1.一种联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,通过a群链球菌制剂和tlr8激动剂的组合来刺激扩增cik细胞。
2.根据权利要求1所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)采集血液,分离获得单个核细胞;
(2)向混悬后的单个核细胞悬液中加入350~500u/mlifn-γ,0.02~2ke/mla群链球菌制剂和10~30μmtlr8激动剂培养;
(3)培养2天后加入cd3、il-1α和il-2激活细胞,进行cik细胞的诱导培养,即可收获大量、高细胞活性的cik细胞。
3.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的血液为脐血和外周血中的至少一种;
步骤(1)中所述的分离为聚蔗糖-泛影葡糖胺密度梯度离心法分离。
4.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,
步骤(1)中所述的分离获得单个核细胞的方法,具体为:采集新鲜抗凝血50ml,采用聚蔗糖-泛影葡糖胺密度梯度离心法,600g离心30min,吸取中间乳白色单个核细胞层,并用生理盐水洗涤2次,600g低速离心10min后获得单个核细胞。
5.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的单个核细胞悬液的浓度为1.8×106~2×106个/ml;
步骤(2)中所述的培养用培养箱培养;
步骤(2)中所述的培养的条件为37℃,5%co2和饱和湿度的培养箱。
6.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,
步骤(3)中所述的cd3的加入量为100~300ng/ml。
7.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,
步骤(3)中所述的il-1α的加入量为100~300u/ml。
8.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,步骤(3)中所述的il-2的加入量为40~80u/ml。
9.根据权利要求2所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法,其特征在于,
步骤(3)中所述的诱导培养的条件为:于37℃,5%co2和饱和湿度的培养箱内培养13~15天。
10.权利要求1~9任一所述的联合a群链球菌制剂和tlr8激动剂共刺激扩增cik细胞的方法在扩增cik细胞中的应用。