1.一种sirna的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
体外转录获得目的基因的dsrna;
用rnaseⅲ对所述目的基因的dsrna进行消化处理,得到消化产物;
将所述消化产物凝胶电泳后,切割核酸片段<30bp的胶块;
将所述胶块研磨冻融后,获得sirna。
2.如权利要求1所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述消化处理中,rnaseⅲ浓度为0.5-1.5u/μl。
3.如权利要求1所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述凝胶电泳是浓度为3%的琼脂糖凝胶电泳。
4.如权利要求1所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述研磨冻融的步骤包括:将所述胶块切碎后,依次冰冻和解冻融化,然后加水研磨。
5.如权利要求4所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述冰冻的温度为-80℃~0℃;和/或,
所述解冻融化的温度为20℃-27℃。
6.如权利要求4所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述研磨冻融的步骤重复2-4次。
7.如权利要求4所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述加水研磨后,还包括离心取上清。
8.如权利要求1所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述体外转录获得目的基因的dsrna的步骤包括:将总rna反转录得到cdna,用含有t7启动子的引物扩增所述cdna,然后进行体外转录,并用核酸酶消化。
9.如权利要求1-8任一项所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述目的基因为unigene12835,得到的所述sirna为unigene12835sirna;或者,
所述目的基因为unigene13423,得到的所述sirna为unigene13423sirna;或者,
所述目的基因为unigene19308,得到的所述sirna为unigene19308sirna;或者,
所述目的基因为unigene7122,得到的所述sirna为unigene7122sirna;或者,
所述目的基因为cl1989.contig1,得到的所述sirna为cl1989.contig1sirna;或者,
所述目的基因为cl3290.contig2,得到的所述sirna为cl3290.contig2sirna;或者,
所述目的基因为cl3871.contig1,得到的所述sirna为cl3871.contig1sirna;或者,
所述目的基因为cl51.contig3,得到的所述sirna为cl51.contig3sirna。
10.如权利要求1-8任一项所述的sirna的制备方法,其特征在于,所述获得sirna之后,还包括配制成浓度为0.1nmol/l-0.5nmol/l的所述sirna用于转染。