明涉及真菌培养基领域,尤其是一种真菌培养基及其制备方法。
背景技术:
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腐生丝孢真菌是无性分生孢子真菌中一重要类群,在半知菌分类中居重要地位。在自然界中,该类真菌以腐生、共生或寄生的方式进行生存繁衍。研究表明几乎所有真菌均可生存于土壤、地表凋落枯枝、海洋、江河或湖泊中。在生化实验中,腐生丝孢真菌的应用较为广泛,在实验室中,需要频繁的培养腐生丝孢真菌。目前,在培植腐生丝孢真菌时,多使用常见的PDA培养基进行培养。现有的PDA培养基,多只是包含了土豆、葡萄糖、琼脂,对于在腐生丝孢真菌培养时,因难以提供全面充足的养分,所培养的腐生丝孢真菌质量较差、产量较低。
技术实现要素:
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本发明提供了一种真菌培养基及其制备方法,能够提供充分的养分,可以快速、高质量的培养腐生丝孢真菌。显然,本发明能够有效解决当前的问题。
本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是:一种真菌培养基,包括:土豆180-230份,葡萄糖16-22份,琼脂15-20份,水800-1200份,60-80目的毛竹粉,所述粉中毛竹干重80-120份。
进一步的,所述土豆为200份,所述葡萄糖为20份,所述琼脂为20份,所述水1000份,所述毛竹粉选用70目,且所述粉中毛竹干重100份。
本发明还提供了一种真菌培养基的制备方法,包括如下步骤:
制备毛竹粉;
制备土豆过滤液;
制备培养基,将毛竹份、土豆过滤液、琼脂、葡萄糖均匀混合。
进一步的,所述制备毛竹粉包括:
获取干燥毛竹枝干,称量所述毛竹枝干;
清洗毛竹枝干;
对毛竹枝干消毒;
粉碎毛竹枝干,获得毛竹粉。
进一步的,对毛竹枝干消毒采用消毒酒精浸泡消毒,所述消毒酒精的酒精度不小75%。
进一步的,所述制备土豆过滤液包括:土豆切块,然后置于800-1200份水中加热至沸腾,沸腾后熬煮20-30min,过滤获得土豆过滤液。
进一步的,所述制备培养基包括:粉碎琼脂;将毛竹粉、土豆过滤液、琼脂混合,获得初级混合物;对所述初级混合物进行加热,所述初级混合物温度小于或等于40°,加热过程中搅拌,直至所述初级混合物混合均匀;搅拌后的初级混合物加入葡萄糖,再次搅拌均匀,获得培养基,然后将获得的培养基灭菌分装。
本发明的有益效果在于,能够提供充分的养分,可以快速、高质量的培养腐生丝孢真菌。显然,本发明能够有效解决当前的问题。
附图说明:
图1为第一天时各实施例中腐生丝孢真菌生长状况图,1-1为实施例1,1-2为实施例2,1-3为实施例3,1-4为实施例4,1-5为实施例5;
图2为第三天时各实施例中腐生丝孢真菌生长状况图,2-1为实施例1,2-2为实施例2,2-3为实施例3,2-4为实施例4,2-5为实施例5;
图3为第五天时各实施例中腐生丝孢真菌生长状况图,3-1为实施例1,3-2为实施例2,3-3为实施例3,3-4为实施例4,3-5为实施例5;
图4为第七天时各实施例中腐生丝孢真菌生长状况图,4-1为实施例1,4-2为实施例2,4-3为实施例3,4-4为实施例4,4-5为实施例5;
具体实施方式:
为能清楚说明本方案的技术特点,下面通过具体实施方式,对本发明进行详细阐述。
实施例1,所述土豆为200份,所述葡萄糖为20份,所述琼脂为20份,所述水1000份,所述毛竹粉选用70目,且所述粉中毛竹干重100份。
实施例2,所述土豆为150份,所述葡萄糖为22份,所述琼脂为15份,所述水1200份,所述毛竹粉选用60目,且所述毛竹粉120份。
实施例3,所述土豆为230份,所述葡萄糖为18份,所述琼脂为20份,所述水800份,所述毛竹粉选用80目,且所述毛竹粉80份。
实施例4,所述土豆为210份,所述葡萄糖为21份,所述琼脂为18份,所述水1100份,所述毛竹粉选用70目,且所述毛竹粉110份。
对比例,土豆200份,葡萄糖20份,琼脂20份,水1000份。
其中,实施例1至实施例5中的培养基,本发明还提供了如下的制备方法,该制备方法包括:制备毛竹粉;制备土豆过滤液;制备培养基,将毛竹份、土豆过滤液、琼脂、葡萄糖均匀混合。
在优选的实施例中,所述制备毛竹粉包括:获取干燥毛竹枝干,称量所述毛竹枝干;清洗毛竹枝干;对毛竹枝干消毒;粉碎毛竹枝干,获得毛竹粉。其中清洗,可采用蒸馏水冲洗。
在优选的实施例中,对毛竹枝干消毒采用消毒酒精浸泡消毒,所述消毒酒精的酒精度不小75%。
在优选的实施例中,所述制备土豆过滤液包括:土豆切块,然后置于800-1200份水中加热至沸腾,沸腾后熬煮20-30min,过滤获得土豆过滤液。
在优选的实施例中,所述制备培养基包括:粉碎琼脂;将毛竹粉、土豆过滤液、琼脂混合,获得初级混合物;对所述初级混合物进行加热,所述初级混合物温度小于或等于40°,加热过程中搅拌,直至所述初级混合物混合均匀;搅拌后的初级混合物加入葡萄糖,再次搅拌均匀,获得培养基。
分别采用实施例1-5中的培养基、对比例中的培养基,培养腐生丝孢真菌,以腐生丝孢真菌中的链格孢(Alternaria Nees)为例,在恒温23℃环境下进行实验,在实验时,向各培养基内中心区域植入相同量的菌种,并对其生长状况进行记录对比,其中,各菌斑的面积如下表。
其中,第一天指的是,从植入菌种后第24小时为第一天,以次依次类推。
由实验数据,并结合各实施例在第一天、第三天、第五天、第七天的生长图片可以看出,在同一天的各实施例中,实施例1-4中菌斑的生长扩散区域大于对比例的实施例,而且,实施例1中的菌斑扩散区域最大,由此可见,本发明的培养基,相较于现有的普通培养基,能够明显的提高腐生丝孢真菌的生长速度;而且,由各实施例在第一天、第三天、第五天、第七天的生长图片还可以看出,同一天的各实施例中,对于腐生丝孢真菌的生长区域而言,实施例1-4较于对比例的颜色更浓,由此可以看出,本发明的培养基中腐生丝孢真菌更加浓密,生长状况更好。
上述具体实施方式不能作为对本发明保护范围的限制,对于本技术领域的技术人员来说,对本发明实施方式所做出的任何替代改进或变换均落在本发明的保护范围内。
本发明未详述之处,均为本技术领域技术人员的公知技术。