一种外泌体类似物批量生产装置的制作方法

本实用新型涉及生物制药工程技术领域，具体为一种外泌体类似物批量生产装置。

背景技术：

真核细胞和原核细胞向细胞外环境释放各种纳米和微米大小的含膜囊泡，统称为细胞外囊泡(ev)。ev可从细胞培养上清液和所有体液中提取，包括血浆、唾液、尿液、牛奶和脑脊液。根据它们的起源，可以区分不同的ev亚型。与凋亡体(1000-5000nm)一起，外泌体(70-160nm)和微囊泡(100-1000nm)是最显著的ev。外泌体被定义为内体系统的衍生物，与多泡体(mvb)的腔内囊泡相对应，mvb与质膜融合后释放到细胞外环境，相反，微囊泡直接从质膜上被剥落。

虽然1983年通过透射电镜对外泌体进行详细的结构分析，首次报道了外泌体的释放，但直到发现小型外泌体可以运输包括microrna在内的小rna后，纳米级外泌体的研究才有了显著的进展。从那时起，外泌体作为细胞间信号传导介质、疾病生物标志物、药物载体或治疗药物被广泛研究。与此同时，外泌体也是一种优良的载体，可以装在药物、蛋白、多肽、人工合成分子、dna、rna、sirna，而常规方法制备外泌体工作量大，且产量小，难以满足要求，通过梯度离心挤压方法制得的外泌体类似物，具有和外泌体相似的功能，为此提出一种外泌体类似物批量生产装置。

技术实现要素：

针对现有技术的不足，本实用新型提供了一种外泌体类似物批量生产装置，具备时间短、效率高、操作简便和适应性广的优点，解决了上述背景技术所提出的问题。

本实用新型提供如下技术方案：一种外泌体类似物批量生产装置，包括离心管盖子，所述离心管盖子螺纹套接在离心管管体的顶端外壁上，所述离心管管体的内腔顶部活动套接有外筒，所述外筒的内部活动套接有内筒，所述内筒的底部粘贴有金属筛网，所述金属筛网的底部与外筒内腔的底部活动连接。

优选的，所述内筒的外壁和外筒的内壁之间过盈配合。

优选的，所述外筒的外壁和离心管管体的内壁之间缝隙配合，所述外筒的下端和内筒的下端各开设有一个孔，且两个孔的直径相同。

优选的，所述外筒的上端外壁设有一圈凸缘，且凸缘的厚度小于外筒的外壁至离心管管体的外壁的距离值。

优选的，所述金属筛网的直径大于内筒下端孔的直径且小于内筒的外径，所述金属筛网通过胶粘剂固定在内筒的下端，所述金属筛网的材质为钛或不锈钢，所述金属筛网上面孔的直径为1～20μm。

优选的，所述离心管管体的容积为50ml，所述离心管管体的底部呈圆台状。

与现有技术对比，本实用新型具备以下有益效果：

1、本实用新型通过直接将培养的细胞消化下来制成悬液即可用该实用新型所提出的技术方案进行操作，使得前期准备工作较为简单，同时将细胞悬液加入内筒中，经过低速短时间离心，无需采用超高速离心机，即可以在较短时间内获得大量的外泌体类似物，通过该种方式得到外泌体类似物不仅效率高而且适应性广。

2、本实用新型通过让细胞强制性通过微孔级金属筛网，细胞被破碎为一个又一个的小囊泡，这种方法获得的囊泡和这种细胞天然分泌的外泌体具有一定相似性，且这种方法获得的囊泡可以被快速大量生产出来替代外泌体而加速其临床转化，从而提高该外泌体类似物批量生产装置的实用性。

附图说明

图1为本实用新型结构示意图。

图中：1、离心管盖子；2、内筒；3、外筒；4、金属筛网；5、离心管管体。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

请参阅图1，一种外泌体类似物批量生产装置，包括离心管盖子1，离心管盖子1螺纹套接在离心管管体5的顶端外壁上，离心管管体5的内腔顶部活动套接有外筒3，离心管管体5用于收集产物悬液，同时对外筒3提供支撑，外筒3用于将内筒2固定在离心管管体5的内部，外筒3的内部活动套接有内筒2，内筒2的底部粘贴有金属筛网4，金属筛网4的底部与外筒3内腔的底部活动连接。

其中，内筒2的外壁和外筒3的内壁之间过盈配合，以确保内筒2在外筒3中不松动。

其中，外筒3的外壁和离心管管体5的内壁之间缝隙配合，便于外筒3的放置和拿取，外筒3的下端和内筒2的下端各开设有一个孔，且两个孔的直径相同，便于产物悬液通过。

其中，外筒3的上端外壁设有一圈凸缘，保证外筒3在离心管管体5中的位置固定，且凸缘的厚度小于外筒3的外壁至离心管管体5的外壁的距离值，确保外筒3装入离心管管体5之后，离心管盖子1可以拧在离心管管体5上，以实现对外筒3的固定。

其中，金属筛网4的直径大于内筒2下端孔的直径且小于内筒2的外径，金属筛网4通过胶粘剂固定在内筒2的下端，使得金属筛网4和内筒2之间实现液体密封，金属筛网4的材质为钛或不锈钢，也可以为其他的耐腐蚀金属，避免金属筛网4受到腐蚀，金属筛网4上面孔的直径为1～20μm，确保细胞强制性通过微孔级的金属筛网4，使得细胞被破碎为一个又一个的小囊泡。

其中，离心管管体5的容积为50ml，离心管管体5的底部呈圆台状。

工作原理：

实验开始前，首先进行细胞培养并获取细胞悬液，然后将下端粘有金属筛网4的内筒2装入到外筒3中，将外筒3装入到离心管管体5内，其次将细胞悬液加入内筒2中，盖上离心管盖子1，进行2000-6000rpm离心5-20分钟，重复2-5次，结束后收集离心管管体5底部的液体，并分散均匀，再经过0.22μm的过滤器，进行高速离心，即可得到最终产物，最后对产物进行透射电镜、westonblot分析以及纳米粒子追踪分析，以确认最终产物的合格性，即可。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。同时在本实用新型的附图中，填充图案只是为了区别图层，不做其他任何限定。

尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。

技术特征：

1.一种外泌体类似物批量生产装置，包括离心管盖子(1)，其特征在于：所述离心管盖子(1)螺纹套接在离心管管体(5)的顶端外壁上，所述离心管管体(5)的内腔顶部活动套接有外筒(3)，所述外筒(3)的内部活动套接有内筒(2)，所述内筒(2)的底部粘贴有金属筛网(4)，所述金属筛网(4)的底部与外筒(3)内腔的底部活动连接。

2.根据权利要求1所述的一种外泌体类似物批量生产装置，其特征在于：所述内筒(2)的外壁和外筒(3)的内壁之间过盈配合。

3.根据权利要求1所述的一种外泌体类似物批量生产装置，其特征在于：所述外筒(3)的外壁和离心管管体(5)的内壁之间缝隙配合，所述外筒(3)的下端和内筒(2)的下端各开设有一个孔，且两个孔的直径相同。

4.根据权利要求1所述的一种外泌体类似物批量生产装置，其特征在于：所述外筒(3)的上端外壁设有一圈凸缘，且凸缘的厚度小于外筒(3)的外壁至离心管管体(5)的外壁的距离值。

5.根据权利要求1所述的一种外泌体类似物批量生产装置，其特征在于：所述金属筛网(4)的直径大于内筒(2)下端孔的直径且小于内筒(2)的外径，所述金属筛网(4)通过胶粘剂固定在内筒(2)的下端，所述金属筛网(4)的材质为钛或不锈钢，所述金属筛网(4)上面孔的直径为1～20μm。

6.根据权利要求1所述的一种外泌体类似物批量生产装置，其特征在于：所述离心管管体(5)的容积为50ml，所述离心管管体(5)的底部呈圆台状。

技术总结
本实用新型涉及生物制药工程技术领域，且公开了一种外泌体类似物批量生产装置，包括离心管盖子，所述离心管盖子螺纹套接在离心管管体的顶端外壁上，所述离心管管体的内腔顶部活动套接有外筒，所述外筒的内部活动套接有内筒，所述内筒的底部粘贴有金属筛网，所述金属筛网的底部与外筒内腔的底部活动连接。本实用新型通过直接将培养的细胞消化下来制成悬液即可用该实用新型所提出的技术方案进行操作，使得前期准备工作较为简单，同时将细胞悬液加入内筒中，经过低速短时间离心，无需采用超高速离心机，即可以在较短时间内获得大量的外泌体类似物，通过该种方式得到外泌体类似物不仅效率高而且适应性广。

技术研发人员：应梅
受保护的技术使用者：中怡(深圳)医疗科技集团有限公司
技术研发日：2020.09.23
技术公布日：2021.06.01