一种促进肠道排空作用的大蒜水萃取物的制作方法

[0001]
本发明涉及一种促进肠道排空作用的大蒜水萃取物，属于大蒜水萃取物技术领域。


背景技术：

[0002]
大蒜是一种大众所喜爱的调味食品，又是一种广泛使用的民间草药。研究报告指出大蒜具有良好的抗氧化、抗菌、预防心血管疾病等生理活性以及良好抗肿瘤作用。大蒜破碎后所形成的大蒜素是大蒜药理活性的化学基础。一般采用提水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取、超临界二氧化碳萃取法得到取大蒜素，通过检测发现大蒜素的纯度较低。为此本发明提供了一种含有较高纯度的大蒜素的大蒜水萃取物，并对是否能够促进肠道排空进行了探讨。


技术实现要素：

[0003]
本发明提供一种促进肠道排空作用的大蒜水萃取物，该大蒜水萃取物中大蒜素的纯度大于85％，在250～1000mg/kg剂量范围内具有促进肠道排空功能。
[0004]
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种促进肠道排空作用的大蒜水萃取物，该大蒜水萃取物中大蒜素的纯度大于85％，所述大蒜水萃取物的制备方法：以大蒜为原料，将大蒜冷藏后与冰块混合均质破碎，再加入温度1～2℃的纯水搅拌，调节ph至酸性，在温度0～0.5℃下过滤，取滤液加热升温至20℃，使蒜氨酸通过蒜氨酸酶催化充分形成大蒜素，然后微波处理使蒜氨酸酶失去活性，静置分层，除去水层，取得大蒜水萃取物；所述大蒜水萃取物在250～1000mg/kg剂量范围内具有促进肠道排空功能。
[0005]
本发明大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0006]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜在温度-6～2℃下冷藏16～24h，然后大蒜与冰块以质量比为1.5:0.9～2.8混合，在温度-5～-1℃下均质破碎形成沙粒；
[0007]
2)再加入为冰块重量1.4～3.3倍的温度1～2℃的纯水，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值至6～6.5，搅拌6～8h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0008]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6～6.5的纯水在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复2～3次，每次浸泡时间4～6h，再将滤液混合形成混合液；
[0009]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0010]
5)然后进行微波处理使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0011]
其中，每次浸泡的纯水用量为大蒜重量的30～40％。
[0012]
其中，所述超滤膜的膜孔大小为50～80nm。
[0013]
其中，所述微波处理的微波温度75～85℃，微波时间为5～10s。
[0014]
其中，所述调节液为1m naoh或1m hcl。
[0015]
其中，所述冰块通过纯水冷藏制得，所述冰块大小为1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm。
[0016]
本发明的有益效果：本发明大蒜水萃取物以无损的大蒜为原料，通过冷藏、冰块混合破碎、纯水混合过滤、微波处理、萃取得到，工序操作简单，高效无污染；本发明将大蒜冷藏使蒜氨酸酶暂时失去活性，之后在接近0℃的条件处理冷藏的大蒜使蒜氨酸充分溶解在水中，再使蒜氨酸酶复活催化蒜氨酸充分形成大蒜素，然后微波处理使蒜氨酸酶的活性永远失去，得到大蒜水萃取物中的大蒜素纯度较高，其大蒜素纯度大于85％；本发明的大蒜水萃取物在250～1000mg/kg剂量范围内具有促进肠道排空；使用大蒜水萃取物制备药物时，对肠胃的刺激性亦较缓和，肠胃排空效果较好。
具体实施方式
[0017]
为了对本发明作出更加清楚完整地说明，下面用具体实施例说明本发明，但并不是对发明的限制。
[0018]
实施例1
[0019]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0020]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜2kg在温度-6℃下冷藏16h，然后混入大小为1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm的冰块1.2kg，在温度-5℃下均质破碎形成沙粒；
[0021]
2)再加入温度1～2℃的纯水3.5kg，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值为6.1，搅拌7h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0022]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为50nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.1的纯水0.6kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复3次，每次浸泡时间4h，再将滤液混合形成混合液；
[0023]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0024]
5)然后在微波温度75℃下进行微波处理10s使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0025]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为88.1％。
[0026]
实施例2
[0027]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0028]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜4.5kg在温度-3℃下冷藏20h，然后混入大小为1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm的冰块5.4kg，在温度-3℃下均质破碎形成沙粒；
[0029]
2)再加入温度1～2℃的纯水8kg，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值为6.1，搅拌6h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0030]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为60nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.3的纯水1.8kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复3次，每次浸泡时间4h，再将滤
液混合形成混合液；
[0031]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0032]
5)然后在微波温度80℃下进行微波处理8s使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0033]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为86.7％。
[0034]
实施例3
[0035]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0036]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜7.5kg在温度2℃下冷藏24h，然后混入大小为1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm的冰块14kg，在温度-2℃下均质破碎形成沙粒；
[0037]
2)再加入温度1～2℃的纯水19.6kg，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值为6.4，搅拌6h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0038]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为70nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.2的纯水2.3kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复3次，每次浸泡时间4h，再将滤液混合形成混合液；
[0039]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0040]
5)然后在微波温度85℃下进行微波处理5s使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0041]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为85.6％。
[0042]
实施例4
[0043]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0044]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜5kg在温度-2℃下冷藏20h，然后混入大小为1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm的冰块5kg，在温度-1℃下均质破碎形成沙粒；
[0045]
2)再加入温度1～2℃的纯水16.5kg，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值为6.5，搅拌6h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0046]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为80nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.4的纯水2kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复2次，每次浸泡时间6h，再将滤液混合形成混合液；
[0047]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0048]
5)然后在微波温度75℃下进行微波处理8s使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0049]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为86.8％。
[0050]
实施例5
[0051]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0052]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜1.5kg在温度-2℃下冷藏20h，然后混入大小为
1cm
×
1cm
×
1.5cm～1cm
×
1cm
×
2.5cm的冰块2kg，在温度-1℃下均质破碎形成沙粒；
[0053]
2)再加入温度1～2℃的纯水2.8kg，在温度0～0.5℃下缓慢搅拌混合，直至沙粒中的冰沙熔化成水溶液，通过调节液调节ph值为6.3，搅拌7h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0054]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为80nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.3的纯水0.5kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复3次，每次浸泡时间4h，再将滤液混合形成混合液；
[0055]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素；
[0056]
5)然后在微波温度85℃下进行微波处理8s使蒜氨酸酶失去活性，降温至20℃，静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0057]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为85.9％。
[0058]
实施例6
[0059]
大蒜水萃取物具体制备步骤如下：
[0060]
1)将去皮、新鲜、无腐烂变质的大蒜1.5kg加入到温度1～2℃的纯水4.8kg中，在温度0～0.5℃下破碎混合，通过调节液调节ph值为6.3，再搅拌7h形成悬浮液，使沙粒中的大蒜粒中的蒜氨酸、蒜氨酸酶溶解在水溶液中；
[0061]
3)接着悬浮液在温度0～0.5℃下通过膜孔大小为80nm的超滤膜过滤，滤渣用温度1～2℃、ph值6.3的纯水0.5kg在0～0.5℃下浸泡后过滤，重复3次，每次浸泡时间4h，再将滤液混合形成混合液；
[0062]
4)接着加热混合液，逐渐升高温度至20℃，蒜氨酸酶逐渐恢复活性，催化蒜氨酸充分形成大蒜素，然后静置后出现液-液分层，去除水层，取得大蒜水萃取物。
[0063]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为52.6％。
[0064]
本实施例6与实施例1～实施例5不同在于：1)大蒜没有冷藏；2)大蒜破碎是在纯水中，不是与冰块混合破碎；3)蒜氨酸充分形成大蒜素后蒜氨酸酶没有进行永久性灭活。
[0065]
对比例
[0066]
(1)取剥皮蒜瓣10kg，用榨汁机粉碎榨汁，过滤得大蒜汁。
[0067]
(2)将大蒜汁以4kg/h的流量从萃取器的上部喷入；与此同时，超临界二氧化碳从萃取器下部以20kg/h的流量通入，萃取器内设置筛板塔，控制萃取器内压力为12mpa，温度为45℃。
[0068]
(3)从萃取器顶部流出含有大蒜提取物的二氧化碳进入分离器减压分离，控制分离器压力为6mpa，分离温度50℃。
[0069]
(4)大蒜汁进料完0.5h后，二氧化碳也停止进料，最后由分离器底部大蒜提取物。
[0070]
经hplc检测，大蒜水萃取物中的大蒜素的纯度为62.4％。
[0071]
本对比例采用超临界二氧化碳萃取法进行萃取得到大蒜提取物。
[0072]
在实施例1至实施例6中，用调节液为1m naoh或1m hcl调节ph值。
[0073]
通过实施例1-实施例5发现，本发明将大蒜冷藏使蒜氨酸酶暂时失去活性，之后在接近0℃的条件处理冷藏的大蒜使蒜氨酸充分溶解在水中，再使蒜氨酸酶复活催化蒜氨酸充分形成大蒜素，然后微波处理使蒜氨酸酶的活性永远失去，得到大蒜水萃取物中的大蒜
素纯度较高，其大蒜素纯度大于85％；工序操作简单，高效无污染。
[0074]
效果例
[0075]
选白鼠100只，按体重随机分为正常对照组、阳性对照组(盐酸伊托必利胶囊，哈药集团制药总厂，国药准字h20030327)、受试药物5个剂量组(实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、实施例5制备的大蒜水萃取物)。各剂量组等体积不等浓度灌胃给药2d，正常对照组灌于同体积蒸馏水，灌胃容积0.1ml/10g。实验前禁食(不禁水)16小时，于末次给药后15min，各组白鼠均灌胃给0.1％甲基橙0.2ml/只(为排除原胃内物对比色的影响，各组均设2只对照鼠不给甲基橙)，15min后颈椎脱臼处死小鼠，快速开腹，结扎贲门和幽门后将胃、小肠取出，再侧剪开，将胃内、小肠容物充分洗于蒸馏水中，倒入刻度离心管，用水补足10ml，2500r/min离心15min，取上清液，于470nm处比色，测量溶液的光密度，以测得值减去本组对照鼠测得均值，按下列公式计算甲基橙残留率：甲基橙残留率(％)＝测定管吸光率/标椎管吸光率
×
100％；标准管试剂的配制：0.1％甲基橙0.2ml加入10ml生理盐水摇匀。结果如下表：
[0076][0077][0078]
从上表可见，大蒜提取物中大蒜素的纯度大于85％且大蒜水萃取物在250mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg胃肠内甲基橙残留率低于正常对照组、趋近阳性对照组，统计差异显著(p<0.05)；大蒜提取物中大蒜素的纯度小于85％且大蒜水萃取物在250mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg胃肠内甲基橙残留率趋近正常对照组，统计差异不显著(p>0.05)；不论大蒜提取物中大蒜素的纯度大于85％还是小于85％，大蒜水萃取物在50mg或1000mg/kg胃肠内甲基橙残留率也趋近正常对照组，统计差异不显著(p>0.05)；因此，大蒜水萃取物的大蒜素纯度大于85％，大蒜水萃取物在250～1000mg/kg剂量范围内具有促进肠道排空的作用。
[0079]
最后应说明的是，以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域技术人员应当理解，依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。