高纯度的甜菊醇糖苷的制作方法

文档序号:24622919发布日期:2021-04-09 20:28阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于产生靶甜菊醇糖苷的方法,该方法包括以下步骤:

a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物;

b.提供含有选自甜菊醇生物合成酶、udp-糖基转移酶的至少一种酶的并且任选地提供udp-葡萄糖循环酶的微生物;

c.使该微生物与含有该起始组合物的介质接触以产生包含至少一种靶甜菊醇糖苷的介质。

2.一种用于产生靶甜菊醇糖苷的方法,该方法包括以下步骤:

a.提供包含具有至少一个碳原子的有机化合物的起始组合物;

b.提供包含选自甜菊醇生物合成酶、udp-糖基转移酶、和任选地udp-葡萄糖循环酶的至少一种酶的生物催化剂;

c.使该生物催化剂与含有该起始组合物的介质接触以产生包含至少一种靶甜菊醇糖苷的介质。

3.如权利要求1或2所述的方法,该方法进一步包括以下步骤:

d.从该介质纯化该靶甜菊醇糖苷以提供高度纯化的靶甜菊醇糖苷组合物。

4.如权利要求1或2所述的方法,其中该有机化合物选自下组,该组由以下各项组成:多元醇、碳水化合物、甜菊醇糖苷及其组合。

5.如权利要求1或2所述的方法,其中该是葡萄糖并且该方法是发酵法。

6.如权利要求1或2所述的方法,其中该起始组合物包含甜菊醇糖苷。

7.如权利要求1所述的方法,其中该微生物选自下组,该组由以下各项组成:大肠杆菌、酵母菌属物种、曲霉菌属物种、毕赤酵母属物种、芽孢杆菌属物种、和耶氏酵母属物种。

8.如权利要求2所述的方法,其中该生物催化剂是一种酶、或包含一种或多种酶的细胞,所述酶能够将该有机化合物转化为靶甜菊醇糖苷。

9.如权利要求1或2所述的方法,其中该靶甜菊醇糖苷选自下组,该组由以下各项组成:甜菊苷、reba、rebd、rebd2、rebe、rebm、rebm2及其混合物。

10.如权利要求1或2所述的方法,其中该酶选自下组,该组由以下各项组成:香叶基香叶基二磷酸合酶、柯巴基二磷酸合酶、贝壳杉烯合酶、贝壳杉烯氧化酶、贝壳杉烯酸13-羟化酶(kah)、甜菊醇合成酶、脱氧木酮糖5-磷酸合酶(dxs)、d-1-脱氧木酮糖5-磷酸还原异构酶(dxr)、4-二磷酸胞苷-2-c-甲基-d-赤藓糖醇合酶(cms)、4-二磷酸胞苷-2-c-甲基-d-赤藓糖醇激酶(cmk)、4-二磷酸胞苷-2-c-甲基-d-赤藓糖醇2,4-环二磷酸合酶(mcs)、l-羟基-2-甲基-2(e)-丁烯基4-二磷酸合酶(hds)、l-羟基-2-甲基-2(e)-丁烯基4-二磷酸还原酶(hdr)、乙酰乙酰-coa硫解酶、截短的hmg-coa还原酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶、甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶、细胞色素p450还原酶、ugt91d2、ugtsl2、ugt76g1、或含有选自s42a、f46i、i190l、s274g、i295m、k303g、f314s、k316r、k393r、v394i、i407v、n409k、n409r、q425e、q432e、s447a和s456l的一个或多个点突变的ugt76g1。


技术总结
本申请涉及高纯度的甜菊醇糖苷。本申请描述了制备高度纯化的甜菊醇糖苷、特别是莱鲍迪苷A、D和M的方法。这些方法包括利用将不同的起始组合物转化为靶甜菊醇糖苷的重组微生物。另外,披露了新颖的甜菊醇糖苷reb D2和reb M2,也披露了制备它们的方法。高度纯化的莱鲍迪苷在可食用和可咀嚼组合物例如任何饮料、糕饼、焙烤产品、饼干和口香糖中可用作无热量甜味剂。

技术研发人员:因德拉·普拉卡什;辛西娅·邦德斯;潘卡杰·索尼;阿韦季克·马科西安;加林·西里尔;奥雷利安·巴迪;罗贝尔·泰·阿莱
受保护的技术使用者:谱赛科有限责任公司
技术研发日:2014.05.28
技术公布日:2021.04.09
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