一种脐带间充质干细胞提取分离装置的制作方法

文档序号:27996128发布日期:2021-12-15 07:01阅读:215来源:国知局

1.本实用新型涉及干细胞提取技术领域,特别涉及一种脐带间充质干细胞提取分离装置。


背景技术:

2.脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cells,mscs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。
3.以往间充质干细胞主要来源于骨髓,是骨髓中除了造血干细胞(hsc)以外的一类具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下,可分化为多种造血细胞以外的组织细胞,并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用。但随着年龄的老化,骨髓间充质干细胞逐渐减少,增殖分化能力大大减退,取材对供者有所损伤,限制了骨髓间充质干细胞的应用。2000年首次报道从人脐带中分离出mscs,且细胞含量、增殖能力优于骨髓mscs,免疫原性比骨髓mscs低,并且具有取材方便,无伦理学争议等优点。因此越来越受到研究工作者们的关注。
4.脐带是胎儿和胎盘之间的连系结构。其形状如绳索,表面光滑透明,内含结缔组织,一支脐静脉和一对脐动脉。从新生儿脐带所含的血液中可分离获得脐血干细胞,从结缔组织中可分离获得脐带间充质干细胞。
5.在脐带间充质干细胞制备过程中,需先将整根新鲜健康脐带离断成长度1cm~3cm左右的小段,再从中剥离华通胶。剥离通常是沿脐静脉剪开脐带,展开后,把脐静脉和两根脐动脉用手术刀刮去,再用手术刀把脐带最外一层膜去除,余下的白色胶冻状物质就是华通胶。再将华通胶充分剪碎至1mm3大小并消化,所得组织加入α

mem培养液置于37℃, 5%的co2培养箱培养,培养液中含青霉素和链霉素。脐带组织培养5

7天后,可见有部分细胞从组织块周围爬出,形态呈细小的梭形。一周后,细胞开始迅速增殖,形成大小不等的细胞集落。待细胞长满后,用0.25%胰蛋白酶消化传代,即获得脐带间充质干细胞。
6.现有技术无法杜绝提取过程中的生物污染,因此需要使用较高浓度的青链霉素,但高浓度的青链霉素的使用,会降低脐带msc的体内归巢和黏附性能。不利于后期的科研及使用。


技术实现要素:

7.有鉴于此,为了克服现有技术的不足,本实用新型提供一种可保证无菌操作过程的脐带间充质干细胞提取分离装置。
8.本实用新型提供的脐带间充质干细胞提取分离装置,所述装置包括具有底面的上壳体、下壳体和上盖,所述上壳体底面放置在下壳体上,上盖盖于上壳体上;所述下壳体底端设置有开合门,下壳体内壁上部固定设置对称挂台,挂台上可拆卸地放置细胞收集斗,所述收集斗的下部螺旋旋接细胞收集瓶;所述上壳体底面“v”形,与收集斗收集面平行,“v”形
表面间隔设置尖状突起和漏孔,上壳体侧壁设置固定孔,横杆穿于孔中,横杆在上壳体内的一端设置向下的弯头,弯头下端设置“v”形尖锤,尖锤表面设置尖状突起,尖锤向下移动能与上壳体底面尖状突起相交错咬合。
9.进一步,所述上盖上设置提手,侧旁设置进料孔。
10.进一步,所述固定孔通过弹性密封胶圈与横杆固定密封。
11.进一步,所述横杆分为上壳内部分和上壳体外部分,所述横杆的内部分和外部分在弹性密封胶圈内螺旋连接为一体。
12.进一步,所述横杆外部分的端部设置手动柄。
13.进一步,所述漏孔孔径为1

5mm。
14.进一步,所述收集斗下部为空圆柱体,其内部垂直圆柱设置过滤膜,其外壁设置螺纹,与细胞收集瓶之间螺旋旋接。
15.进一步,所述过滤膜为两层,分别夹于空圆柱内壁两环形凸缘之间。
16.进一步,所述两层过滤膜的上层滤膜孔径为1

3mm。
17.进一步,所述两层过滤膜的下层滤膜孔径为1mm。
18.使用时,将从新鲜健康脐带剥离得到的华通胶及消化酶液从进料孔沿上壳体内壁滑入上壳体底部。工作人员上下扳动手动柄,横杆以固定孔为支点做杠杆运动。手动柄向上移动时,尖锤向下与上壳体底面相挤压,尖锤上的尖状突起与上壳体底面的尖状突起交错咬合,将华通胶破碎成块,小的组织块从漏孔进入收集斗,在收集斗中组织块与消化酶一起进一步消化,再经两次滤膜过滤,更小的细胞块进入细胞收集瓶中。
19.当细胞收集瓶收集的细胞接近瓶口时,工作人员从开合门将细胞收集瓶从收集斗上旋下,取出。重新旋上新灭菌的细胞收集瓶。取出的细胞收集瓶可以直接用于细胞接种培养。
20.使用完毕时,打开上盖,将横杆从弹性密封胶圈处旋开成两部分,取出带尖锤部分,从挂台上拆下收集斗。清洗上盖、尖锤、上壳体、收集斗。清洗完毕,将带尖锤的一端插入弹性密封胶圈固定处,与上壳体一起灭菌,上盖及收集斗分别灭菌。然后装配成使用状态。
21.本实用新型的有益效果在于:
22.1.本实用新型结构简单,操作方便。整个过程组织破碎彻底充分,且耗时少。
23.2.可实现无菌操作过程,最大限度的保证干细胞分离提取过程中无污染。从而减少青链霉素的使用浓度,有利于后期对干细胞的科研及使用。
24.3.本实用新型尖锤与上壳体之间可拆解清洗,一体灭菌,清洗和灭菌使用都很方便。
附图说明
25.图1:本实用新型脐带间充质干细胞提取分离装置结构示意图;
26.图2:本实用新型收集斗底部空圆柱结构示意图;
27.其中:
[0028]1‑
上盖,2

提手,3

进料口,4

上壳体,5

手动柄,6

弯头,7

尖锤,8

锤上尖状突起,9

上壳体底面,10

漏孔,11

底面尖状突起,12

收集斗,13

细胞收集瓶,14

开合门,15

挂台,16

下壳体,17

收集斗外沿,18

过滤膜夹缘,19

外螺纹,20

固定孔,21
‑ꢀ
横杆。
具体实施方式:
[0029]
以下实施例是对本实用新型的解释而本实用新型并不局限于以下实施例。
[0030]
实施例1
[0031]
如图1所示,本实用新型脐带间充质干细胞提取分离装置,所述装置包括具有底面9 的上壳体4、下壳体16和上盖1,所述上壳体底面9放置在下壳体16上,上盖1盖于上壳体4上;所述下壳体16底端设置有开合门14,下壳体16内上部固定设置对称挂台15,挂台15上可拆卸地放置细胞收集斗12,所述收集斗12的下部螺旋旋接细胞收集瓶13;所述上壳体4底部“v”形,与收集斗收集面平行,“v”形表面间隔设置向上壳体内的尖状突起11和漏孔10上壳体4侧壁设置固定孔20,横杆21穿于孔中,横杆21在上壳体4内的一端设置向下的弯头6,弯头6下端设置“v”形尖锤7,尖锤7表面设置尖状突起8,尖锤 7向下移动能与上壳体4底面的尖状突起11相交错咬合。
[0032]
所述上盖1上设置提手2,侧旁设置进料孔3。
[0033]
所述固定孔20通过弹性密封胶圈与横杆21固定密封。
[0034]
所述横杆21分为上壳内部分和上壳体外部分,所述横杆21的内部分和外部分在弹性密封胶圈处螺旋连接为一体。
[0035]
所述横杆21外部分的端部设置手动柄5。
[0036]
所述漏孔孔径为5mm。
[0037]
所述收集斗12下部为空圆柱体,其内部垂直圆柱设置过滤膜,其外壁设置螺纹19,与细胞收集瓶13之间螺旋旋紧。
[0038]
所述过滤膜为两层,分别夹于空圆柱内壁两环形凸缘18之间。
[0039]
所述两层过滤膜的上层滤膜孔径为3mm。
[0040]
所述两层过滤膜的下层滤膜孔径为1mm。
[0041]
使用时,将从新鲜健康脐带剥离得到的华通胶及消化酶液从进料孔3沿上壳体4内壁滑入上壳体底部。工作人员上下扳动手动柄5,横杆21以固定孔20为支点做杠杆运动,手动柄5向上移动时,尖锤7向下与上壳体4底面相挤压,尖锤7上的尖状突起7与上壳体4 底面的尖状突起11交错咬合,将华氏通胶破碎成块,小的组织块从漏孔10进入收集斗12,在收集斗12中组织块与消化酶一起进一步消化,再经两次滤膜过滤,更小的细胞块进入细胞收集瓶13中。
[0042]
当细胞收集瓶13收集的细胞接近瓶口时,工作人员从开合门14将细胞收集瓶13从收集斗12上旋下,取出。重新旋上新灭菌的细胞收集瓶,继续使用。取出的细胞收集瓶13 可以直接用于干细胞的接种培养。
[0043]
使用完毕时,打开上盖1,将横杆21从弹性密封胶圈处旋下,取出带尖锤7部分,从挂台15上拆下收集斗12。清洗上盖1、尖锤7、上壳体4、收集斗12。清洗完毕,将带尖锤的一端插入弹性密封胶圈固定处,与上壳体一起灭菌,上盖及收集斗分别灭菌。然后装配成使用状态。
[0044]
所述尖锤及上壳体底面采用金属材料制作,其他部分可采用金属或聚四氟乙烯材料制作。
[0045]
如图2所示,过滤膜夹缘18可通过上下管体之间螺旋旋紧将过滤膜夹于其间的方式形成。
[0046]
以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非对其限制,尽管参照上述实施例对本实施例进行了详细的说明,所属领域的普通技术人员依然可以对本实用新型的具体实施方式进行修改或者等同替换,而这些未脱离本实用新型精神和范围的任何修改或者等同替换,其均在申请待批的本实用新型的权利要求保护范围之内。
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