本发明涉及一种单/双磷酸聚乙二醇单甲醚纯化方法，属于生物医药
技术领域：
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背景技术：
：聚乙二醇作为一种人工合成的高分子材料，由于具有良好的生物、血液相容性和亲水性，且无毒副作用，现在医药学领域被广泛应用。目前在药物修饰方面主要研究的是具有一个活性端羟基的甲氧基聚乙二醇，然而甲氧基聚乙二醇的端位羟基的活性较弱很难满足药物修饰的需求，通常将端羟基转化为氨基、巯基、醛基等活性更高的基团来使用。单/双磷酸聚乙二醇单甲醚由于其末端基团的优异活性以及吸附性被广泛应用于各类蛋白质，多肽和纳米药物。关于单/双磷酸聚乙二醇单甲醚现有的合成方法都会产生部分副反应且由于聚乙二醇自身的化学性质导致产品较难提纯，现有的提纯方法多为反相高效液相色谱法制备，此方法投入成本高，需多次提纯，且难以大规模生产投入使用。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种单/双磷酸聚乙二醇单甲醚纯化方法，降低纯化单/双磷酸聚乙二醇单甲醚所需要的成本，解决难以大规模生产的问题。为解决上述技术问题，本发明提供一种单/双磷酸聚乙二醇单甲醚纯化方法，用碱将单/双磷酸聚乙二醇单甲醚转化成盐的形式,利用有机溶剂将产品中的杂质从产品中萃取出来。优选地，该方法具体为：将单/双磷酸聚乙二醇单甲醚粗品溶于水，用碱溶液调节至碱性；搅拌状态下加入助溶剂和有机溶剂，搅拌5～10min，静置分层；将有机相分离出作废液处理，水相为产品，旋转蒸发仪将水相浓缩干，加入甲基叔丁基醚搅拌析晶，过滤得到产品固体后烘干。优选地，所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾中的一种。优选地，所述的有机溶剂为甲醇、二氯甲烷中的一种或两种的混合物，甲醇和二氯甲烷主要作用是将杂质从产品的水溶液中萃取出来。优选地，所述的助溶剂为四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃、乙腈中的一种或多种。四氢呋喃、2-甲基四氢呋喃以及乙腈作用主要为助溶，使得产品能在有不良溶剂的情况下良好的溶解在水相中。优选地，所述产品中的杂质为烯烃或者胺的衍生物。优选地，用碱溶液调节至碱性时的温度为20～30℃。优选地，所述搅拌析晶的时间为30～40min。本发明的原理为：本发明所达到的有益效果：由于聚乙二醇链状单元较多以及良好的溶解性导致萃取杂质难以分层，本发明利用产品本身双磷酸基团的酸性，用碱将其转化成盐的形式让其水溶性更好；粗品中的杂质大部分为烯烃或者胺的衍生物，利用有机溶剂将其从产品中萃取出来。本发明能将90％左右纯度的单/双磷酸聚乙二醇单甲醚纯化至99％以上纯度，且所需仪器设备，试剂较为常见易获得，不需要大型的精密贵重仪器，且工艺简单易操作。能够大规模生产，满足市场大批量需求。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。实施例1：自制双磷酸聚乙二醇单甲醚2.0g(纯度hplc：93.7％)，加入纯化水10ml溶清，用10％naoh水溶液调节至碱性，t＝20～30℃，搅拌5min，ph值不再变化，搅拌状态下加入meoh，thf,和dcm，室温搅拌10min，静置分层。将有机相分出作废液处理，水相为产品，旋转蒸发仪将水相浓缩干，加入mtbe搅拌析晶30min，过滤得到产品固体，烘干1.63g，产率77％，纯度hplc：99.52％。实施例2：自制双磷酸聚乙二醇单甲醚2.0g(纯度hplc：93.7％)，加入纯化水10ml溶清，用10％naoh水溶液调节至碱性，t＝20～30℃，搅拌5min，ph值不再变化，搅拌状态下加入甲醇、二氯甲烷和乙腈，搅拌10min，静置分层。将有机相分出作废液处理，水相为产品，旋转蒸发仪将溶剂浓缩干，加入mtbe搅拌析晶30min，过滤得到产品固体，烘干1.67g，产率79％，纯度hplc：99.67％。实施例3：自制双磷酸聚乙二醇单甲醚2.0g(纯度hplc：93.7％)，加入纯化水10ml溶清，用10％naoh水溶液调节至碱性，t＝20～30℃，搅拌5min，ph值不再变化，搅拌状态下加入2-甲基四氢呋喃、二氯甲烷和甲醇混合溶剂，搅拌10min，静置分层。将有机相分出作废液处理，水相为产品，旋转蒸发仪将溶剂浓缩干，加入mtbe20ml搅拌析晶30min，过滤得到产品固体，烘干1.71g，产率81％，纯度hplc：99.09％。实施例4：自制单磷酸聚乙二醇单甲醚1.0g(hplc纯度:88.95％),加入纯化水5ml溶清，用10％氢氧化钠水溶液调节至碱性，t＝20～30℃，搅拌5min，ph值不再变化，搅拌状态下加入甲醇、二氯甲烷和乙腈搅拌10min，静置分层。将有机相分出作废液处理，水相为产品，旋转蒸发仪将溶剂浓缩干，加入mtbe搅拌析晶30min，过滤得到产品固体，烘干0.78g,产率74％，hplc纯度：99.33％。对比例：自制双磷酸聚乙二醇单甲醚2.0g(纯度hplc：93.7％)，利用反相液相色谱法制备，乙腈，水作溶剂。产品出峰时间：5.84min；杂质出峰时间：6.08min，6.42min；分段接受冲出的产品溶液，并分别用液相色谱法检测，合并合格产品相，直接冻干机冻干。出料：1.13g，产率56.5％，纯度hplc：98.39％。表1实施例1-4和对比例纯化结果纯化方案使用溶剂产品收率产品纯度实施例1meoh/dcm/thf77％99.52％实施例2meoh/dcm/2-me-thf79％99.67％实施例3meoh/dcm/acn81％99.09％实施例4meoh/dcm/acn74％99.33％对比例acn/h2o56.5％98.39％实验表明，在混合溶剂作用下，提纯双磷酸聚乙二醇单甲醚的效率得到了极大的提升，收率由原本的55％左右提升到70％以上，纯度相较于液相色谱制备的方法也有了极大的提高，本方法明显优于原本的反向液相色谱法制备。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变形，这些改进和变形也应视为本发明的保护范围。当前第1页12