免疫逃避性肿瘤的治疗的制作方法

免疫逃避性肿瘤的治疗1.相关申请的交叉引用2.本技术要求于2020年4月30日提交的美国临时申请63/018,026以及于2019年7月31日提交的美国临时申请62/881,326的优先权和权益，出于所有目的，它们各自的内容据此全文以引用方式并入。
技术领域：
：3.本公开一般涉及单独地或与抗癌治疗剂组合地使用表面官能化颗粒来治疗肿瘤的方法。
背景技术：
：：4.过去十年的研究明确地证实了长期存在的假设，即免疫系统能够增强有效的抗肿瘤反应(1-3)。成功的免疫介导的肿瘤细胞清除取决于多种免疫细胞类型如抗原呈递细胞(apc)(例如，巨噬细胞和树突状细胞)、其他髓样细胞(例如，单核细胞和嗜中性粒细胞)，以及效应细胞(例如，b细胞、t细胞、nkt细胞和nk细胞)的总体活性(3-9)。然而，肿瘤细胞能够演变为导致免疫系统逃避的机制。促进肿瘤免疫逃避性的一个主要机制是抑制抗肿瘤免疫功能的蛋白质和可溶性因子(例如，pd-l1、cd47和tgf-β)的表达(10-12)。这些发现导致开发出旨在调节免疫系统以允许持续的抗肿瘤免疫功能的免疫疗法。虽然许多免疫治疗剂已被成功地开发用于临床应用和转化癌症治疗，但仅有一部分患者对免疫疗法有反应，并且许多作出反应的患者发展出对疗法的抗性。例如，仅20-30％的患者对检查点抑制剂(抗pd1/l1)疗法有反应。了解免疫疗法低反应率的潜在机制已导致鉴定出影响治疗成功的细胞和分子决定因素。这些决定因素中重要的是肿瘤的免疫状态、免疫细胞浸润，以及肿瘤突变负荷(13-15)。5.肿瘤的免疫状态的特征可广泛地基于肿瘤中免疫细胞(例如，cd4+t细胞、cd8+t细胞、nk1.1+nk细胞、apc、单核细胞和嗜中性粒细胞)浸润的程度、免疫细胞表型(例如，pd-1+、pd-l1+和pd-l2+)，以及正常免疫细胞功能(例如，ifn-γ、il-12、il-15和mhcii的表达)。表现出较高的免疫细胞浸润程度的肿瘤称为免疫“热性”肿瘤。由于免疫疗法依赖于tme中免疫细胞的存在，免疫“热性”肿瘤通常对免疫疗法反应良好并且与有利的结果相关。相比之下，表现出低水平免疫浸润——称为免疫“冷性”(或免疫逃避性、免疫保护、微卫星稳定、微卫星不稳定性低，包含低免疫浸润，包含低肿瘤突变负荷，和/或表现出异质性)的肿瘤对免疫疗法的反应不良(16,17)。还与决定肿瘤的免疫状态有关的是肿瘤微环境(tme)中促炎与抗炎介质之间的平衡。例如，tme中抗炎细胞如髓样来源抑制细胞(mdsc)(cd11b+ly6chi或cd11b+ly6g+)、m2肿瘤相关巨噬细胞(tam)(cd11b+f4/80+cd206+mhciilo)以及marco+tam存在的增加导致了tme中的免疫抑制以及抗肿瘤免疫功能的抑制，并且与对疗法的抗性以及不利的疾病结果相关(18-22)。6.肿瘤突变负荷(tmb)是影响对免疫疗法的治疗反应的重要肿瘤内在遗传因素。tmb定义为肿瘤基因组中每个编码碱基对的突变总数。携带高突变负荷的肿瘤被认为是高免疫原性的。频繁基因突变的存在产生肿瘤新抗原，这些肿瘤新抗原可被免疫系统识别，导致激活级联事件，最终诱导抗原特异性抗肿瘤反应。与该假设一致，研究显示出与低tmb相比，高tmb与对免疫疗法的较高反应率相关联(14,15,23,24)。因此，肿瘤的tmb状态的确定在癌症的诊断和治疗期间可为有益的。目前的临床实践依赖于微卫星不稳定性(msi)测试，以深入了解肿瘤的tmb状态(25)。msi是由dna错配修复系统缺陷所致的遗传超变性病症。高msi致使肿瘤积聚高突变负荷，并变为高度免疫原性。这样的肿瘤称为msi-高(msi-h)肿瘤。因此，msi-h肿瘤更可能对免疫疗法有反应，有几种免疫疗法被批准专门用于治疗msi-h肿瘤。相比之下，已发现错配修复熟练的微卫星稳定(mss)肿瘤是免疫疗法的不良反应者(12,26,27)。7.一些最常诊断的癌症(例如，膀胱癌、结肠直肠癌、卵巢癌和胰腺癌)也是最难以治疗的一些。大多数诊断患有癌症的患者具有对一线(例如，放射和/或联合化疗)和二线(例如，抗pd-1/l1)治疗反应不良或者完全无反应的肿瘤。这样的肿瘤的共同特征在于，它们是免疫“冷性”的、免疫保护的，在tme中含有抗炎和免疫抑制介质，具有低tmb，或者是微卫星稳定的(mss)/msi-低。肿瘤异质性进一步使治疗复杂化，因为治疗上无反应的肿瘤通常由表现出不同程度因素(例如，免疫浸润、tmb和msi)的肿瘤细胞异质群体构成，这些因素在决定对疗法的反应中发挥作用(28,29)。8.发明概述9.本文展示出表面官能化纳米粒子(sfp)针对这样的肿瘤有效：免疫“冷性”、免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”、微卫星稳定(“mss”)、微卫星不稳定性低(“msi”)，具有低免疫浸润，具有低肿瘤突变负荷，和/或表现出异质性。例如但不限于，这样的肿瘤可具有低tmb，mss/msi-低，和/或在tme中表现出抗炎或免疫抑制的细胞和分子因子。sfp可抑制肿瘤生长并诱导肿瘤细胞死亡。单独或与其他癌症治疗剂组合施用的sfp可用作多种癌症的有效治疗选项。事实上，如本文所述，sfp不局限于癌症类型，并且可用于治疗特征可为免疫“冷性”、免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”、微卫星稳定、微卫星不稳定性低、具有低免疫浸润、具有低肿瘤突变负荷和/或表现出异质性，或它们的组合的任何癌症。10.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个肿瘤，所述肿瘤的特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”、微卫星稳定、微卫星不稳定性低、包含低免疫浸润、包含低肿瘤突变负荷和/或表现出异质性。11.在各种实施方案中，表面官能化颗粒是不含连接的肽或抗原性部分或其他生物活性剂的带负电的颗粒。12.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫浸润低的肿瘤。在各种实施方案中，向具有一个或多个免疫浸润低的肿瘤的受试者施用改变肿瘤免疫浸润。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润包含抗原呈递细胞、髓样细胞和淋巴样细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的抗原呈递细胞包含巨噬细胞和/或树突状细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的髓样细胞包含单核细胞、嗜中性粒细胞、髓样来源抑制细胞(mdsc)以及肿瘤相关巨噬细胞(tam)。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的tam包含m1巨噬细胞、m2巨噬细胞，以及marco+巨噬细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的淋巴样细胞包含t细胞、b细胞、nkt细胞，以及nk细胞。13.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个免疫保护肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星稳定的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星低的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星不稳定性中度的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个肿瘤突变负荷低的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个肿瘤突变负荷中度的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个对疗法有抗性的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个免疫异质性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有遗传异质性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个难治性肿瘤。在一个或多个实施方案中，受试者具有在疗程期间发展出对疗法有抗性的肿瘤。14.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤。在各种实施方案中，施用改变肿瘤免疫浸润。在各种实施方案中，施用改变抗肿瘤免疫反应。在各种实施方案中，施用改变肿瘤微环境，该肿瘤微环境包含肿瘤细胞、免疫细胞、癌干细胞，以及基质。在各种实施方案中，施用将免疫冷性肿瘤转化为免疫热性肿瘤。在各种实施方案中，施用减小肿瘤尺寸和/或抑制肿瘤生长。在各种实施方案中，施用经由肿瘤细胞的直接颗粒摄取来诱导肿瘤细胞死亡、凋亡和/或坏死。15.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个特征为免疫保护和/或免疫逃避性的肿瘤。在各种实施方案中，施用改变肿瘤相关基质，该肿瘤相关基质包含成纤维细胞、癌相关成纤维细胞、脂肪细胞、周细胞、内皮、脉管系统、淋巴管、肿瘤相关脉管系统、间充质基质细胞、间充质干细胞，以及细胞外基质。16.在各种实施方案中，表面官能化颗粒是聚乙醇酸(pga)颗粒、聚乳酸(pla)颗粒、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)颗粒、聚苯乙烯颗粒、金刚石颗粒、或铁、锌、镉、金、或银颗粒，或它们的组合。17.在一些实施方案中，表面官能化颗粒是聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)颗粒。在各种实施方案中，颗粒包含约50:50、约80:20至约100:0的聚乳酸:聚乙醇酸，或者约50:50、约80:20至约100:0的聚乙醇酸:聚乳酸。在各种实施方案中，颗粒包含50:50的聚乳酸:聚乙醇酸。在各种实施方案中，颗粒包含约99:1至约1:99，例如约99:1、约95:5、约90:10、约85:15、约80:20、约75:25、约70:30、约65:35、约60:40、约55:45、约50:50、约45:55、约40:60、约35:65、约30:70、约25:75、约20:80、约15:85、约10:90、约5:95，以及约1:99(包括处于这些值之间的所有值和范围)的聚乳酸:聚乙醇酸。18.在各种实施方案中，通过羧化来实现表面官能化。羧化可以在原本中性的颗粒上产生负电荷，或者其可以增加带负电的颗粒的负电荷。不受理论的约束，羧化产生带负电荷的表面，并且这种负电荷在免疫逃避性肿瘤中引发治疗反应。在一些实施方案中，表面官能化颗粒不包含治疗剂，如包埋或连接的癌症治疗剂。在另一些实施方案中，通过添加靶向剂来实现表面官能化。在一些实施方案中，靶向剂包含多肽、抗体、碳水化合物、核酸、脂质、小分子，以及表面活性剂。在各种实施方案中，表面官能化纳米粒子优先靶向单核细胞、嗜中性粒细胞、巨噬细胞、t细胞、b细胞、nk细胞、nkt细胞、成纤维细胞、癌相关成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、周细胞、内皮、脉管系统、淋巴管、肿瘤相关脉管系统、间充质基质细胞、间充质干细胞和/或细胞外基质。19.在各种实施方案中，颗粒具有-100mv至-1mv的ζ电位。在各种实施方案中，颗粒具有-80mv至-30mv的ζ电位。在一些实施方案中，颗粒的ζ电位为约-100mv至约-40mv、约-75mv至约-40mv、约-70mv至约-30mv、约-60mv至约-35mv、或约-50mv至约-40mv。在各种实施方案中，ζ电位为约-30mv、-35mv、-40mv、-45mv、-50mv、-55mv、-60mv、-65mv、-70mv、-75mv、-80mv、-85mv、-90mv、-95mv或-100mv，包括处于这些值之间的所有值和范围。20.在各种实施方案中，带负电的颗粒的直径为0.1μm至10μm。在各种实施方案中，颗粒具有约0.2μm至约2μm；约0.3μm至约5μm；约0.5μm至约3μm；或约0.5μm至约1μm的平均直径。在一些实施方案中，颗粒具有约100至1500nm、约200和2000nm、约100至1000nm、约300至1000nm、约400至800nm、或约200至700nm的直径。在各种实施方案中，颗粒具有约100nm、200nm、300nm、400nm、500nm、600nm、700nm、800nm、900nm、1000nm、1100nm、1200nm、1300nm、1400nm、1500nm、或2000nm(包括处于这些值之间的所有值和范围)的平均直径。在一些实施方案中，带负电的颗粒的直径为400nm至800nm。21.在各种实施方案中，颗粒是具有-80至-30mv的ζ电位以及200至2000nm的直径的plga颗粒，任选地通过羧化而表面官能化。22.在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者施用组合物，该组合物包含单独或与癌症治疗剂组合的带负电的plga颗粒，其中所述颗粒不包含肽、抗原性部分或其他生物活性剂，直径为400nm至800nm且ζ电位为-1mv至-100mv，并且其中受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤。23.在各种实施方案中，受试者患有选自以下的癌症：脑癌、皮肤癌、眼癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、食道癌、头颈癌、宫颈癌、肝癌、结肠癌、骨癌、子宫癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌、口腔癌、甲状腺癌、肾癌、睾丸癌、白血病、淋巴瘤以及间皮瘤。在具体实施方式中公开了该方法预期的额外癌症。24.在各种实施方案中，癌症治疗剂是选自以下的化学治疗剂：生长抑制剂、dna复制抑制剂、激酶抑制剂、信号传导级联抑制剂、血管生成抑制剂、代谢抑制剂、氨基酸合成抑制剂、致癌蛋白的选择性抑制剂、转移的抑制剂、抗凋亡因子的抑制剂、凋亡诱导剂、核苷信号传导抑制剂、酶抑制剂以及dna损伤剂。25.在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种选自以下的生物剂：细胞因子、血管生成抑制剂、免疫检查点调节剂、酶以及单克隆抗体。26.在各种实施方案中，细胞因子选自转化生长因子、肿瘤坏死因子、干扰素以及白介素。示例性细胞因子包括但不限于ifn-α、ifn-β、ifn-γ、il-1、il-2、il-4、il-5、il-6、il-7、il-10、il-11、il-12、il-13、il-15、il-17、il-18、il-21、转化生长因子β超家族成员(包括tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3)、肿瘤坏死因子α、粒细胞集落刺激因子(g-csf)，以及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)。27.在各种实施方案中，癌症治疗剂包含酶。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含酶，该酶靶向t细胞、b细胞、apc、单核细胞、mdsc、tam、嗜中性粒细胞、其他单核细胞来源的细胞、肿瘤相关基质、癌干细胞、间充质干细胞、细胞外基质，以及氨基酸。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含选自以下的酶：天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、l-精氨酸脱亚胺酶、l-甲硫氨酸-γ-裂解酶、一种或多种氨基酸降解酶，以及一种或多种核苷降解酶。28.在各种实施方案中，单克隆抗体是单-特异性、双-特异性、三-特异性或双特异性t细胞接合(bite)抗体。29.在各种实施方案中，单克隆抗体是诱导抗肿瘤免疫反应的免疫细胞共刺激分子激动剂。示例性共刺激分子包括但不限于icos(可诱导性t细胞共刺激因子)(cd278)、ox40(cd134)、gitr(糖皮质激素诱发型肿瘤坏死因子受体)、cd40以及cd27。30.在各种实施方案中，单克隆抗体选自阿仑单抗、贝伐单抗、本妥昔单抗、西妥昔单抗、地诺单抗、替伊莫单抗、曲妥珠单抗、帕尼单抗、帕妥珠单抗，以及利妥昔单抗。在各种实施方案中，单克隆抗体靶向受体酪氨酸激酶、egfr、vegf、vegfr、pdgf、pdgfr、tgf-β、tgf-β-lap、sirp-α、cd47、cd39、cd73，以及成纤维细胞活化蛋白(fap)。31.在各种实施方案中，免疫检查点调节剂靶向程序性细胞死亡蛋白1(pd1)、程序性细胞死亡蛋白配体-1(pd-l1)、细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4(ctla-4)、t细胞免疫球蛋白和含粘蛋白结构域-3(tim-3)、淋巴细胞活化基因3(lag-3)和/或tigit(具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体)。在各种实施方案中，免疫检查点调节剂是选自以下的抗体：伊匹单抗、替西木单抗、派姆单抗、纳武单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、西米普利单抗以及德瓦鲁单抗。32.在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种选自以下的基于细胞的疗法：过继性细胞转移、肿瘤浸润性白细胞疗法、嵌合抗原受体t细胞疗法(car-t)、nk细胞疗法以及干细胞疗法。33.在各种实施方案中，基于细胞的疗法是自体患者来源的细胞的过继转移。在各种实施方案中，基于细胞的疗法是同种异体供体来源的细胞的过继转移。34.在各种实施方案中，基于细胞的疗法是通用型供体来源或诱导性多能干细胞来源的细胞的转移，所述细胞不是患者特异性的并且适合长期储存。这样的疗法也称为“非专门设计的”疗法。35.在各种实施方案中，癌症治疗剂是激素疗法。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种抗体-药物缀合物。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种癌症疫苗。在各种实施方案中，癌症疫苗是蛋白质、多肽和/或核酸疫苗。36.在各种实施方案中，癌症治疗剂是选自以下的免疫疗法：溶瘤病毒、细菌、溶瘤细菌或其他细菌聚生体、肿瘤细胞裂解物、细菌细胞裂解物、脂多糖(lps)、卡介苗(bcg)、微生物组调节剂和/或toll样受体(tlr)激动剂。在各种实施方案中，tlr激动剂是tlr3、tlr4、tlr5、tlr7、tlr8、tlr9、tlr10、tlr11、tlr12和/或tlr13激动剂。在各种实施方案中，tlr激动剂来源于病毒、细菌，和/或以合成方式制备。在各种实施方案中，免疫疗法是sting途径调节剂。37.在各种实施方案中，癌症治疗剂包含病毒或细菌载体。在各种实施方案中，病毒载体选自腺病毒、腺相关病毒(aav)、单纯疱疹病毒、慢病毒、逆转录病毒、甲病毒、黄病毒、弹状病毒、麻疹病毒、新城鸡瘟病毒、痘病毒、牛痘病毒、改良安卡拉病毒、水疱性口炎病毒、小核糖核酸病毒、烟草花叶病毒、马铃薯病毒x、豇豆花叶病毒、或黄瓜花叶病毒。在各种实施方案中，病毒是溶瘤病毒。在各种实施方案中，病毒是嵌合病毒、合成病毒、花叶病毒或假型病毒。38.在具体实施方式中阐述了预期用于该方法的额外癌症治疗剂。39.在各种实施方案中，每天一次、每天两次、每天三次、每周七次、每周六次、每周五次、每周四次、每周三次、每周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次、每4周一次、每两个月一次、每三个月一次、每6个月一次或每年一次施用表面官能化颗粒和/或癌症治疗剂。在各种实施方案中，将表面官能化颗粒和/或癌症治疗剂施用1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、或52周、或更多。40.在各种实施方案中，将颗粒和/或癌症治疗剂经静脉内、口服、经鼻、肌内、经眼、经皮或皮下施用。41.在各种实施方案中，受试者是哺乳动物。在各种实施方案中，受试者是人。42.在各种实施方案中，施用改善癌症或增生性障碍的一种或多种症状。在各种实施方案中，一种或多种症状选自受试者中的肿瘤尺寸或肿瘤负荷、肿瘤转移，以及肿瘤内炎性细胞的水平。在各种实施方案中，施用使肿瘤尺寸或肿瘤负荷减小约10％、20％、30％或更多。在各种实施方案中，施用使肿瘤尺寸或肿瘤负荷减小约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或约100％，包括这些值之间的所有值和范围。43.在各种实施方案中，将颗粒配制在包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合物中。在各种实施方案中，将癌症治疗剂配制在包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合物中。在各种实施方案中，可以将颗粒和癌症治疗剂配制在同一组合物中或者分开的组合物中。44.还预期了组合物，包括本公开的任何前述表面官能化颗粒或癌症治疗剂组合物，或者其在制备用于治疗本文所述的与炎症和癌症和/或增殖性疾病相关的任何障碍的药物中的用途。45.应理解，本文所述的每个特征或实施方案、或组合是本发明的任何方面的非限制性例示性实例，并因此意味着可与本文所述的任何其他特征或实施方案、或组合进行组合。例如，在用如“各种实施方案”、“一个实施方案”、“一些实施方案”、“某些实施方案”、“另外的实施方案”、“特定示例性实施方案”和/或“另一个实施方案”的语言描述特征的情况下，这些类型的实施方案中的每者均是旨在与本文所述的任何其他特征、或特征的组合进行组合的特征的非限制性实例，而不必列出每一种可能的组合。这样的特征或特征的组合适用于本公开的任何方面。在公开落入范围内的值的实例的情况下，任何这些实例均被预期为范围的可能端点，预期这样的端点之间的任何和所有数值，并且设想上端点和下端点的任何和所有组合。附图说明46.图1a-1f显示sfp针对具有低tmb的免疫“冷性”肿瘤的功效。(图1a)所指示的治疗对肿瘤中细胞活力的影响(n＝5)。(图1b)所指示的治疗对b16f10肿瘤生长的影响。治疗在可触知的肿瘤形成后开始(第0天)(n＝10)。(图1c)在可触知的肿瘤形成后(第0天)施用的所指示治疗对b16f10荷瘤小鼠的存活的影响(n＝10)。(图1d-1f)所指示的治疗对肿瘤中的mdsc(图1d)、tam(图1e)和nk细胞(图1f)的频率的影响(n＝5)。执行单因素方差分析测试以确定统计学显著性(n.s＝p》0.5；*＝p≤0.05；**＝p≤0.01；****＝p≤0.0001)47.图2a-2b显示在原位4t1肿瘤接种后，用表面官能化颗粒治疗抑制初级生长的功效。(图2a)在整个实验过程中测量肿瘤体积，并且显示每个治疗组的生长曲线。(图2b)显示了在用盐水、抗pd1、或cnp-301治疗的组中，肿瘤接种后第21天的平均肿瘤尺寸。在肿瘤接种后的不同时间点(第1、2、4、或5天)开始cnp-301治疗。第21天平均肿瘤尺寸在盐水组与第1天和第2天cnp-301治疗组之间显著不同(分别为p＝0.006和p＝0.0295)。抗pd1组的平均肿瘤尺寸也大于第1天cnp-301治疗组(p＝0.0194)。使用单因素方差分析与tukey多项比较测试比较肿瘤尺寸。每组n＝7-8。48.图3a-3b显示出用表面官能化颗粒治疗抑制肺转移。(图3a)使用的肺中转移病灶的生物发光成像显示cnp-301抑制转移病灶的肿瘤转移和生长。显示了在用盐水、抗pd1或cnp-301治疗的动物的肺中的转移病灶的评价期间获得的图像。在肿瘤接种后的不同时间点(第1、2、4、或5天)开始cnp-301治疗。(图3b)定量来自图3a中的图像的总通量，并在图3b中以红色虚线显示，指示可检测转移的近似通量截止值。每组n＝7-8。49.图4a-4b显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗抑制预先存在的转移。(图4a)将4t1原发性肿瘤接种到乳腺脂肪垫中并允许生长直至第11天。(图4b)在第11天，手术切除原发性肿瘤，并且开始用盐水或cnp-301(1mg/小鼠)治疗。在第42天通过使用测定生物发光信号来评价肺转移。每组n＝9-10。50.图5a-5e显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗对b16f10荷瘤小鼠的血液中的细胞因子/趋化因子水平的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成后开始用盐水或cnp-301治疗。治疗经由iv注射每三天施用一次。在第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)测量血液中所指示细胞因子和趋化因子的水平(图5a，mip-1β；图5b，tnfα；图5crantes(ccl5)；图5d，ifnγ；和图5e，mcp-1)。51.图6a-6g显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗对血液中的免疫细胞的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成后开始用盐水或cnp-301治疗。治疗经由iv注射每三天施用一次。在第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)，测定血液中的pd-l1+(图6a)单核细胞(cd11b+ly6c+ly6g-)和(图6b)粒细胞(cd11b+ly6c+ly6g+)、(图6c)细胞表面il-15+细胞(cd45+)、(图6d)总nk细胞(cd3-nk1.1+)、(图6e)颗粒酶+nk细胞(cd3-nk1.1+)、(图6f)穿孔素+nk细胞(cd3-nk1.1+)，以及(图6g)cd244+nk细胞(cd3-nk1.1+)的频率。通过流式细胞术测定血液中的免疫细胞。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。52.图7a-7d显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗对肿瘤中的免疫细胞的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成后开始用盐水或cnp-301治疗。治疗经由iv注射每三天施用一次。在第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)，测定血液中的(图7a)细胞表面il-15+细胞(cd45+)、(图7b)颗粒酶+nk细胞(cd3-nk1.1+)、(图7c)穿孔素+nk细胞(cd3-nk1.1+)和(图7d)cd244+nk细胞(cd3-nk1.1+)的频率。通过流式细胞术测定血液中的免疫细胞。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。53.图8a-8e显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗对mc38荷瘤小鼠的血液中的细胞因子/趋化因子水平的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射mc38肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成后开始用盐水或cnp-301治疗。治疗经由iv注射每三天施用一次。在第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)，测量血液中所指示细胞因子和趋化因子的水平(图8a，mip-1β；图8b，tnfα；图8crantes(ccl5)；图8d，ifnγ；和图8e，mcp-1)。通过elisa测定血液中的细胞因子/趋化因子。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。54.图9a-9g显示用表面官能化颗粒cnp-301治疗对血液中的免疫细胞的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射mc38肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成后开始用盐水或cnp-301治疗。治疗经由iv注射每三天施用一次。在第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)，测定血液中的pd-l1+(图9a)单核细胞(cd11b+ly6c+ly6g-)和(图9b)粒细胞(cd11b+ly6c+ly6g+)、(图9c)细胞表面il-15+细胞(cd45+)、(图9d)总nk细胞(cd3-nk1.1+)、(图9e)颗粒酶+nk细胞(cd3-nk1.1+)、(图9f)穿孔素+nk细胞(cd3-nk1.1+)，以及(图9g)cd244+nk细胞(cd3-nk1.1+)的频率。通过流式细胞术测定血液中的免疫细胞。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。55.图10显示在b16f10肿瘤模型中il-15阻断对表面官能化颗粒cnp-301的功效的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(50mm3)后，在采用或不采用抗il-15抗体的情况下用盐水或cnp-301治疗动物。同种型igg抗体用作对照。盐水/cnp-301经由静脉内注射施用。同种型/抗il-15抗体经由腹膜内注射施用。所有治疗每三天施用一次。在盐水/cnp-301开始前一天，开始施用同种型/抗il15治疗。显示了在存在(igg)或不存在(抗il-15)il-15的情况下，用盐水或cnp-301治疗的小鼠的肿瘤体积。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。56.图11显示在b16f10肿瘤模型中nk细胞衰竭对表面官能化颗粒cnp-301的功效的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(50mm3)后，在采用或不采用抗nk1.1抗体的情况下用盐水或cnp-301治疗动物。同种型抗体用作对照。盐水/cnp-301经由静脉内注射施用。同种型/抗nk1.1抗体经由腹膜内注射施用。所有治疗每三天施用一次。显示了在存在(igg)或不存在(抗nk1.1)nk细胞的情况下用盐水或cnp-301治疗的小鼠的肿瘤体积。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。57.图12显示在mc38肿瘤模型中nk细胞衰竭对表面官能化颗粒cnp-301的功效的影响。c57bl/6小鼠经皮下注射mc38肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(50mm3)后，在采用或不采用抗nk1.1抗体的情况下用盐水或cnp-301治疗动物。同种型抗体用作对照。盐水/cnp-301经由静脉内注射施用。同种型/抗nk1.1抗体经由腹膜内注射施用。所有治疗每三天施用一次。显示了在存在(igg)或不存在(抗nk1.1)nk细胞的情况下用盐水或cnp-301治疗的小鼠的肿瘤体积。采用bonferroni多项比较测试通过双因素方差分析确定统计学显著性。每组n＝5。58.图13a-13b显示表面官能化颗粒cnp-301对血液和肺中髓样来源的细胞的影响。在balb/c小鼠中建立原位4t1乳腺肿瘤。(图13a)在肿瘤接种后三天，向小鼠施用单剂量的盐水或cnp-301。在治疗后12小时，从小鼠收集血液并通过流式细胞术评价(cd11b+/f4/80+)、单核细胞(cd11b+ly6c+)、mdsc(cd11b+/ly6clo/-/ly6g+)和树突状细胞(cd11c+)的频率(n＝4)。(图13b)在肿瘤接种后三天，连续六天向小鼠施用盐水或cnp-301。在肿瘤接种后第10天，收获肺并通过流式细胞术评价(cd11b+/f4/80+)、单核细胞(cd11b+ly6c+)、mdsc(cd11b+/ly6clo/-/ly6g+)和树突状细胞(cd11c+)的频率(n＝4)。执行双因素方差分析与tukey多项比较测试。统计学显著性定义为***p《0.001和****p《0.0001。59.图14a-14d显示llc荷瘤小鼠中表面官能化颗粒cnp-301的细胞摄取测定的结果。在c57bl/6小鼠中建立llc肿瘤。在可触知的肿瘤形成后，经由静脉内注射向动物施用盐水(对照)或包被荧光标记的(alexa-fluor647)ova的cnp-301。在iv注射后2小时处死小鼠，并且通过流式细胞术测定cnp-301摄取。(图14a)显示出llc肿瘤中的cnp-301-阳性(apc-cnp-301)tam(cd11b+f4/80+)、m-mdsc(cd11b+ly6c+ly6g-)、pmn-mdsc(cd11b+ly6c-ly6g+)和成纤维细胞(cd45-cd140a+)的频率的流式细胞仪散点图。(图14b)llc肿瘤中的cnp-301阳性(apc-cnp-301)tam(cd11b+f4/80+)、m-mdsc(cd11b+ly6c+ly6g-)、pmn-mdsc(cd11b+ly6c-ly6g+)和成纤维细胞(cd45-cd140a+)的频率。(图14c)显示出llc荷瘤小鼠的脾中的cnp-301-阳性(apc-cnp-301)巨噬细胞(cd11b+f4/80+)、m-mdsc(cd11b+ly6c+ly6g-)和pmn-mdsc(cd11b+ly6c-ly6g+)的频率的流式细胞仪散点图。(图14d)llc荷瘤小鼠的脾中的cnp-301阳性(apc-cnp-301)巨噬细胞(cd11b+f4/80+)、m-mdsc(cd11b+ly6c+ly6g-)和pmn-mdsc(cd11b+ly6c-ly6g+)的频率。60.图15a-15b显示了表面官能化颗粒cnp-301对llc肿瘤中的肿瘤相关巨噬细胞和成纤维细胞中的基因表达的影响。在c57bl/6小鼠中建立llc肿瘤。在可触知的肿瘤形成后，经由每周静脉内注射两次向动物施用盐水(对照)或cnp-301，持续两周。在治疗结束时，处死小鼠，并且收获肿瘤。(图15a)在分离自llc肿瘤的tam(cd11b+f4/80+)中通过qpcr评价的所指示基因的表达。(图15b)在分离自llc肿瘤的成纤维细胞(cd45-cd140a+)中通过qpcr评价的所指示基因的表达。61.发明详述62.本公开展示了与检查点抑制剂的典型免疫疗法相比，如本文所述的表面官能化颗粒能够在如下肿瘤中更大程度地降低体内肿瘤生长：(i)免疫逃避性，(ii)免疫“冷性”，(iii)免疫保护，(iv)微卫星稳定，(iv)微卫星不稳定性低，(v)包含低免疫浸润，(vi)包含低肿瘤突变负荷，和/或(vii)表现出异质性。单独的表面官能化颗粒具有这样的效应的能力是令人惊奇且意料不到的，并且支持了表面官能化颗粒用于治疗患有癌症(特别是可能对免疫治疗剂无反应或难治的癌症)的受试者的用途。63.定义64.本文引用的每篇出版物、专利申请、专利和其他参考文献在其与本公开不矛盾的程度上全文以引用方式并入本文。65.在此需注意，如在本说明书和所附权利要求书中所用，单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代，除非上下文另外明确规定。66.如本文所用，“颗粒”是指任何非组织来源的物质组合物，其可以是球形或球状实体、珠粒或脂质体。取决于上下文，术语“颗粒”、术语“免疫修饰颗粒”以及术语“珠粒”可以互换使用。另外，术语“颗粒”可用于涵盖珠粒和球体。67.如本文所用，“表面官能化的”是指在其表面上具有一个或多个官能团的颗粒。在一些实施方案中，表面官能化通过将一个或多个官能团引入颗粒表面而发生。“表面官能化颗粒”(sfp)是指在颗粒表面上包含官能团的如本文所述的颗粒。在实施方案中，表面官能化可通过羧化(即，向颗粒表面添加一个或多个羧基)或者添加其他化学基团(例如，赋予负表面电荷的其他化学基团)来实现。因为表面官能团提供用于配体缀合的位点，表面官能化颗粒还可包括靶向剂，如多肽、抗体、核酸、脂质、小分子、碳水化合物，以及表面活性剂。制备表面官能化纳米粒子的方法描述于例如froimowicz等人,currorg.chem17:900-912,2013中。在各种实施方案中，预期表面官能化颗粒包括不含治疗剂，例如不含连接的肽或抗原性部分或其他生物活性剂的带负电的颗粒。68.如本文所用，“带负电的颗粒”是指被修饰成具有小于零的净表面电荷的颗粒。在实施方案中，带负电的颗粒是表面官能化颗粒，其中颗粒被羧化从而具有负表面电荷。69.ζ电位是在固体表面与其液体介质之间的界面处产生的电荷。“负ζ电位”是指具有如以毫伏(mv)表示的颗粒表面ζ电位的颗粒，并且通过本领域已知用于计算ζ电位的仪器(例如，nanobrookzetaplusζ电位分析仪或malvernzetasizer)进行测量。[0070]“羧化颗粒”或“羧化珠粒”或“羧化球体”包括被修饰或表面官能化成将一个或多个羧基添加到颗粒表面上的任何颗粒。在一些实施方案中，羧基的添加增强了吞噬细胞/单核细胞对循环中颗粒的摄取，例如通过与清道夫受体如marco的相互作用。颗粒的羧化可以用添加羧基的任何化合物来实现，包括但不限于聚(乙烯-马来酸酐)(pema)。羧化还可通过使用具有天然羧基的聚合物(例如plga)来形成颗粒而实现，其中制造过程导致羧基位于颗粒的表面上。[0071]如本文所用，“可生物降解的”是指包含可经历降解的聚合物的颗粒，该降解例如是由于官能团与溶液中的水反应的结果。如本文所用，术语“降解”是指通过分子量的减小或者通过疏水基团向亲水基团的转化而变得可溶。可生物降解颗粒不会在体内长时间持续存在，并且可以控制完全降解的时间。可用于本发明的生物相容性可生物降解的聚合物包括己内酯、碳酸酯、酰胺、氨基酸、原酸酯、缩醛、氰基丙烯酸酯和可降解聚氨酯的聚合物或共聚物，以及这些与直链或支链、取代或未取代的烷基、卤代烷基、硫代烷基、氨基烷基、烯基、或芳族羟基-或二羧酸的共聚物。此外，生物学上重要的具有反应性侧链基团的氨基酸，如赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和半胱氨酸、或它们的对映体，可以包括在与任何前述材料的共聚物中，以提供用于缀合至抗原肽和蛋白质或缀合部分的反应性基团。适于本发明的可生物降解材料包括金刚石、pla、pga、聚丙硫醚和plga聚合物，以及金属，如铁(fe)、锌(zn)、镉(cd)、金或银。生物相容但不可生物降解的材料也可用于本文所述的颗粒中。例如，可以采用丙烯酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯、酰基取代的醋酸纤维素、不可降解聚氨酯、苯乙烯、氯乙烯、氟乙烯、乙烯基咪唑、氯磺化烯烃、环氧乙烷、乙烯醇、(dupont,wilmington,del.)和尼龙的不可生物降解聚合物。[0072]如本文所用，术语“肿瘤微环境”(tme)是指围绕肿瘤细胞并向肿瘤细胞供给的细胞、分子以及血管(国家癌症研究所癌症术语词典，nationalcancerinstitutedictionaryofcancerterms)。肿瘤微环境包括免疫细胞，如骨髓来源的炎性细胞、髓单核细胞、髓样来源抑制细胞、肿瘤相关巨噬细胞，以及淋巴细胞、成纤维细胞、信号分子和细胞外基质(ecm)(joyce等人,science348:74-80,2015)。[0073]如本文所用，术语“热性肿瘤”是指例如在tme中或者在肿瘤部位处表现出较高程度的免疫细胞浸润，并且通常对免疫疗法反应良好的肿瘤。[0074]如本文所用，术语“冷性肿瘤”涵盖表现出低水平的免疫浸润，对免疫疗法反应不良，具有低肿瘤突变负荷，并且微卫星稳定或者微卫星不稳定性低(关于dna错配修复)，和/或表现出肿瘤异质性的肿瘤。冷性肿瘤也称为免疫逃避性的或免疫保护的。参见例如参考文献9、16、17、23和24，以进一步描述热性和冷性肿瘤表征。[0075]如本文所用，术语“受试者”是指被施用如本文所述的颗粒的人或非人动物，包括哺乳动物或灵长类。受试者可以包括动物如狗、猫、大鼠、小鼠、兔、马、猪、绵羊、牛，以及人和其他灵长类。[0076]术语“治疗剂”是指在以治疗有效量施用时能够改善或减轻所治疗的疾病或障碍的一种或多种症状或体征的部分。治疗剂的非限制性实例包括其他癌症治疗剂，包括肽、蛋白质、或小分子治疗剂。[0077]术语“治疗有效量”在本文中用于指示有效地改善或减轻所治疗的疾病或障碍的一种或多种症状或体征的本公开的靶特异性组合物的量。[0078]如关于本文的方法所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treated)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指暂时或永久地，部分或完全地消除、减少、抑制或改善事件、疾病或病症的一种或多种临床症状、表现或进展。这样的治疗不需要绝对可用。[0079]表面官能化颗粒[0080]本公开提供了表面官能化颗粒在本文所述的治疗方法中的用途。[0081]表面官能化颗粒可由广泛的材料形成。颗粒优选地由适于生物用途的材料(例如，药学上可接受的材料)构成。例如，颗粒可由玻璃、二氧化硅、羟基羧酸的聚酯、二羧酸的聚酸酐、或羟基羧酸和二羧酸的共聚物以及生物相容性金属构成。在各种实施方案中，颗粒可由直链或支链、取代或未取代、饱和或不饱和、直链或交联的烷基、卤代烷基、硫代烷基、氨基烷基、芳基、芳烷基、烯基、芳烯基、杂芳基、或烷氧基羟基酸的聚酯，或者直链或支链、取代或未取代、饱和或不饱和、直链或交联的烷基、卤代烷基、硫代烷基、氨基烷基、芳基、芳烷基、烯基、芳烯基、杂芳基、或烷氧基二羧酸的聚酸酐构成。另外，颗粒可以是量子点，或者由量子点，如量子点聚苯乙烯颗粒构成(joumaa等人(2006)langmuir22:1810-6)。还可以采用包括酯和酸酐键的混合物(例如，乙醇酸和癸二酸的共聚物)的颗粒。例如，颗粒可包含材料，包括聚乙醇酸聚合物(pga)、聚乳酸聚合物(pla)、聚癸二酸聚合物(psa)、聚(乳酸-共-乙醇酸)共聚物(plga或plg；术语是可互换的)、聚(乳酸-共-癸二酸)共聚物(plsa)、聚(乙醇酸-共-癸二酸)共聚物(pgsa)、聚丙硫醚聚合物、聚(己内酯)、壳聚糖等。可用于本发明的其他生物相容性可生物降解的聚合物包括己内酯、碳酸酯、酰胺、氨基酸、原酸酯、缩醛、氰基丙烯酸酯和可降解聚氨酯的聚合物或共聚物，以及这些与直链或支链、取代或未取代的烷基、卤代烷基、硫代烷基、氨基烷基、烯基、或芳族羟基-或二羧酸的共聚物。此外，生物学上重要的具有反应性侧链基团的氨基酸，如赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和半胱氨酸、或它们的对映体，可以包括在与任何前述材料的共聚物中，以提供用于缀合至抗原肽和蛋白质或缀合部分的反应性基团。[0082]在实施方案中，表面官能颗粒包含一种或多种可生物降解聚合物或材料。适于本发明的可生物降解材料包括金刚石、pla、pga、聚丙硫醚和plga聚合物，以及金属，如铁(fe)、锌(zn)、镉(cd)、金(au)或银(ag)。[0083]生物相容但不可生物降解的材料也可用于本文所述的颗粒中。例如，可以采用丙烯酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯、酰基取代的醋酸纤维素、不可降解聚氨酯、苯乙烯、氯乙烯、氟乙烯、乙烯基咪唑、氯磺化烯烃、环氧乙烷、乙烯醇、(dupont,wilmington,del.)和尼龙的不可生物降解聚合物。[0084]在各种实施方案中，颗粒包含聚合物、共聚物、树枝状大分子、金刚石纳米粒子、聚苯乙烯纳米粒子或金属。在各种实施方案中，预期颗粒包含聚乙醇酸聚合物(pga)、聚乳酸(pla)、苯乙烯、plg和pla的共聚物(聚(丙交酯-共-乙交酯)，plga)、金刚石、脂质体、peg、环糊精、或金属，如铁(fe)、锌(zn)、镉(cd)、金(au)或银(ag)，或它们的组合。[0085]本公开的表面官能化颗粒可以通过本领域已知的任何方式制造。制造颗粒的示例性方法包括但不限于微乳液聚合、界面聚合、沉淀聚合、乳液蒸发、乳液扩散、溶剂置换和盐析(astete和sabliov,j.biomater.sci.polymeredn.,17:247-289(2006))。制备本文预期的表面官能化颗粒的方法公开于us专利9,616,113和国际专利公开wo2017/143346中。plga颗粒的制造过程的操纵可以控制颗粒特性(例如，尺寸、粒度分布、ζ电位、形态、疏水性/亲水性、多肽包载等)。表面官能化颗粒的尺寸受许多因素影响，包括但不限于聚合物(例如plga)的浓度、颗粒制造中使用的溶剂、有机相的性质、制造中使用的表面活性剂、连续相和非连续相的粘度、所用溶剂的性质、所用水的温度、超声处理、蒸发速率、添加剂、剪切应力、灭菌，以及任何包被的抗原或多肽的性质。[0086]在各种实施方案中，表面官能化颗粒是具有约50:50或约80:20至约99:1的聚乳酸:聚乙醇酸、或者约50:50或约80:20至约99:1的聚乙醇酸:聚乳酸的摩尔比的共聚物。在一些实施方案中，表面官能化颗粒是聚(乳酸-共-乙醇酸)颗粒。在各种实施方案中，表面官能化颗粒包含50:50的聚乳酸:聚乙醇酸。在各种实施方案中，表面官能化颗粒包含约99:1至约1:99，例如约99:1、约95:5、约90:10、约85:15、约80:20、约75:25、约70:30、约65:35、约60:40、约55:45、约50:50、约45:55、约40:60、约35:65、约30:70、约25:75、约20:80、约15:85、约10:90、约5:95，以及约1:99(包括处于这些值之间的所有值和范围)的聚乳酸:聚乙醇酸。[0087]在一些实施方案中，表面官能化颗粒的ζ电位为约-100mv至约-1mv。在一些实施方案中，表面官能化颗粒的ζ电位为约-100mv至约-40mv、约-80mv至约-30mv、约-75mv至约-40mv、约-70mv至约-30mv、约-60mv至约-35mv、或约-50mv至约-40mv。在各种实施方案中，ζ电位为约-30mv、-35mv、-40mv、-45mv、-50mv、-55mv、-60mv、-65mv、-70mv、-75mv、-80mv、-85mv、-90mv、-95mv或-100mv，包括处于这些值之间的所有值和子范围。[0088]在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有约0.1μm至约10μm的平均直径。在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有0.2μm至约2μm的平均直径。在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有约0.3μm至约5μm的直径。在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有约0.5μm至约3μm的直径。在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有约0.5μm至约1μm的直径。在一些实施方案中，表面官能化颗粒具有约100至1500nm、约200和2000nm、约100至10000nm、约300至1000nm、约400至800nm或约200至700nm(包括处于这些值之间的所有值和子范围)的直径。[0089]为了向人或其他哺乳动物施用如本文所述的表面官能化颗粒，可以将颗粒配制成包含一种或多种无菌药学上可接受的载体的无菌组合物。短语“药学上或药理学上可接受的”是指当使用如下所述的本领域公知的途径施用时不产生过敏或其他不良反应的分子实体和组合物。“药学上可接受的载体”包括任何和所有临床上可用的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。[0090]含有本文的表面官能化颗粒的本公开的药物组合物可以含有无菌的药学上可接受的载体或添加剂，这取决于施用途径。这样的载体或添加剂的实例包括水、药学上可接受的有机溶剂、胶原蛋白、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、羧乙烯聚合物、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸钠、海藻酸钠、水溶性葡聚糖、羧甲基淀粉钠、果胶、甲基纤维素、乙基纤维素、黄原胶、阿拉伯树胶、酪蛋白、明胶、琼脂、双甘油、甘油、丙二醇、聚乙二醇、凡士林、石蜡、硬脂醇、硬脂酸、人血清白蛋白(hsa)、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、药学上可接受的表面活性剂等。取决于本发明的剂型，所使用的添加剂视情况而定选自但不限于以上物质或它们的组合。对于溶液或乳液，合适的载体包括例如水溶液或醇/水溶液、乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。肠胃外媒介物可包括氯化钠溶液、林格氏右旋糖、右旋糖以及氯化钠、乳酸林格氏液或固定油。静脉内媒介物可包括各种添加剂、防腐剂、或流体、营养物或电解质补充剂。多种含水载体是合适的，例如无菌磷酸盐缓冲盐水溶液、抑菌水、水、缓冲水、0.4％盐水、0.3％甘氨酸等，并且可包括经受温和化学修饰等的用于增强稳定性的其他蛋白质，如白蛋白、脂蛋白、球蛋白等。[0091]预期表面官能化颗粒还可包含表面活性剂。表面活性剂可以是阴离子的、阳离子的或非离子的。泊洛沙姆和泊洛沙胺(poloaxamines)家族中的表面活性剂通常用于颗粒合成。可使用的表面活性剂包括但不限于peg、tween-80、明胶、葡聚糖、pluronicl-63、pva、甲基纤维素、卵磷脂、dmab和pema。另外，可生物降解和生物相容性表面活性剂包括但不限于维生素etpgs(d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)。在某些实施方案中，使用两种表面活性剂。例如，如果通过二次乳化法产生颗粒，则两种表面活性剂可包括用于第一乳化的疏水性表面活性剂，以及用于第二乳化的疏水性表面活性剂。[0092]通过将具有期望纯度的颗粒与任选的生理上可接受的载体、赋形剂或稳定剂混合来制备呈冻干制剂或水溶液形式的表面官能化颗粒的治疗制剂以进行储存(remington'spharmaceuticalsciences第16版,osol,a.ed.(1980))。可接受的载体、赋形剂、或稳定剂在所采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的，并且包括缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氧化六烃季铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(小于约10个残基)多肽；蛋白质，如血清白蛋白、明胶、或免疫球蛋白；亲水性聚合物，如聚乙烯基吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸、或赖氨酸；单糖、二糖，以及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、或糊精；螯合剂，如edta；糖，如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，如钠；或金属络合物(例如，zn-蛋白质络合物)。[0093]可以通过冻干使颗粒制剂稳定化。添加冷冻保护剂如海藻糖可以减少冻干时颗粒的聚集。可以采用任何合适的冻干和重构技术。本领域的技术人员应当理解，冻干和重构可导致不同程度的抗体活性损失，并且可能必须调节使用水平以进行补偿。[0094]使用方法[0095]在一个方面，本文假设sfp促进免疫冷性肿瘤(免疫逃避性)向免疫热性肿瘤(免疫原性)的转化，这继而允许治疗免疫保护且通常难治性的肿瘤。另外，当向受试者组合施用时，sfp可增强其他癌症疗法的功效。本文提出了单独或与其他癌症治疗剂组合使用sfp的pharmdxkit、informher2dualishdnaprobecocktail、herceptest、her2fishpharmdxkit、thxidbrafkit、vysisalkbreakapartfishprobekit、cobas4800brafv600mutationtest、ventanapd-l1(sp142)assay、therascreenfgfrrgqrt-pcrkit，以及therascreenpik3cargqpcrkit。[0101]在各种实施方案中，筛选出适合用本文所述的一种或多种免疫疗法治疗的受试者。在各种实施方案中，不适合用这样的免疫疗法治疗的受试者可以首先根据本文所述的方法用表面官能化颗粒进行治疗。免疫疗法的非限制性实例包括派姆单抗(mercksharp&dohmecorp)、纳武单抗(bristol-myerssquibb)、阿特珠单抗阿维单抗以及德瓦鲁单抗这些免疫疗法的合格标准在本领域中是已知的。例如但不限于，派姆单抗纳武单抗和阿特珠单抗具有基于pd-l1表达水平的合格标准。pd-l1表达标准及其测量方法可见于https://www.keytrudahcp.com/biomarker-testing/pd-l1-expression-testing/(派姆单抗；)、或fda批准的派姆单抗(于1/2020修订)、阿特珠单抗(例如于5/2020修订)以及纳武单抗(例如于6/2020修订)的处方信息。这些出版物各自出于所有目的全文以引用方式并入本文。如本文所述，用表面官能化颗粒治疗这样的患者可以促进不适合用免疫疗法治疗的肿瘤向免疫原性肿瘤转化，这继而使得这样的肿瘤能够用免疫疗法治疗。在各种实施方案中，在用表面官能化颗粒治疗的整个过程中，可以监测不适合免疫疗法的受试者的肿瘤(例如，如本文所述基于pd-l1表达水平)，以便确定肿瘤何时变得适合用免疫疗法治疗。一旦肿瘤适合用免疫疗法治疗，就可以向受试者单独地或与表面官能化颗粒组合地施用免疫疗法。[0102]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫浸润低的肿瘤。在各种实施方案中，向具有一个或多个免疫浸润低的肿瘤的受试者施用改变肿瘤免疫浸润。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润包含抗原呈递细胞、髓样细胞和淋巴样细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的抗原呈递细胞包含巨噬细胞和/或树突状细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的髓样细胞包含单核细胞、嗜中性粒细胞、髓样来源抑制细胞(mdsc)以及肿瘤相关巨噬细胞(tam)。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的tam包含m1巨噬细胞、m2巨噬细胞，以及marco+巨噬细胞。在各种实施方案中，肿瘤免疫浸润中的淋巴样细胞包含t细胞、b细胞、nkt细胞，以及nk细胞。[0103]已经描述了用于表征肿瘤免疫浸润的定性和定量方法，包括但不限于显微镜分析、组织学测定、细胞学测定、流式细胞术、聚合酶链反应(pcr)、定量聚合酶链反应(qpcr)、rna测序(rna-seq)、单细胞rna测序(scrna-seq)、新一代测序、全外显子组测序、表观遗传测序、atac-seq、微阵列分析，以及大量细胞计数法或cytof。生物标志物可单独地或组合地用于评价免疫细胞，并且包括细胞表面标记和分泌蛋白。用于表征肿瘤免疫浸润的示例性生物标志物包括但不限于cd45、cd3、cd4、cd8、cd25、cd44、cd134、cd252、cd137、cd79、cd39、foxp3、pd-1、lag-3、tim-1、ifn-γ、颗粒酶、穿孔素、cd11b、cd11c、ly6c、ly6g、cd14、cd16、cd80、marco、cd68、cd115、cd206、cd163、cd103c、f4/80、pd-l1、pd-l2、精氨酸酶、inos、ros、tnf-α、tgf-β、mhc-i、mhc-ii、nk1.1、nkg2d、cd244、ki67、cd19、cd20、ccr2、cxcr3、ccr4、ccr5、ccr6、ccr7、ccr10、ccl2、ccl5、cx3cr1、ccl10、icos、cd40、cd40l、il1α、il1β、il2、il4、il5、il6、il8、il12、il15、il17、il21、il22、tcrγ/d、tcrα/β、stat3、ror1c，以及rorgt。[0104]癌干细胞(csc)被描述为在实体瘤和血液肿瘤内存在的细胞亚群，它们是致瘤的，并且能够自我更新、分化。一些报道描述了csc在多种肿瘤的发病机制、疗法后的肿瘤复发，以及治疗抗性发展中的重要性。多种细胞表面标记可用于区分实体瘤和血液肿瘤内的csc。csc标记包括但不限于cd19、cd20、cd24、cd34、cd38、cd44、cd90、cd133、乙醛脱氢酶1、ceacam-6/cd66c、bmi-1、连接蛋白43/gja1、dll4、epcam/trop1、gli-1、gli-2、整联蛋白、pon1、pten、alcam/cd166、dppiv/cd26、lgr5、musashi-1、a20、abcg2、cd15、趋化因子分形素、hif-2α、l1cam、c-maf、巢蛋白、平足蛋白、sox2、cd96、cd117、flt3、afp、cd13、cd90、nf2/merlin、abcb5、ngfr、多配体蛋白聚糖-1、内皮糖蛋白、stro-1，以及pon1。[0105]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个免疫保护肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星稳定的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星低的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个微卫星不稳定性中度的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个肿瘤突变负荷低的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个肿瘤突变负荷中度的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个对疗法有抗性的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个免疫异质性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有遗传异质性肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有一个或多个难治性肿瘤。在一个或多个实施方案中，受试者具有在疗程期间发展出对疗法有抗性的肿瘤。[0106]在各种实施方案中，由来自患有癌症的受试者的一个或多个生物样本确定肿瘤特征。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个生物样本与来自一个或多个健康受试者的一个或多个生物样本进行比较来确定肿瘤特征。在各种实施方案中，由选自血液、脑脊液、尿液、粪便、口腔拭子、鼻拭子、灌洗液、组织活体组织切片、骨髓活体组织切片和肿瘤活体组织切片的一个或多个生物样本来确定肿瘤特征。在各种实施方案中，由来自患有癌症的受试者的一个或多个生物样本中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析来确定肿瘤特征。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个生物样本中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析与来自一个或多个健康受试者的一个或多个生物样本的分析进行比较来确定肿瘤特征。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个生物样本中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析与来自一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个生物样本的分析进行比较来确定肿瘤特征。在各种实施方案中，细胞选自白细胞、上皮细胞、间充质细胞、间充质干细胞、基质细胞、内皮细胞、成纤维细胞、癌相关成纤维细胞(caf)、周细胞、脂肪细胞、癌干细胞、循环肿瘤细胞(ctc)、造血干细胞，以及造血祖细胞。在各种实施方案中，蛋白质选自细胞因子、趋化因子、生长因子、信号传导蛋白、酶、蛋白酶，以及核酸酶。在各种实施方案中，核酸选自dna、ssdna、循环肿瘤dna(ctdna)、rna、mrna、dsrna、sirna、mirna、以及lncrna。在各种实施方案中，核酸分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0107]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由收集自该受试者的一个或多个血样的分析来确定。在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由收集自该受试者的一个或多个血样中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析来确定。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个血样中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析与来自一个或多个健康受试者的一个或多个血样的分析进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，一个或多个血样中分析的细胞是白细胞、上皮细胞、间充质细胞、间充质干细胞、基质细胞、内皮细胞、成纤维细胞、癌相关成纤维细胞(caf)、周细胞、脂肪细胞、癌干细胞、循环肿瘤细胞(ctc)、造血干细胞，以及造血祖细胞。在各种实施方案中，白细胞是髓样细胞和淋巴样细胞。在各种实施方案中，髓样细胞是单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞，以及嗜碱粒细胞。在各种实施方案中，淋巴样细胞是t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞、或ink细胞。[0108]在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的细胞的分析相比，来自收集自患有癌症的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示免疫抑制细胞的水平增加。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是髓样来源抑制细胞(mdsc)、肿瘤相关巨噬细胞(tam)、嗜中性粒细胞、treg细胞，以及breg细胞。在各种实施方案中，mdsc是单核细胞mdsc(m-mdsc)和多形核mdsc(pmn-mdsc)。在各种实施方案中，tam是m2tam。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是caf。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的免疫抑制细胞的水平增加约5-100％(例如，约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的免疫抑制细胞的水平增加约2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定免疫抑制细胞。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示活化促炎免疫细胞的水平降低或不存在(例如，相对于健康受试者或者患有癌症且对治疗有反应的受试者而言降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)。[0109]在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示活化促炎免疫细胞的水平降低或不存在(例如，相对于健康受试者或者患有癌症且对治疗有反应的受试者而言降低约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，活化促炎细胞是树突状细胞(dc)、巨噬细胞、m1巨噬细胞、t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞，以及ink细胞。在各种实施方案中，促炎免疫细胞的频率为从收集自受试者的一个或多个血样分析的所有白细胞的《10％(例如，约9％、约8％、约7％、约6％、约5％、约4％、约3％、约2％、或约1％)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定活化促炎免疫细胞。[0110]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的一个或多个血样中的细胞的分析通过细胞表面蛋白的测定来执行。在各种实施方案中，细胞表面蛋白选自受体酪氨酸激酶(rtk)、cd1c、cd2、cd3、cd4、cd5、cd8、cd9、cd10、cd11b、cd11c、cd14、cd15、cd16、cd18、cd19、cd20、cd21、cd22、cd23、cd24、taci、cd25、cd27、cd28、cd30、cd30l、cd31、cd32、cd32b、cd34、cd33、cd38、cd39、cd40、cd40-l、cd41b、cd42a、cd42b、cd43、cd44、cd45、cd47、cd45ra、cd45ro、cd48、cd52、cd55、cd56、cd58、cd61、cd66b、cd70、cd72、cd79、cd68、cd84、cd86、cd93、cd94、cd95、cracc、blame、bcma、cd103、cd107、cd112、cd120a、cd120b、cd123、cd125、cd134、cd135、cd140a、cd141、cd154、cd155、cd160、cd163、cd172a、xcr1、cd203c、cd204、cd206、cd207、cd226、cd244、cd267、cd268、cd269、cd355、cd358、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、kir2dl1、kir2dl2、kir2dl3、kir2dl5a、kir2dl5b、kir3dl1、kir3dl2、kir3dl3、kir3dl4、kir2ds1、kir2ds2、kir2ds3、kir2ds4、kir2ds5、dap12、kir3ds、nkp44、nkp46、tcr、bcr、整联蛋白、fcβεri、mhc-i、mhc-ii、il-1r、il-2rα、il-2rβ、il-2rγ、il-3rα、csf2rb、il-4r、il-5rα、csf2rb、il-6rα、gp130、il-7rα、il-9r、il-12rβ1、il-12rβ2、il-13rα1、il-13rα2、il-15rα、il-21r、il23r、il-27rα、il-31rα、osmr、csf-1r、细胞表面il-15、il-10rα、il-10rβ、il-20rα、il-20rβ、il-22rα1、il-22rα2、il-22rβ、il-28ra、pd-1、pd-1h、btla、ctla-4、pd-l1、pd-l2、2b4、b7-1、b7-2、b7-h1、b7-h4、b7-dc、dr3、light、lair、ltα1β2、ltβr、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、lag-3、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、ccr1、ccr2、ccr3、ccr4、ccr5、ccr6、ccr7、ccr8、ccr9、ccr10、ccr11、cxcr1、cxcr2、cxcr3、cxcr4、cxcr5、cxcr6、cxcr7、clecl9a、dc-sign、igsf4a、siglec、egfr、pdgfr、vegfr、fap、α-sma、波形蛋白、层粘连蛋白、fas、fas-l、fc、icam-1、icam-2、icam-3、icam-4、icam-5、pecam-1、mica、micb、ul16、ulbp1、ulbp2、ilbp3、ulbp4、ulbp5、ulbp6、mult1、rae1α、β、γ、δ和ε、a1r、a2ar、a2br、以及a3r、h60a、h60b和h60c。在各种实施方案中，整联蛋白选自α1、α2、αⅱb、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αd、αe、αl、αm、αv、αx、β1、β2、β3、β4、β5、β6、β7、β8和/或它们的组合。在各种实施方案中，tcr选自α、β、γ、δ、ε和ζtcr。文献中已经描述了用于测定细胞表面蛋白表达的几种方法，包括流式细胞术以及大量细胞计数法(cytof)。一种或多种这些细胞表面蛋白的存在或丰度指示患者可适合用本文所公开的方法治疗。[0111]在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示出较高嗜中性粒细胞与淋巴细胞的比率(nlr)。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示出nlr》2。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的细胞的分析展示出2至10的nlr(例如，nlr为2、3、4、5、6、7、8、9，以及10，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，nlr用于确定患有癌症且具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的预后。在各种实施方案中，nlr》2确定不良预后。[0112]在各种实施方案中，从收集自患有癌症的受试者的一个或多个血样中分析的细胞是循环肿瘤细胞(ctc)。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析相比，收集自患有癌症的受试者的一个或多个血样的测定展示ctc的频率增加。在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的循环肿瘤细胞的频率为》3或》5个ctc/7.5ml血液。[0113]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由该受试者的一个或多个血样中的蛋白质的分析来确定。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个血样中的蛋白质的分析与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，蛋白质是细胞内蛋白或分泌蛋白。在各种实施方案中，蛋白质选自细胞因子、趋化因子、生长因子、酶、蛋白酶，以及核酸酶。在各种实施方案中，细胞因子和趋化因子选自il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、ccl1、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl6、ccl7、ccl8、ccl9、ccl10、ccl11、ccl12、ccl14、ccl15、ccl16、ccl17、ccl18、ccl19、ccl20、ccl21、ccl22、ccl23、ccl24、ccl25、ccl26、ccl27、ccl28、cxcl1、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、cxcl6、cxcl7、cxcl8、cxcl9、cxcl10、cxcl11、cxcl12、cxcl13、cxcl14、cxcl15、cxcl16、cxcl17、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶-b、穿孔素、tnf-α、tgf-β1、tgf-β2，以及tgf-β3。在各种实施方案中，生长因子选自egf、fgf、ngf、pdgf、vegf、igf、gmcsf、gcsf、tgf、红细胞生成素、tpo、bmp、hgf、gdf、神经营养素、msf、sgf、gdf、g-csf，以及gm-csf。在各种实施方案中，蛋白质是选自以下的蛋白酶：天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶和/或苏氨酸蛋白酶。在一些实施方案中，蛋白质是选自以下的蛋白酶：adam1、adam2、adam7、adam8、adam9、adam10、adam11、adam12、adam15、adam17、adam18、adam19、adaam20、adam21、adam22、adam23、adam28、adam29、adam30、adam33、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27以及mmp28。在各种实施方案中，蛋白质是选自以下的酶：精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3双加氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)，以及il4i1。在各种实施方案中，蛋白质与细胞凋亡相关。在各种实施方案中，与细胞凋亡相关的蛋白质选自p53、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶11、胱天蛋白酶12、胱天蛋白酶13、胱天蛋白酶14、bcl-2、bcl-xl、mcl-1、ced-9、a1、bfl1、bax、bak、diva、bcl-xs、bik、bim、bad、bid，以及egl-1。文献中已经描述了用于测定来自血样的蛋白质的几种方法，包括蛋白质印迹和elisa。[0114]在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的蛋白质的分析展示肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平增加。在各种实施方案中，肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白是细胞表面蛋白、细胞内蛋白、或分泌蛋白。在各种实施方案中，肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白选自cd39、cd79、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27和mmp28、cxcl12、gm-csf、g-csf、tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3、精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3加双氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)、髓过氧化物酶(mpo)、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(ne)，以及il4i1。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平增加2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的蛋白质的分析展示肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎蛋白的水平降低、水平较低和/或不存在。在各种实施方案中，肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎蛋白选自il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、细胞表面il-15、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶-b、穿孔素，以及tnf-α。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎蛋白的水平减小5-100％(例如，相对于健康受试者或者患有癌症且对治疗有反应的受试者而言降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者或者患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎蛋白的水平减小2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自血样的蛋白质的几种方法，包括蛋白质印迹和elisa。[0115]在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的分析展示中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平增加。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的分析展示中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平增加。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的net的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的net的水平增加2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自血样的net的几种方法，包括蛋白质印迹、elisa和流式细胞术。[0116]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由该受试者的一个或多个血样中的核酸的分析来确定。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个血样中的核酸的分析与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，核酸选自dna、ssdna、循环肿瘤dna(ctdna)、rna、mrna、dsrna、sirna、mirna、以及lncrna。在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的ctdna的分析展示一个或多个肿瘤突变、肿瘤抗原和/或新抗原的水平较低和/或不存在。在各种实施方案中，来自患有癌症的受试者的一个或多个血样的ctdna的分析展示低或无肿瘤突变负荷。在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样的ctdna的分析展示5至0.001个体细胞突变/兆碱基对(例如，约5、约4、约3、约2、约1、约0.9、约0.8、约0.7、约0.6、约0.5、约0.4、约0.3、约0.2、约0.1、约0.09、约0.08、约0.07、约0.06、约0.05、约0.04、约0.03、约0.02、约0.01、约0.009、约0.008、约0.007、约0.006、约0.005、约0.004、约0.003、约0.002、或0.001，包括这些值之间的所有值和范围)的肿瘤突变负荷。在各种实施方案中，核酸分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0117]在各种实施方案中，受试者的肿瘤特征由患有癌症的受试者的一个或多个血样中的核酸的基因表达分析来确定。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的核酸的基因表达分析展示肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达提高。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达提高5-100％(例如，提高约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达提高2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的核酸的分析展示肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达降低。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个血样的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的核酸的分析展示肿瘤抑制、抗肿瘤和/或抗炎基因的表达较低或无表达。在各种实施方案中，与健康受试者或者患有癌症且对疗法有反应的受试者相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达降低5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个血样中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达下降2-100倍(例如，相对于健康受试者或者患有癌症且对疗法有反应的受试者而言下降约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，基因表达分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0118]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由收集自该受试者的一个或多个肿瘤样本的分析来确定。在各种实施方案中，肿瘤样本是活体组织切片。在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由收集自该受试者的一个或多个肿瘤样本中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析来确定。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的细胞、蛋白质和/或核酸的分析与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的组织样本的分析进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，一个或多个肿瘤样本中分析的细胞是白细胞、上皮细胞、间充质细胞、间充质干细胞、基质细胞、内皮细胞、成纤维细胞、周细胞、脂肪细胞，以及癌干细胞。在各种实施方案中，白细胞是髓样细胞和淋巴样细胞。在各种实施方案中，髓样细胞是单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞，以及嗜碱粒细胞。在各种实施方案中，淋巴样细胞是t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞、或ink细胞。[0119]在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示存在免疫抑制细胞。在各种实施方案中，收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的分析展示在肿瘤核心中存在免疫抑制细胞。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示免疫抑制细胞的水平增加。在各种实施方案中，一个或多个肿瘤样本的分析展示肿瘤核心中免疫抑制细胞的水平增加。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是髓样来源抑制细胞(mdsc)、肿瘤相关巨噬细胞(tam)、嗜中性粒细胞、treg细胞，以及breg细胞。在各种实施方案中，mdsc是单核细胞mdsc(m-mdsc)和多形核mdsc(pmn-mdsc)。在各种实施方案中，tam是m2tam。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是caf。在各种实施方案中，与一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的组织样本相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫抑制细胞的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与一个或多个组织样本和/或一个或多个健康受试者或者一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫抑制细胞的水平增加2-100倍(例如，相对于健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者而言增加约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。[0120]在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示不存在白细胞。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示白细胞的水平降低或较低。在各种实施方案中，白细胞的频率为分析的所有细胞的≤50％、≤40％、≤30％、≤20％、≤10％、或≤5％，包括这些值之间的所有值和范围。[0121]在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示不存在活化促炎免疫细胞。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示不存在来自肿瘤核心的活化促炎免疫细胞。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示活化促炎免疫细胞的水平较低或降低。在各种实施方案中，来自收集自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的细胞的分析展示肿瘤核心中的活化促炎免疫细胞的水平较低或降低。在各种实施方案中，活化促炎细胞是树突状细胞(dc)、巨噬细胞、m1巨噬细胞、t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞，以及ink细胞。在各种实施方案中，促炎免疫细胞的频率为分析的所有细胞的≤50％、≤40％、≤30％、≤20％、≤10％、或≤5％，包括这些值之间的所有值和范围。[0122]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由该受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫细胞的位置的分析来确定。在各种实施方案中，具有一种或多种免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫细胞位于肿瘤外周。在各种实施方案中，具有一种或多种免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫细胞不存在于肿瘤核心中。在各种实施方案中，具有一种或多种免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的受试者的一个或多个肿瘤样本中的免疫细胞在肿瘤核心中降低。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个样本相比，肿瘤核心中的免疫细胞降低5-100％(例如，相对于健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者而言降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。[0123]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由该受试者的一个或多个肿瘤样本中的基质细胞的位置的分析来确定。在各种实施方案中，基质细胞是caf、周细胞、脂肪细胞，以及内皮细胞。在各种实施方案中，具有一个或多个免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的caf在肿瘤外周中增加。在各种实施方案中，具有一个或多个免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的caf在肿瘤核心中增加。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，肿瘤外周中的caf的频率增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，肿瘤外周中的caf的频率增加2-100倍(例如，增加约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，与一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，肿瘤核心中的caf的频率增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与一个或多个健康组织样本相比，肿瘤核心中的caf的频率增加2-100倍(例如，相对于健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者而言增加约2、23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、ccl1、ccl2、ccl3、ccl4、ccl5、ccl6、ccl7、ccl8、ccl9、ccl10、ccl11、ccl12、ccl14、ccl15、ccl16、ccl17、ccl18、ccl19、ccl20、ccl21、ccl22、ccl23、ccl24、ccl25、ccl26、ccl27、ccl28、cxcl1、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、cxcl6、cxcl7、cxcl8、cxcl9、cxcl10、cxcl11、cxcl12、cxcl13、cxcl14、cxcl15、cxcl16、cxcl17、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶-b、穿孔素、tnf-α、tgf-β1、tgf-β2，以及tgf-β3。在各种实施方案中，生长因子选自egf、fgf、ngf、pdgf、vegf、igf、gmcsf、gcsf、tgf、红细胞生成素、tpo、bmp、hgf、gdf、神经营养素、msf、sgf、gdf、g-csf，以及gm-csf。在各种实施方案中，蛋白质是选自以下的蛋白酶：天冬氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶和/或苏氨酸蛋白酶。在一些实施方案中，蛋白质是选自以下的蛋白酶：adam1、adam2、adam7、adam8、adam9、adam10、adam11、adam12、adam15、adam17、adam18、adam19、adaam20、adam21、adam22、adam23、adam28、adam29、adam30、adam33、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27以及mmp28。在各种实施方案中，蛋白质是选自以下的酶：精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3双加氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)，以及il4i1。在各种实施方案中，蛋白质与细胞凋亡相关。在各种实施方案中，与细胞凋亡相关的蛋白质选自p53、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶11、胱天蛋白酶12、胱天蛋白酶13、胱天蛋白酶14、bcl-2、bcl-xl、mcl-1、ced-9、a1、bfl1、bax、bak、diva、bcl-xs、bik、bim、bad、bid，以及egl-1。文献中已经描述了用于测定来自肿瘤样本的蛋白质的几种方法，包括免疫组织化学、免疫荧光、蛋白质印迹，以及elisa。[0127]在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的蛋白质的分析展示与肿瘤进展、抗炎活性和/或免疫抑制相关的蛋白质的水平增加。在各种实施方案中，与肿瘤进展、抗炎活性和/或免疫抑制相关的蛋白质是细胞表面蛋白、细胞内蛋白、或分泌蛋白。在各种实施方案中，与肿瘤进展、抗炎活性和/或免疫抑制相关的蛋白质选自cd39、cd47、cd79、cd140a、cd163、cd206、foxp3、fap、pd-1、pd-l1、pd-l2、csf-1r、a1r、a2ar、a2br、以及a3r、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、csfr、siglec、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27和mmp28、cxcl12、gm-csf、g-csf、fap、tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3、精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3双加氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)、髓过氧化物酶(mpo)、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(ne)，以及il4i1。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或一个或多个患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的与肿瘤进展、抗炎活性和/或免疫抑制相关的蛋白质的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的与肿瘤进展、抗炎活性和/或免疫抑制相关的蛋白质的水平增加2-100倍(例如，相对于健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者而言增加约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95倍，包括这些值之间的所有值和范围)。[0128]在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的蛋白质的分析展示与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质的水平降低、水平较低和/或不存在。在各种实施方案中，与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质选自cd44、cd56、cd103c、cd69、kg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶b、穿孔素，以及tnf-α。在各种实施方案中，与收集自一个或多个健康组织的一个或多个样本和/或收集自患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个肿瘤样本相比，与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质的水平降低5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。已经描述了用于测定来自肿瘤样本的蛋白质的几种方法，包括免疫组织化学、免疫荧光、蛋白质印迹、细胞内流式术，以及elisa。[0129]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由来自该受试者的一个或多个肿瘤样本中的pd-l1表达的肿瘤比例得分(tps)来确定。在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的tps为1至50(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50，包括这些值之间的所有范围)。在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的tps≤1。pd-l1表达的tps定义为通过免疫组织化学分析而展示部分或完全膜染色的活肿瘤细胞的百分比。[0130]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由来自该受试者的一个或多个肿瘤样本中的pd-l1表达的综合阳性得分(cps)来确定。在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的cps≤10(例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10，包括这些值之间的所有范围)。在各种实施方案中，cps≤1。pd-l1表达的cps由免疫组织化学测定的pd-l1阳性的活肿瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的数量占所有活肿瘤细胞的百分比来确定。[0131]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由来自该受试者的一个或多个肿瘤样本的微卫星不稳定性测试来确定。在各种实施方案中，通过将一个或多个肿瘤样本的微卫星不稳定性测试与受试者的一个或多个健康组织的微卫星稳定性测试进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，微卫星不稳定性测试是微卫星标记的测定。在各种实施方案中，微卫星不稳定性测试是错配修复标记的测定。在各种实施方案中，微卫星标记选自bat25、bat26、d2s123、d5s346，以及d17s250。在各种实施方案中，错配修复标记选自mlh1、msh2、mlh6，以及pms2。在各种实施方案中，受试者具有被确定为微卫星不稳定性低的一个或多个免疫逃避性、免疫保护、和/或免疫“冷性”肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有被确定为微卫星稳定的一个或多个免疫逃避性、免疫保护、和/或免疫“冷性”肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有错配修复熟练的一个或多个免疫逃避性、免疫保护、和/或免疫“冷性”肿瘤。[0132]在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的分析展示中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平增加。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者的一个或多个肿瘤样本的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的分析展示中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平增加。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的net的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的net的水平增加2-100倍(例如，相对于健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者而言增加约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定net的几种方法，包括蛋白质印迹、elisa和流式细胞术。[0133]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的肿瘤特征由该受试者的一个或多个肿瘤样本中的核酸的分析来确定。在各种实施方案中，通过将来自患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的核酸的分析与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本的分析进行比较来确定患有癌症的受试者的肿瘤特征。在各种实施方案中，核酸选自dna、ssdna、rna、mrna、dsrna、sirna、mirna、以及lncrna。在各种实施方案中，核酸分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0134]在各种实施方案中，来自患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本的核酸的分析用于确定肿瘤突变负荷。在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的核酸的分析展示低肿瘤突变负荷。在各种实施方案中，来自具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本的核酸的分析展示5至0.001个体细胞突变/兆碱基对(例如，约5、约4、约3、约2、约1、约0.9、约0.8、约0.7、约0.6、约0.5、约0.4、约0.3、约0.2、约0.1、约0.09、约0.08、约0.07、约0.06、约0.05、约0.04、约0.03、约0.02、约0.01、约0.009、约0.008、约0.007、约0.006、约0.005、约0.004、约0.003、约0.002、或0.001，包括这些值之间的所有值和范围)的肿瘤突变负荷。在各种实施方案中，核酸分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0135]在各种实施方案中，与来自一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本的分析相比，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的核酸的分析展示与肿瘤促进、肿瘤允许、抗炎和/或免疫抑制活性相关的基因的表达提高。在各种实施方案中，与肿瘤促进、肿瘤允许、抗炎和/或免疫抑制活性相关的基因选自cd39、cd47、cd79、cd140a、cd163、cd206、foxp3、fap、pd-1、pd-l1、pd-l2、csf-1r、a1r、a2ar、a2br，以及a3r、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、csfr、siglec、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27和mmp28、cxcl12、gm-csf、g-csf、fap、tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3、精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3双加氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)、髓过氧化物酶(mpo)、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(ne)，以及il4i1。在各种实施方案中，与一个或多个健康受试者和/或患有癌症且对治疗有反应的受试者的一个或多个组织样本相比，与肿瘤促进、肿瘤允许、抗炎和/或免疫抑制活性相关的基因的表达提高5-100％(例如，提高约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，基因表达分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0136]在各种实施方案中，具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护、和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者的一个或多个肿瘤样本中的核酸的分析展示与肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎活性相关的基因的表达较低或降低。在各种实施方案中，患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的核酸的分析展示与肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎活性相关的基因无表达。在各种实施方案中，与肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎活性相关的基因选自cd44、cd56、cd103c、cd69、kg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、细胞表面il-15、il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶b、穿孔素、tnf-α以及p53。在各种实施方案中，与健康受试者或者患有癌症且对治疗有反应的受试者相比，与肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎活性相关的表达基因降低5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％。在各种实施方案中，基因表达分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0137]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个对治疗有抗性和/或无反应的肿瘤。在各种实施方案中，受试者具有的一个或多个肿瘤对一种或多种选自以下的治疗有抗性和/或无反应：手术、放射、化学疗法、生物剂、小分子、基于细胞的疗法、激素疗法，以及免疫疗法。在各种实施方案中，治疗是标准护理疗法、一线疗法、二线疗法和/或三线疗法。在各种实施方案中，受试者具有在一种或多种治疗期间进展的一个或多个肿瘤，其中治疗是标准护理疗法、一线疗法、二线疗法和/或三线疗法。[0138]一线疗法被定义为向未曾接受任何先前治疗的患有癌症的受试者施用的治疗。二线疗法被定义为向已接受过先前一线疗法，但在一线治疗期间经历疾病进展的患有癌症的受试者施用的治疗。三线疗法被定义为向已接受过先前一线和二线治疗，但在二线治疗期间经历疾病进展的患有癌症的受试者施用的治疗。一线、二线和三线疗法的定义见于国家癌症研究所(nci)的癌症术语词典(nationalcancerinstitute’s(nci)dictionaryofcancerterms)(https://www.cancer.gov/publications/dictionaries)。每种特定类型的癌症具有一线、二线和三线疗法。用于特定形式的癌症或肿瘤类型的一线、二线和三线疗法是本领域已知的。此外，fda批准的药物标签将指示特定药物是否被批准为一线、二线、或三线疗法。[0139]文献中公开的若干标准和定义可用于确定一种或多种治疗对患有癌症的受试者中的肿瘤的效应。基于这些标准，当肿瘤在疗程期间改善、保持不变、或恶化时，它们分别定义为“反应的”、稳定的”、或“进行性的”。文献中公开的最常用标准的实例包括实体瘤反应评价标准(responseevaluationcriteriainsolidtumors)(recist)、改良的实体瘤反应评价标准(modifiedresponseevaluationcriteriainsolidtumors)(mrecist)、实体瘤pet反应标准(petresponsecriteriainsolidtumors)(percist)、choi标准、lugano反应标准、欧洲肝脏研究联合会(europeanassociationforthestudyoftheliver)(easl)标准、肝癌反应评价标准(responseevaluationcriteriainthecanceroftheliver)(recicl)以及who肿瘤反应标准(whocriteriaintumorresponse)[30-32]。[0140]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者不能耐受标准护理疗法、一线疗法、二线疗法和/或三线疗法。在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者在手术切除原发性肿瘤后经历肿瘤复发。在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有不能手术移除的肿瘤。在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者不具有可用的治疗选项。[0141]几种用于治疗癌症的疗法(例如化学疗法)是细胞毒性的，并且与显著的副作用和毒性相关，这些副作用和毒性与不良结果和不良治疗反应相关。在施用这样的治疗之前，临床医生依赖于几种评估工具来帮助确定患有癌症的受试者经历治疗有关的毒性和不良事件的风险。基于这些评估的结果，如果患有癌症的受试者被确定为经历疗法有关的毒性和不良事件的风险增加，从而导致不良结果，则认为他们对疗法不耐受。用于确定疗法不耐受的常用评估工具的实例包括卡诺夫斯基行为状态(arnofskyperformancestatus)(kps)、东部肿瘤协作组行为状态(easterncooperativeoncologygroupperformancestatus)(ecogps)、“起立-行走”计时测试(timedgetupandgo)(tug)、简易体能状况量表(shortphysicalperformancebattery)(sppb)、周全性老年评估(comprehensivegeriatricassessment)(cga)、癌症与衰老研究组(canceragingresearchgroup)(carg)得分，以及高龄患者的化疗风险评估量表(chemotherapyriskassessmentscaleforhigh-agepatients)(crash)[33,34]。[0142]可使用本文的方法治疗的示例性疾病、病症或障碍包括癌症，如食管癌、胰腺癌、转移性胰腺癌、胰腺转移性腺癌、膀胱癌、胃癌、纤维性癌症、神经胶质瘤、恶性神经胶质瘤、扩散型内因性脑桥神经胶质瘤、复发性儿童脑肿瘤肾细胞癌、透明细胞转移性肾细胞癌、肾癌、前列腺癌、转移性去势难治性前列腺癌、iv期前列腺癌、转移性黑素瘤、黑素瘤、恶性黑素瘤、复发性皮肤黑素瘤、黑素瘤脑转移、iiia期皮肤黑素瘤；iiib期皮肤黑素瘤；iiic期皮肤黑素瘤；iv期皮肤黑素瘤、恶性头颈部黑色素瘤、肺癌、非小细胞肺癌(nsclc)、鳞状细胞非小细胞肺癌、乳腺癌、复发转移性乳腺癌、肝细胞癌、何杰金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤、晚期b细胞nhl、hl，包括弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)，多发性骨髓瘤、慢性髓性白血病、缓解期成人急性髓性白血病；成人急性髓性白血病伴inv(16)(p13.1q22)；cbfb-myh11；成人急性髓性白血病伴t(16；16)(p13.1；q22)；cbfb-myh11；成人急性髓性白血病伴t(8；21)(q22；q22)；runx1-runx1t1；成人急性髓性白血病伴t(9；11)(p22；q23)；mllt3-mll；成人急性早幼粒细胞白血病伴t(15；17)(q22；q12)；pml-rara；烷基化剂相关的急性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、richter综合征；华氏巨球蛋白血症、成人胶质母细胞瘤；成人神经胶质肉瘤、复发性胶质母细胞瘤、复发性儿童横纹肌肉瘤、复发性尤文肉瘤/外周性原始神经外胚层瘤、复发性成神经细胞瘤；复发性骨肉瘤、结肠直肠癌、msi阳性结肠直肠癌；msi阴性结肠直肠癌、鼻咽非角化癌；复发性鼻咽未分化癌、宫颈腺癌；宫颈腺鳞癌；宫颈鳞状细胞癌；复发性宫颈癌；iva期宫颈癌；ivb期宫颈癌、肛管鳞状细胞癌；转移性肛管癌；复发性肛管癌、复发性头颈癌；头颈部的鳞状细胞的癌，头颈部鳞状细胞癌(hnscc)、卵巢癌、结肠癌、胃癌(gastriccancer)、晚期gi癌、胃腺癌；食管胃结合部腺癌、骨肿瘤、软组织肉瘤；骨肉瘤、胸腺癌、尿路上皮癌、复发性merkel细胞癌；iii期merkel细胞癌；iv期merkel细胞癌、骨髓增生异常综合征以及复发性蕈样肉芽肿病和塞扎里综合征。在各种实施方案中，癌症选自脑癌、皮肤癌、眼癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、食道癌、头颈癌、宫颈癌、肝癌、结肠癌、骨癌、子宫癌、卵巢癌、膀胱癌、胃癌、口腔癌、甲状腺癌、肾癌、睾丸癌、白血病、淋巴瘤，以及间皮瘤。[0143]通常为免疫“冷性”、免疫逃避性、免疫保护、免疫“冷性”、微卫星稳定、微卫星不稳定性低，具有低免疫浸润，具有低肿瘤突变负荷和/或表现出异质性的癌症或肿瘤的非限制性实例包括merkel细胞癌(mcc)、肾细胞癌(rcc)、卵巢癌、mss结肠直肠癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤，以及前列腺癌。[0144]治疗结果和临床终点[0145]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤。在各种实施方案中，施用改变肿瘤免疫浸润。在各种实施方案中，施用改变抗肿瘤免疫反应。在各种实施方案中，施用改变肿瘤微环境，该肿瘤微环境包含肿瘤细胞、免疫细胞、癌干细胞，以及基质。在各种实施方案中，施用将免疫冷性肿瘤转化为免疫热性肿瘤。在各种实施方案中，施用减小肿瘤尺寸和/或抑制肿瘤生长。在各种实施方案中，施用经由肿瘤细胞的直接颗粒摄取来诱导肿瘤细胞死亡、凋亡和/或坏死。[0146]在各种实施方案中，本公开提供了一种治疗受试者中的癌症的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中受试者具有一个或多个特征为免疫保护和/或免疫逃避性的肿瘤。在各种实施方案中，施用改变肿瘤相关基质，该肿瘤相关基质包含成纤维细胞、癌相关成纤维细胞、脂肪细胞、周细胞、内皮、脉管系统、淋巴管、肿瘤相关脉管系统、间充质基质细胞、间充质干细胞，以及细胞外基质。[0147]预期本文的方法减小受试者中的肿瘤尺寸或肿瘤负荷，和/或减少受试者中的转移。在各种实施方案中，该方法使肿瘤尺寸减小10％、20％、30％或更多。在各种实施方案中，该方法使肿瘤尺寸减小10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％，或者包括处于这些值之间的所有值和范围。[0148]当肿瘤变成免疫逃避性时，某些生物标志物的丰度减小。本文预期，在用任选地与癌症治疗剂组合的本文所述的表面官能化颗粒治疗之后，一种或多种生物标志物的水平增加的量在约1.1倍至约10倍的范围内，例如约1.1、约1.5、约2、约2.5、约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约5.5、约6、约6.5、约7、约7.5、约8、约8.5、约9、约9.5、或约10倍。类似地，当肿瘤变成免疫逃避性时，某些生物标志物的丰度增加。在用本文所述的表面官能化颗粒治疗之后，一种或多种这样的生物标志物的水平减小的量在约1.1倍至约10倍的范围内，例如约1.1、约1.5、约2、约2.5、约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约5.5、约6、约6.5、约7、约7.5、约8、约8.5、约9、约9.5、或约10倍。在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒降低了血液中免疫抑制细胞的水平。在各种实施方案中，抑制细胞是髓样来源抑制细胞(mdsc)、肿瘤相关巨噬细胞(tam)、嗜中性粒细胞、treg细胞，以及breg细胞。在各种实施方案中，mdsc是单核细胞mdsc(m-mdsc)和多形核mdsc(pmn-mdsc)。在各种实施方案中，tam是m2tam。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是caf。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，免疫抑制细胞的水平降低约5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，免疫抑制细胞的水平降低约2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定免疫抑制细胞。[0149]在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒使活化促炎免疫细胞的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者施用表面官能化颗粒使活化促炎免疫细胞的水平增加2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，活化促炎细胞是树突状细胞(dc)、巨噬细胞、m1巨噬细胞、t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞，以及ink细胞。在各种实施方案中，促炎免疫细胞的频率增加至从收集自受试者的一个或多个血样中分析的所有白细胞的10-50％(例如，约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、或50％，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定活化促炎免疫细胞。[0150]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的一个或多个血样中的细胞的分析通过细胞表面蛋白的测定来执行。在各种实施方案中，细胞表面蛋白选自受体酪氨酸激酶(rtk)、cd1c、cd2、cd3、cd4、cd5、cd8、cd9、cd10、cd11b、cd11c、cd14、cd15、cd16、cd18、cd19、cd20、cd21、cd22、cd23、cd24、taci、cd25、cd27、cd28、cd30、cd30l、cd31、cd32、cd32b、cd34、cd33、cd38、cd39、cd40、cd40-l、cd41b、cd42a、cd42b、cd43、cd44、cd45、cd47、cd45ra、cd45ro、cd48、cd52、cd55、cd56、cd58、cd61、cd66b、cd70、cd72、cd79、cd68、cd84、cd86、cd93、cd94、cd95、cracc、blame、bcma、cd103、cd107、cd112、cd120a、cd120b、cd123、cd125、cd134、cd135、cd140a、cd141、cd154、cd155、cd160、cd163、cd172a、xcr1、cd203c、cd204、cd206、cd207、cd226、cd244、cd267、cd268、cd269、cd355、cd358、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、kir2dl1、kir2dl2、kir2dl3、kir2dl5a、kir2dl5b、kir3dl1、kir3dl2、kir3dl3、kir3dl4、kir2ds1、kir2ds2、kir2ds3、kir2ds4、kir2ds5、dap12、kir3ds、nkp44、nkp46、tcr、bcr、整联蛋白、fcβεri、mhc-i、mhc-ii、il-1r、il-2rα、il-2rβ、il-2rγ、il-3rα、csf2rb、il-4r、il-5rα、csf2rb、il-6rα、gp130、il-7rα、il-9r、il-12rβ1、il-12rβ2、il-13rα1、il-13rα2、il-15rα、il-21r、il23r、il-27rα、il-31rα、osmr、csf-1r、细胞表面il-15、il-10rα、il-10rβ、il-20rα、il-20rβ、il-22rα1、il-22rα2、il-22rβ、il-28ra、pd-1、pd-1h、btla、ctla-4、pd-l1、pd-l2、2b4、b7-1、b7-2、b7-h1、b7-h4、b7-dc、dr3、light、lair、ltα1β2、ltβr、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、lag-3、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、ccr1、ccr2、ccr3、ccr4、ccr5、ccr6、ccr7、ccr8、ccr9、ccr10、ccr11、cxcr1、cxcr2、cxcr3、cxcr4、cxcr5、cxcr6、cxcr7、clecl9a、dc-sign、igsf4a、siglec、egfr、pdgfr、vegfr、fap、α-sma、波形蛋白、层粘连蛋白、fas、fas-l、fc、icam-1、icam-2、icam-3、icam-4、icam-5、pecam-1、mica、micb、ul16、ulbp1、ulbp2、ilbp3、ulbp4、ulbp5、ulbp6、mult1、rae1α、β、γ、δ和ε、a1r、a2ar、a2br、以及a3r、h60a、h60b和h60c。在各种实施方案中，整联蛋白选自α1、α2、αⅱb、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αd、αe、αl、αm、α33、il-35、il-36、细胞表面il-15、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶-b、穿孔素，以及tnf-α。在各种实施方案中，与治疗前收集的一个或多个血样相比，抗肿瘤和/或促炎蛋白的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，抗肿瘤和/或促炎蛋白的水平增加2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言增加约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自血样的蛋白质的几种方法，包括蛋白质印迹和elisa。[0155]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒减小了收集自受试者的一个或多个血样中的中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平。在各种实施方案中，与治疗前收集的一个或多个血样相比，一个或多个血样中的net的水平减小5-100％(例如，减小约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，一个或多个血样中的net的水平减小2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自血样的net的几种方法，包括蛋白质印迹、elisa和流式细胞术。[0156]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒降低了受试者的一个或多个血样中的肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集的一个或多个血样相比，肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达降低5-100％(例如，相对于治疗前收集的一个或多个血样中的水平而言降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达降低2-100倍(例如，降低约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。[0157]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒提高了收集自受试者的一个或多个样本中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集的一个或多个血样相比，肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达提高5-100％(例如，提高约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个血样相比，肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达提高2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言提高约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，基因表达分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0158]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒增加了肿瘤中的白细胞的水平。在各种实施方案中，白细胞的水平在肿瘤核心和/或肿瘤外周中增加。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，白细胞增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，白细胞的水平增加2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，肿瘤核心和/或肿瘤外周中的白细胞的频率为分析的所有细胞的≥5％、≥10％、≥15％、≥20％、≥25％、≥30％、≥35％、≥40％、≥45％、或≥50，包括这些值之间的所有值和范围。[0159]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒降低了肿瘤中的免疫抑制细胞的水平。在各种实施方案中，免疫抑制细胞的水平在肿瘤核心和/或肿瘤外周中降低。在各种实施方案中，抑制细胞是髓样来源抑制细胞(mdsc)、肿瘤相关巨噬细胞(tam)、嗜中性粒细胞、treg细胞，以及breg细胞。在各种实施方案中，mdsc是单核细胞mdsc(m-mdsc)和多形核mdsc(pmn-mdsc)。在各种实施方案中，tam是m2tam。在各种实施方案中，免疫抑制细胞是caf。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，免疫抑制细胞的水平降低约5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，免疫抑制细胞的水平降低约2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定免疫抑制细胞。肿瘤样本中的白细胞的水平可通过几种方法来评价，包括流式细胞术和免疫组织化学。[0160]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒增加了肿瘤中的活化促炎免疫细胞的水平。在各种实施方案中，活化促炎细胞的水平在肿瘤核心和/或肿瘤外周中增加。[0161]在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒使肿瘤中的活化促炎免疫细胞的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、或50％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者施用表面官能化颗粒使活化促炎免疫细胞的水平增加2-100倍(例如，约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，活化促炎细胞是树突状细胞(dc)、巨噬细胞、m1巨噬细胞、t细胞、b细胞、nk细胞、nk-t细胞，以及ink细胞。在各种实施方案中，促炎免疫细胞的频率为从收集自受试者的一个或多个肿瘤样本中分析的所有白细胞的约10-50％(例如，约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、或50％，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，通过细胞表面蛋白表达的测定来鉴定活化促炎免疫细胞。[0162]在各种实施方案中，患有癌症的受试者的一个或多个肿瘤样本中的细胞的分析通过细胞表面蛋白的测定来执行。在各种实施方案中，细胞表面蛋白选自受体酪氨酸激酶(rtk)、cd1c、cd2、cd3、cd4、cd5、cd8、cd9、cd10、cd11b、cd11c、cd14、cd15、cd16、cd18、cd19、cd20、cd21、cd22、cd23、cd24、taci、cd25、cd27、cd28、cd30、cd30l、cd31、cd32、cd32b、cd34、cd33、cd38、cd39、cd40、cd40-l、cd41b、cd42a、cd42b、cd43、cd44、cd45、cd47、cd45ra、cd45ro、cd48、cd52、cd55、cd56、cd58、cd61、cd66b、cd70、cd72、cd79、cd68、cd84、cd86、cd93、cd94、cd95、cracc、blame、bcma、cd103、cd107、cd112、cd120a、cd120b、cd123、cd125、cd134、cd135、cd140a、cd141、cd154、cd155、cd160、cd163、cd172a、xcr1、cd203c、cd204、cd206、cd207、cd226、cd244、cd267、cd268、cd269、cd355、cd358、nkg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、kir2dl1、kir2dl2、kir2dl3、kir2dl5a、kir2dl5b、kir3dl1、kir3dl2、kir3dl3、kir3dl4、kir2ds1、kir2ds2、kir2ds3、kir2ds4、kir2ds5、dap12、kir3ds、nkp44、nkp46、tcr、bcr、整联蛋白、fcβεri、mhc-i、mhc-ii、il-1r、il-2rα、il-2rβ、il-2rγ、il-3rα、csf2rb、il-4r、il-5rα、csf2rb、il-6rα、gp130、il-7rα、il-9r、il-12rβ1、il-12rβ2、il-13rα1、il-13rα2、il-15rα、il-21r、il23r、il-27rα、il-31rα、osmr、csf-1r、细胞表面il-15、il-10rα、il-10rβ、il-20rα、il-20rβ、il-22rα1、il-22rα2、il-22rβ、il-28ra、pd-1、pd-1h、btla、ctla-4、pd-l1、pd-l2、2b4、b7-1、b7-2、b7-h1、b7-h4、b7-dc、dr3、light、lair、ltα1β2、ltβr、tim-1、tim-3、tim-4、tigit、lag-3、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、ccr1、ccr2、ccr3、ccr4、ccr5、ccr6、ccr7、ccr8、ccr9、ccr10、ccr11、cxcr1、cxcr2、cxcr3、cxcr4、cxcr5、cxcr6、cxcr7、clecl9a、dc-sign、igsf4a、siglec、egfr、pdgfr、vegfr、fap、α-sma、波形蛋白、层粘连蛋白、fas、fas-l、fc、icam-1、icam-2、icam-3、icam-4、icam-5、pecam-1、mica、micb、ul16、ulbp1、ulbp2、ilbp3、ulbp4、ulbp5、ulbp6、mult1、rae1α、β、γ、δ和ε、a1r、a2ar、a2br、以及a3r、h60a、h60b和h60c。在各种实施方案中，整联蛋白选自α1、α2、αⅱb、α3、α4、α5、α6、α7、α8、α9、α10、α11、αd、αe、αl、αm、αv、αx、β1、β2、β3、β4、β5、β6、β7、β8和/或它们的组合。在各种实施方案中，tcr选自α、β、γ、δ、ε和ζtcr。文献中已经描述了用于测定细胞表面蛋白表达的几种方法，包括流式细胞术以及大量细胞计数法(cytof)。一种或多种这些细胞表面蛋白的存在或丰度指示患者对本文所公开的方法的治疗有反应。[0163]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒减小了受试者的一个或多个肿瘤样本中的肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平。在各种实施方案中，肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白选自cd39、cd79、mmp1、mmp2、mmp3、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、mmp15、mmp16、mmp17、mmp18、mmp19、mmp20、mmp21、mmp23a、mmp23b、mmp24、mmp25、mmp26、mmp27和mmp28、cxcl12、gm-csf、g-csf、tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3、精氨酸酶、天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、吲哚胺2,3加双氧酶(ido1和ido2)、色氨酸2,3加双氧酶(tdo)、髓过氧化物酶(mpo)、嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(ne)，以及il4i1。在各种实施方案中，与治疗前收集的一个或多个肿瘤样本相比，受试者的一个或多个肿瘤样本中的肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平减小5-100％(例如，减小约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，受试者的一个或多个肿瘤样本中的肿瘤促进、抗炎和/或免疫抑制蛋白的水平减小2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言减小约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。[0164]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒增加了与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质的水平。在各种实施方案中，与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质选自cd44、cd56、cd103c、cd69、kg2a、nkg2b、nkg2c、nkg2d、nkg2e、nkg2f、nkg2h、icos、icos-l、slam、slamf2、ox-40、ox-40l、gitr、gitrl、tl1a、hvem、41-bb、41bb-l、tl-1a、traf1、traf2、traf3、traf5、baff、baff-r、april、trail、rank、aitr、tramp、il-1α、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-9、il-10、il-11、il-12、il-13、il-14、il-15、il-16、il-17、il-17、il-18、il-20、il-21、il-22、il-23、il-24、il-25、il-26、il-27、il-28、il-29、il-30、il-31、il-32、il-33、il-35、il-36、cxcl2(mcp-1)、cxcl3(mip-1α)、cxcl4(mip-1β)、cxcl5(rantes)、ifn-α、ifn-β、ifn-γ、颗粒酶b、穿孔素，以及tnf-α。在各种实施方案中，与治疗前收集的一个或多个肿瘤样本相比，与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质的水平增加5-100％(例如，增加约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，与肿瘤生长抑制、抗肿瘤活性和/或促炎活性相关的蛋白质的水平增加2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言减小约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自肿瘤样本的蛋白质的几种方法，包括蛋白质印迹和elisa。[0165]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒减小了收集自受试者的一个或多个肿瘤样本中的中性粒细胞胞外诱捕网(net)的水平。在各种实施方案中，与治疗前收集的一个或多个肿瘤样本相比，一个或多个肿瘤样本中的net的水平减小5-100％(例如，减小约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，一个或多个肿瘤样本中的net的水平减小2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言减小约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。文献中已经描述了用于测定来自肿瘤样本的net的几种方法，包括蛋白质印迹、elisa和流式细胞术。[0166]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒降低了受试者的一个或多个肿瘤样本中的肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集的一个或多个肿瘤样本相比，肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达降低5-100％(例如，降低约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，肿瘤促进、肿瘤允许和/或免疫抑制基因的表达降低2-100倍(例如，相对于治疗前收集的一个或多个样本而言降低约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。[0167]在各种实施方案中，向具有一个或多个特征为免疫逃避性、免疫保护和/或免疫“冷性”的肿瘤的受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒提高了收集自受试者的一个或多个样本中的肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达。在一个或多个实施方案中，与治疗前收集的一个或多个肿瘤样本相比，肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达提高5-100％(例如，提高约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或约100％，包括这些值之间的所有值和范围)、10-95％、15-90％、20-85％、25-75％、30-70％、35-65％、40-60％、45-55％、50％、或100％。在各种实施方案中，与治疗前收集自受试者的一个或多个肿瘤样本相比，肿瘤抑制、抗肿瘤和/或促炎基因的表达提高2-100倍(例如，提高约2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、或100倍，包括这些值之间的所有值和范围)。在各种实施方案中，基因表达分析通过pcr、rt-pcr、qrt-pcr、新一代测序(ngs)、rna-seq、atac-seq、外显子组测序、dna印迹、微阵列分析和/或单细胞测序执行。[0168]在各种实施方案中，用表面官能化颗粒单独地或与癌症治疗剂组合地治疗患有癌症的受试者使冷性肿瘤转变成热性肿瘤。可使用本文所述和本领域已知的方法检测这样的转变。如果受试者被诊断具有已从冷性肿瘤转变为热性肿瘤的肿瘤，则可通过单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒来继续治疗，其中癌症治疗剂可用于治疗热性肿瘤、或者富免疫细胞或具免疫原性的肿瘤。在其他实施方案中，当肿瘤从冷性肿瘤转变为热性肿瘤时，患者停止用表面官能化颗粒治疗，并且患者开始用可用于治疗热性肿瘤、或者富免疫细胞或具免疫原性的肿瘤的癌症治疗剂进行治疗。这样的癌症治疗剂包括化学治疗剂、细胞因子、血管生成抑制剂、酶、免疫检查点调节剂以及单克隆抗体、激素疗法，包含一种或多种基于细胞的疗法，如过继性细胞转移、肿瘤浸润性白细胞疗法、嵌合抗原受体t细胞疗法(car-t)、nk细胞疗法以及干细胞疗法、或溶瘤病毒或溶瘤细菌。[0169]在各种实施方案中，免疫检查点调节剂靶向程序性细胞死亡蛋白1(pd1)、程序性细胞死亡蛋白配体-1(pd-l1)、细胞毒性t淋巴细胞相关蛋白4(ctla-4)、t细胞免疫球蛋白和含粘蛋白结构域-3(tim-3)、淋巴细胞活化基因3(lag-3)和/或tigit(具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体)。在各种实施方案中，免疫检查点调节剂是选自以下的抗体：伊匹单抗、替西木单抗、派姆单抗、纳武单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、西米普利单抗以及德瓦鲁单抗。[0170]在各种实施方案中，定期监测诊断具有冷性肿瘤并且接受单独或与癌症治疗剂组合的表面官能化颗粒疗法的受试者，以确定肿瘤是否转变成热性肿瘤。监测可如由医师确定为必要时进行，例如每月、每两个月、每三个月、每6个月、或每年。[0171]在各种实施方案中，受试者先前已经用免疫疗法治疗，但是发展出对免疫疗法的抗性，或者已从热性肿瘤转换为冷性肿瘤。还提供了一种治疗患有癌症且已发展出对免疫疗法的抗性或者发展出冷性肿瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒。[0172]施用和给药[0173]本文预期了包括施用组合物以治疗患有癌症的受试者的方法，该组合物包含如本文所述的带负电的颗粒与癌症治疗剂的组合。[0174]本公开的方法使用用于将治疗剂直接或间接引入哺乳动物受试者中的任何医学上可接受的方式执行，包括但不限于注射、口服摄取、鼻内、局部、透皮、肠胃外、吸入喷雾、阴道、或直肠施用。如本文所用，术语肠胃外包括皮下、静脉内、肌内、关节内、腹膜内、鞘内和脑池内注射，以及导管或输注技术。在各种实施方案中，颗粒经静脉内施用，但可通过其他施用途径施用，如但不限于：皮内、皮下、表皮(epictuaneous)、口服、关节内和鞘内。在各种实施方案中，将组合物在肿瘤部位处施用。[0175]在各种实施方案中，将表面官能化颗粒以约0.1至约24mg/kg的剂量施用。在各种实施方案中，将颗粒以约0.1mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、3.0mg/kg、4.0mg/kg、5.0mg/kg、6.0mg/kg、7.0mg/kg、8.0mg/kg、9.0mg/kg、10mg/kg、11mg/kg、12mg/kg、13mg/kg、14mg/kg、15mg/kg、16mg/kg、17mg/kg、18mg/kg、19mg/kg、20mg/kg、21mg/kg、22mg/kg、23mg/kg、或24mg/kg(包括这些值之间的所有值和范围)的剂量施用。在各种实施方案中，将颗粒以约8.0mg至约1920mg范围内的剂量施用。在各种实施方案中，将颗粒以约8.0mg、80mg、320mg、640mg、800mg、960mg、1120mg、1280mg、1440mg、1600mg、1760mg、或1920mg的剂量施用。还预期处于所列举的剂量端点之内和之间的值。这些浓度可以作为单一剂型或作为多剂量施用。[0176]预期癌症治疗剂(如果是已知的癌症治疗剂)按照制造商和治疗医师的指导施用。如果颗粒和癌症治疗剂以同一制剂施用，它们可以如本文所述配制。[0177]给定剂量的免疫调节剂或生物剂癌症治疗剂的量可根据疗法所施用的个体的体型以及所治疗障碍的特征而变化。在示例性治疗中，可能需要施用约1mg/天、5mg/天、10mg/天、20mg/天、50mg/天、75mg/天、100mg/天、150mg/天、200mg/天、250mg/天、500mg/天或1000mg/天，包括这些值之间的所有值和范围。首先在动物模型中，然后在临床测试中进行的标准剂量-反应研究揭示了针对特定疾病状态和患者群体的最佳剂量。[0178]可通过本公开的方法治疗的病症优选地在哺乳动物中发生。哺乳动物包括例如人和其他灵长类，以及宠物或伴侣动物如狗和猫，实验室动物如大鼠、小鼠和兔，以及农用动物如马、猪、绵羊和牛。在各种实施方案中，受试者是人。[0179]在各种实施方案中，将颗粒每天、每隔一天、每天两次、每天三次、每周七次、每周六次、每周五次、每周四次、每周三次、每周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次、每4周一次、每两个月一次、每三个月一次、每6个月一次或每年一次施用。[0180]本公开还预期了无菌药物组合物，该无菌药物组合物包含如本文所述的颗粒、癌症治疗剂以及药学上可接受的载体。[0181]本公开还预期了无菌药物组合物，该无菌药物组合物包含单独的如本文所述的颗粒以及药学上可接受的载体。[0182]本公开还预期了无菌药物组合物，该无菌药物组合物包含单独的癌症治疗剂以及药学上可接受的载体。[0183]还预期了注射器，例如一次性使用或预填充注射器、无菌密封容器，例如包含任何前述抗体或组合物的小瓶、瓶、贮器和/或试剂盒或包装，任选地具有合适的使用说明书。[0184]组合疗法[0185]预期本文所述的颗粒与癌症治疗剂组合地施用，以治疗增殖性障碍的癌症。在各种实施方案中，癌症治疗剂是化学治疗剂、生物剂、基于细胞的疗法、激素疗法、抗体-药物缀合物、溶瘤病毒、或癌症疫苗。[0186]激素疗法包括用于乳腺癌的他莫昔芬、用于乳腺癌和前列腺癌的诺雷德、芳香化酶抑制剂(例如，阿那曲唑、来曲唑、依西美坦)。抗体药物缀合物包括用于淋巴瘤的维布妥昔单抗(抗cd30mab+一甲基澳瑞他汀e)、用于乳腺癌的ado-曲妥珠单抗(ado-trastuzumabentansine)(抗her2/neu+美登木素生物碱)以及用于all的奥英妥珠单抗(抗cd22+卡奇霉素)。溶瘤病毒包括imlygic癌症疫苗包括用于前列腺癌的sipuleucel-t。几种癌症疫苗正在开发当中，包括但不限于蛋白质、多肽和核酸疫苗。[0187]在各种实施方案中，癌症治疗剂是选自以下的化学治疗剂：生长抑制剂、细胞毒素剂、dna复制抑制剂、激酶抑制剂、信号传导级联抑制剂、血管生成抑制剂、代谢抑制剂、氨基酸合成抑制剂、致癌蛋白的选择性抑制剂、转移的抑制剂、抗凋亡因子的抑制剂、凋亡诱导剂、核苷信号传导抑制剂、酶抑制剂以及dna损伤剂。[0188]细胞毒素剂是指抑制或阻止细胞功能和/或引起细胞破坏的物质。该术语旨在包括放射性同位素(例如i131、i125、y90和re186)、化学治疗剂以及毒素，如细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素，或合成毒素，或它们的片段。非细胞毒素剂是指不抑制或阻止细胞功能和/或不引起细胞破坏的物质。非细胞毒素剂可以包括可被活化成具有细胞毒性的试剂。[0189]预期用于本公开的方法中的化学治疗剂包括但不限于表i中列出的那些：[0190]表i[0191][0192][0193][0194]还预期癌症治疗剂包含一种或多种生物剂，如细胞因子、血管生成抑制剂、免疫检查点调节剂以及单克隆抗体。[0195]细胞因子包括干扰素(ifn)和白介素(il)，如ifn-α、ifn-β、ifn-γ、il-1、il-2、il-4、il-5、il-6、il-7、il-10、il-11、il-12、il-13、il-15、il-17、il-18、il-21、转化生长因子β超家族成员(包括tgf-β1、tgf-β2和tgf-β3)、肿瘤坏死因子α、粒细胞集落刺激因子(g-csf)，以及粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)。[0196]在各种实施方案中，癌症治疗剂包含酶。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含酶，该酶靶向t细胞、b细胞、apc、单核细胞、mdsc、tam、嗜中性粒细胞、其他单核细胞来源的细胞、肿瘤相关基质、癌干细胞、间充质干细胞、细胞外基质，以及氨基酸。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含选自以下的酶：天冬酰胺酶、犬尿氨酸酶、l-精氨酸脱亚胺酶、l-甲硫氨酸-g-裂解酶、一种或多种氨基酸降解酶，以及一种或多种核苷降解酶。[0197]生物剂如免疫检查点调节剂靶向pd1、pd-l1、ctla-4、timp-3、lag-3和/或tigit(具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体)。在各种实施方案中，免疫检查点调节剂是针对pd-1、pd-l1、或ctla-4特异性的抗体。针对检查点蛋白特异性的抗体包括伊匹单抗(bristol-myerssquibbcompany)，以及结合ctla-4的替西木单抗；针对pd-1的抗体，如派姆单抗(mercksharp&dohmecorp)和纳武单抗(bristol-myerssquibb)；以及靶向pd-l1的抗体，如阿特珠单抗阿维单抗以及德瓦鲁单抗(批准用于治疗尿路上皮癌和非小细胞肺癌)、西米普利单抗(批准用于皮肤鳞状细胞癌)。[0198]在各种实施方案中，单克隆抗体是单-特异性、双-特异性、三-特异性或双特异性t细胞接合(bite)抗体。[0199]在各种实施方案中，单克隆抗体是诱导抗肿瘤免疫反应的免疫细胞共刺激分子激动剂。示例性共刺激分子包括但不限于icos(可诱导性t细胞共刺激因子)(cd278)、ox40(cd134)、gitr(糖皮质激素诱发型肿瘤坏死因子受体)、cd40以及cd27。[0200]在各种实施方案中，可用于该方法的单克隆抗体选自阿仑单抗、贝伐单抗、本妥昔单抗、西妥昔单抗、地诺单抗、替伊莫单抗、曲妥珠单抗、帕尼单抗、帕妥珠单抗，以及利妥昔单抗。在各种实施方案中，可用于该方法的单克隆抗体靶向受体酪氨酸激酶、egfr、vegf、vegfr、pdgf、pdgfr、tgf-β、tgf-β-lap、sirp-α、cd47、cd39、cd73，以及成纤维细胞活化蛋白(fap)。[0201]生物剂包括单克隆抗体，该单克隆抗体是单-特异性、双-特异性、三-特异性或双特异性t细胞接合物(bite)。可用于治疗癌症的单克隆抗体包括贝伐单抗(genentech)，即针对vegf-a的抗体；埃罗替尼(genentechandosipharmaceuticals)，即作用于egfr的酪氨酸激酶抑制剂；达沙替尼(bristol-myerssquibbcompany)，即口服bcr-abl酪氨酸激酶抑制剂；il-21；聚乙二醇化ifn-α2b；阿昔替尼(pfizer,inc.)，即酪氨酸激酶抑制剂；以及曲美替尼(glaxosmithkline)，即mek抑制剂(philips和atkins,intimmunol.,27(1):39-46(2015)，其以引用方式并入本文)。可用于治疗癌症的双特异性抗体描述于krishnamurthy等人(pharmacolther.2018年5月；185:122-134)以及yu等人(j.hematoloncol2017,10:155)，包括博纳吐单抗和卡妥索单抗。[0202]该方法还提供了癌症治疗剂包含一种或多种基于细胞的疗法，包括过继性细胞转移、肿瘤浸润性白细胞疗法、嵌合抗原受体t细胞(car-t)疗法、nk细胞疗法和干细胞疗法。[0203]在各种实施方案中，基于细胞的疗法是自体患者来源的细胞的过继转移。在各种实施方案中，基于细胞的疗法是同种异体供体来源的细胞的过继转移。[0204]在各种实施方案中，基于细胞的疗法是通用型供体来源或诱导性多能干细胞来源的细胞的转移，所述细胞不是患者特异性的并且适合长期储存。这样的疗法也称为“非专门设计的”疗法。[0205]在各种实施方案中，癌症治疗剂是激素疗法。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种抗体-药物缀合物。在各种实施方案中，癌症治疗剂包含一种或多种癌症疫苗。在各种实施方案中，癌症疫苗是蛋白质、多肽和/或核酸疫苗。[0206]在各种实施方案中，癌症治疗剂是选自以下的免疫疗法：溶瘤病毒、细菌、溶瘤细菌或其他细菌聚生体、卡介苗(bcg)、微生物组调节剂和/或toll样受体(tlr)激动剂。在各种实施方案中，tlr激动剂是tlr3、tlr4、tlr5、tlr7、tlr8、tlr9、tlr10、tlr11、tlr12和/或tlr13激动剂。在各种实施方案中，tlr激动剂来源于病毒、细菌，和/或以合成方式制备。在各种实施方案中，免疫疗法是sting途径调节剂。[0207]在各种实施方案中，癌症治疗剂包含病毒或细菌载体。在各种实施方案中，病毒载体选自腺病毒、腺相关病毒(aav)、单纯疱疹病毒、慢病毒、逆转录病毒、甲病毒、黄病毒、弹状病毒、麻疹病毒、新城鸡瘟病毒、痘病毒、牛痘病毒、改良安卡拉病毒、水疱性口炎病毒、小核糖核酸病毒、烟草花叶病毒、马铃薯病毒x、豇豆花叶病毒或黄瓜花叶病毒。在各种实施方案中，病毒是溶瘤病毒。在各种实施方案中，病毒是嵌合病毒、合成病毒、花叶病毒或假型病毒。[0208]预期颗粒和癌症治疗剂可以并行、同时、或顺序给予。两种治疗剂的并行施用不需要同时或者通过相同途径施用试剂，只要在试剂发挥其治疗效果期间的时间段内存在重叠即可。预期同时或顺序施用，如在不同天或周施用。[0209]预期颗粒和癌症治疗剂能够以同一制剂同时给予。还预期将各试剂以分开的制剂施用且并行施用，并行是指各试剂在彼此的30分钟内给予。[0210]在另一方面，在施用颗粒组合物之前，施用癌症治疗剂。先前施用是指在用颗粒治疗前一周最多至施用颗粒前30分钟的范围内施用癌症治疗剂。还预期在施用颗粒组合物之后施用癌症治疗剂。后续施用意在描述从颗粒治疗后30分钟最多至施用后一周的施用。[0211]在各种实施方案中，每天一次、每天两次、每天三次、每周七次、每周六次、每周五次、每周四次、每周三次、每周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次、每4周一次、每两个月一次、每三个月一次、每6个月一次或每年一次施用颗粒和/或癌症治疗剂。[0212]在各种实施方案中，将颗粒和/或癌症治疗剂经静脉内、口服、经鼻、肌内、经眼、经皮或皮下施用。[0213]在各种实施方案中，受试者是哺乳动物。在各种实施方案中，受试者是人。[0214]试剂盒[0215]作为额外的方面，本公开包括包含一种或多种化合物或组合物的试剂盒，所述化合物或组合物以利于它们用于实践本公开的方法的方式包装。在一个实施方案中，这样的试剂盒包括包装在容器如密封瓶或贮器中的本文所述的化合物或组合物(例如，单独或与癌症治疗剂组合的颗粒、或其组合物)，其中标签附连到容器上或者包括在包装中，并且描述了化合物或组合物在实践该方法中的用途。优选地，化合物或组合物以单位剂型包装。试剂盒还可包括适于根据特定施用途径施用组合物或者实践筛选测定的装置。优选地，试剂盒含有描述抑制剂组合物的用途的标签。[0216]实施方案[0217]实施方案1.一种治疗受试者中的癌症的方法，其包括单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒，其中所述受试者具有一个或多个免疫逃避性肿瘤、免疫保护肿瘤、免疫“冷性”肿瘤、微卫星稳定的肿瘤、微卫星不稳定性低的肿瘤、包含低免疫浸润的肿瘤、包含低肿瘤突变负荷的肿瘤、表现出异质性的肿瘤，或它们的组合。[0218]实施方案2.一种用于治疗受试者中的免疫逃避性肿瘤的方法，其包括：[0219](i)诊断所述受试者具有免疫逃避性肿瘤，以及[0220](ii)将表面官能化颗粒单独地或与癌症治疗剂组合地施用于所述受试者。[0221]实施方案3.根据实施方案2所述的方法，其中所述诊断包括测定与免疫逃避性肿瘤、微卫星稳定性/不稳定性、肿瘤突变负荷、对疗法的抗性、肿瘤异质性、或它们的组合相关的生物标志物/特征。[0222]实施方案4.根据实施方案2或3所述的方法，其还包括(iii)确定所述受试者的肿瘤是否变得免疫应答性，然后(iv)将表面官能化颗粒与免疫疗法组合施用。[0223]实施方案5.一种用于治疗患有癌症并且先前已接受过免疫疗法或者其中所述癌症是免疫疗法难治性的受试者的方法，其包括向所述受试者单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒。[0224]实施方案6.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒包含聚乙醇酸(pga)聚合物、聚乳酸(pla)、聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)、聚苯乙烯、壳聚糖、多糖、一种或多种脂质、金刚石、或铁、锌、镉、金、或银。[0225]实施方案7.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述表面官能化颗粒是聚(乳酸-共-乙醇酸)(plga)颗粒。[0226]实施方案8.根据实施方案7所述的方法，其中所述颗粒包含约1:99至约99:1的聚乳酸:聚乙醇酸比率。[0227]实施方案9.根据实施方案8所述的方法，其中所述颗粒包含约50:50、约80:20至约100:0的聚乳酸:聚乙醇酸，或者约50:50、约80:20至约100:0的聚乙醇酸:聚乳酸。[0228]实施方案10.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒包含50:50的聚乳酸:聚乙醇酸。[0229]实施方案11.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒通过添加一个或多个羧基而表面官能化。[0230]实施方案12.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒是带负电的颗粒。[0231]实施方案13.根据实施方案12所述的方法，其中所述颗粒不含治疗剂。[0232]实施方案14.根据实施方案12或13所述的方法，其中所述颗粒不含连接的肽或抗原性部分或其他生物活性剂。[0233]实施方案15.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒具有-100mv至-1mv的ζ电位。[0234]实施方案16.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒具有-80mv至-30mv、或-50mv至-40mv的ζ电位。[0235]实施方案17.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述表面官能化表面的直径为0.1μm至10μm。[0236]实施方案18.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述表面官能化颗粒的直径为400nm至800nm。[0237]实施方案19.根据实施方案1-18中任一项所述的方法，其中所述表面官能化颗粒和/或癌症治疗剂以组合物施用。[0238]实施方案20.根据实施方案19所述的方法，其中所述组合物包含药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载体。[0239]实施方案21.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个免疫冷性肿瘤。[0240]实施方案22.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个肿瘤突变负荷低的肿瘤。[0241]实施方案23.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个微卫星稳定的肿瘤。[0242]实施方案24.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个微卫星不稳定性低的肿瘤。[0243]实施方案25.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者具有一个或多个肿瘤免疫浸润低的肿瘤。[0244]实施方案26.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述施用改变所述肿瘤免疫浸润。3)和/或tigit(具有ig和itim结构域的t细胞免疫受体)。[0261]实施方案43.根据实施方案42所述的方法，其中所述免疫检查点调节剂是选自以下的抗体：伊匹单抗、替西木单抗、派姆单抗、纳武单抗、阿特珠单抗、阿维单抗、西米普利单抗以及德瓦鲁单抗。[0262]实施方案44.根据实施方案40所述的方法，其中所述单克隆抗体包含单-特异性、双-特异性、或三-特异性抗体。[0263]实施方案45.根据实施方案40所述的方法，其中所述单克隆抗体包含双-特异性t细胞接合物(bite)。[0264]实施方案46.根据实施方案40所述的方法，其中所述单克隆抗体选自阿仑单抗、贝伐单抗、本妥昔单抗、西妥昔单抗、地诺单抗、替伊莫单抗、曲妥珠单抗、帕尼单抗、帕妥珠单抗，以及利妥昔单抗。[0265]实施方案47.根据实施方案1-38所述的方法，其中与所述颗粒组合施用的所述癌症治疗剂包含一种或多种选自以下的基于细胞的疗法：过继性细胞转移、肿瘤浸润性白细胞疗法、嵌合抗原受体t细胞疗法(car-t)、nk细胞疗法以及干细胞疗法。[0266]实施方案48.根据实施方案1-38中任一项所述的方法，其中与所述颗粒组合施用的所述癌症治疗剂是激素疗法。[0267]实施方案49.根据实施方案1-38中任一项所述的方法，其中与所述颗粒组合施用的所述癌症治疗剂包含一种或多种癌症疫苗。[0268]实施方案50.根据实施方案1-38中任一项所述的方法，其中与所述颗粒组合施用的所述癌症治疗剂是一种或多种包含以下的免疫疗法：溶瘤病毒、溶瘤细菌或其他细菌组合物、卡介苗(bcg)、微生物组调节剂、sting途径调节剂和/或toll样受体(tlr)调节剂。[0269]实施方案51.一种治疗受试者中的癌症的方法，其包括以下步骤：[0270]a.确定肿瘤的免疫状态和/或肿瘤突变负荷和/或肿瘤的微卫星不稳定性状态；[0271]b.诊断所述肿瘤是免疫逃避性的和/或免疫保护的和/或免疫冷性的，和/或具有低肿瘤免疫浸润，和/或具有低肿瘤突变负荷，和/或诊断为微卫星稳定的和/或难治性的和/或微卫星不稳定性低，和/或表现出异质性，或它们的组合，[0272]c.单独地或与癌症治疗剂组合地施用表面官能化颗粒。[0273]实施方案52.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中每天一次、每天两次、每天三次、每周七次、每周六次、每周五次、每周四次、每周三次、每周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次、每4周一次、每两个月一次、每三个月一次、每6个月一次或每年一次施用所述颗粒和/或所述癌症治疗剂。[0274]实施方案53.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述颗粒经静脉内、口服、经鼻、肌内、经眼、经皮、或皮下施用。[0275]实施方案54.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。[0276]实施方案55.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述施用改善所述癌症的一种或多种症状。[0277]实施方案56.根据前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述表面官能化颗粒是不含连接的肽或抗原性部分或其他生物活性剂的带负电的颗粒。[0278]实施方案57.根据实施方案56所述的方法，其中所述颗粒是具有-80至-30mv的ζ电位以及200至2000nm的直径的plga颗粒。[0279]实施方案58.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是免疫逃避性肿瘤。[0280]实施方案59.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是免疫保护肿瘤。[0281]实施方案60.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是免疫“冷性”肿瘤。[0282]实施方案61.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是微卫星稳定的肿瘤。[0283]实施方案62.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤是微卫星不稳定性低的肿瘤。[0284]实施方案63.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤包含低免疫浸润。[0285]实施方案64.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤包含低肿瘤突变负荷。[0286]实施方案65.根据实施方案1-57中任一项所述的方法，其中所述肿瘤表现出异质性。[0287]本公开的额外方面和细节将从以下实施例中显而易见，这些实施例旨在例示性而非限制性的。实施例[0288]实施例1[0289]为了确定表面官能化颗粒针对具有低肿瘤突变负荷的免疫“冷性”或免疫逃避性肿瘤的功效，使用鼠b16f10黑素瘤细胞系建立同系肿瘤模型。b16f10细胞先前已经显示为免疫“冷性”，携带低tmb，并且表现出对检查点抑制剂疗法的抗性(song等人,natcommun.9:2237,2018)。简而言之，经由皮下注射到胁腹中，向6-8周龄c57bl/6小鼠植入b16f10细胞。在可触知的肿瘤形成(～100mm3尺寸)之后，将动物随机分到如下四个治疗组之一中：组1：对照治疗(n＝15)；组2：sfp(n＝15)；组3：抗pd1(n＝15)；组4：combo(sfp+抗pd1)(n＝15)。[0290][0291]根据以下治疗方案，经由静脉内(i.v)注射施用由plga构成且具有负ζ电位(例如，-100m至-1mv的范围内，如-80mv至-30mv)的sfp(1mg)，并且经由腹膜内(i.p)注射施用抗pd1(100μg)：[0292]通过使用卡尺在两个维度上测量肿瘤尺寸来评价肿瘤生长。使用公式v＝0.5×a×b2计算肿瘤体积，其中a和b分别是肿瘤的长和短直径。肿瘤尺寸以mm3表示。[0293]在开始治疗后第12天处死每组的五只动物，并且通过流式细胞术评价肿瘤中的mdsc和tam的频率。还使用活/死染色来评价细胞活力。如图1a所示，用sfp单独地或与抗pd1组合地治疗12天导致了肿瘤中细胞活力的完全消除。单独用抗pd1治疗也导致细胞活力的适度但显著的降低。[0294]与其对细胞活力的效应一致，用sfp治疗较强地抑制肿瘤生长，而抗pd1却非如此。组合疗法中sfp和抗pd1对肿瘤生长的抑制与sfp单一疗法相当，这表明组合组中的肿瘤抑制主要由sfp驱动，并且与b16f10黑素肿瘤对检查点阻断有抗性的事实一致(图1b)。与其对肿瘤生长的效应一致，与对照和抗pd1治疗相比，sfp治疗导致存活延长(～10天)。sfp单一疗法中的小鼠最终死于疾病，指示b16f10黑素肿瘤的极具侵袭性病程。如所预期，由于b16f10肿瘤对抗pd1的抗性，组合治疗并未展示出协同效应，并且该组中的存活与sfp单一疗法组相当(图1c)。[0295]如图1d-1f所示，单独用sfp治疗导致肿瘤中的mdsc(cd11b+ly6g+)和tam(cd11b+f4/80+)的频率显著降低。在sfp和抗pd1组合治疗后mdsc频率趋向降低(p＝0.055)时，该治疗组中tam的频率显著下降。用单独的sfp治疗导致肿瘤中nk细胞的频率呈增加趋势，并且组合疗法导致nk细胞频率统计上显著的增加(图1f)。组合疗法对mdsc、tam和nk细胞的效应似乎由sfp驱动，因为这些细胞在肿瘤中的频率不受到单独的抗pd1的治疗的影响。[0296]实施例2：[0297]用表面官能化颗粒治疗导致原发性原位4t1乳腺肿瘤减少并抑制其向肺转移。[0298]为了确定实施例1中所述的表面官能化颗粒(例如cnp-301)抑制具有低肿瘤突变负荷的免疫“冷性”乳腺肿瘤的生长和转移的功效，使用鼠4t1乳腺肿瘤细胞系建立同系原位肿瘤模型。4t1肿瘤细胞系来源于balb/c小鼠的乳腺组织。4t1细胞对雌激素、孕酮和her2受体呈三阴性，并且已广泛用作iv期人乳腺癌的模型。4t1肿瘤是高度免疫原性和侵入性的，并且通过自发转移至远处器官如肺来模拟人疾病。重要地，4t1肿瘤对抗pd1检查点抑制剂疗法有抗性，类似于人三阴性乳腺癌。在本研究中，将cnp-301针对原位4t1乳腺肿瘤的功效与对照(盐水)和抗pd1单克隆抗体治疗进行比较。[0299]向6-8周龄balb/c小鼠的第四个乳腺脂肪垫中注射1×105个4t1肿瘤细胞。这些实验中使用的4t1肿瘤细胞被工程化成表达荧光素酶，从而使得它们能够通过生物发光成像进行检测。[0300]如下在肿瘤注射后的不同时间点开始治疗：[0301]组肿瘤注射后开始治疗的天数盐水5(50mm3可触知的肿瘤之后)cnp-3011cnp-3012cnp-3014cnp-3015(50mm3可触知的肿瘤之后)抗pd15(50mm3可触知的肿瘤之后)[0302]每组由7-8只动物组成。治疗每3天施用一次。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。抗pd1经由i.p注射以200μg/小鼠的剂量每3天施用一次。通过使用标准卡尺测量肿瘤来常规监测肿瘤生长。使用下式计算肿瘤体积：[0303]肿瘤体积＝0.5(长度)×(宽度)2[0304]肿瘤接种后第20天，对动物处以安乐死，并通过生物发光成像检测肺转移。[0305]如图2a-2b所示，与对照和抗pd-1治疗相比，在第1天和第2天开始用cnp-301治疗导致原发性原位4t1肿瘤的生长显著降低。如图3a-3b所示，第20天肺的生物发光成像揭示，用cnp-301治疗显著降低了原发性4t1肿瘤向肺的转移。虽然对照和抗pd1治疗组中的大多数动物发展转移(？)，在第1天开始用cnp-301治疗完全地消除肺转移。在第2、3和5天开始用cnp-301治疗的小鼠在某些动物中发展肺转移(分别为1/8、2/8和3/8小鼠)；然而，与对照和抗pd1治疗组中的转移相比，这些转移病灶在尺寸上显著更小。总之，这些数据展示cnp-301治疗导致原发性原位4t1肿瘤的生长降低，并且抑制它们向肺转移。[0306]实施例3：[0307]用表面官能化颗粒治疗抑制肺中预先存在的4t1转移病灶的生长[0308]为了确定表面官能化颗粒(例如，cnp-301)抑制预先存在的转移病灶的功效，使用鼠4t1乳腺肿瘤细胞系建立同系原位肿瘤切除模型。简而言之，向6-8周龄balb/c小鼠的第四个乳腺脂肪垫中注射1×105个4t1肿瘤细胞。这些实验中使用的4t1肿瘤细胞被工程化成表达荧光素酶，从而使得它们能够通过生物发光成像进行检测。在原发性肿瘤已经开始转移至肺后，在肿瘤注射后第11天手术切除原发性4t1肿瘤。在肿瘤注射后第12天，用盐水(对照)或cnp-301治疗动物。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。在肿瘤注射后第42天，对动物处以安乐死，并通过生物发光成像评价肺中的转移病灶，评价4t1原发性肿瘤向肺的转移。研究设计示于图4a中。[0309]如图4b所示，用cnp-301治疗完全抑制了4t1肺转移的生长，因为没有一只小鼠显示出通过生物发光成像所检查的转移病灶的证据。相比之下，4/9(44.44％)小鼠在对照(盐水)治疗组中显示出肺转移的证据。这些观察是高度显著的，因为肿瘤切除模型研究设计类似于临床中的转移性三阴性乳腺癌的目前治疗范例，其中手术移除原发性肿瘤，继之以旨在抑制转移病灶生长的新辅助治疗方案。这些数据显示，cnp-301可有效地在新辅助疗法情况下治疗人三阴性乳腺癌。[0310]实施例4：[0311]用表面官能化颗粒治疗诱导b16f10荷瘤小鼠血液和肿瘤中的促炎免疫变化b16f10鼠黑素肿瘤被视为免疫“冷性”，具有低肿瘤突变负荷。另外，这些肿瘤对免疫疗法(例如，抗pd1检查点抑制剂)的治疗有抗性，这部分归因于其免疫状态，如低肿瘤免疫浸润。[0312]检查cnp-301在b16f10荷瘤小鼠中诱导促炎抗肿瘤免疫变化的功效。简而言之，向6-8周龄c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(～50mm3)之后，用盐水(对照)或cnp-301治疗动物。每三天治疗一次动物。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。[0313]在不同时间点[肿瘤注射后第8天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)]评价以下参数：血液中的促炎细胞因子/趋化因子(通过elisa)、血液和肿瘤中的髓样细胞表型(通过流式细胞术)，以及血液和肿瘤中的淋巴细胞功能表型(通过流式细胞术)。[0314]如图5a-5e所示，与盐水(对照)相比，cnp-301治疗导致在第14天和第20天促炎细胞因子/趋化因子(a)mip-1β、(b)tnf-α和(c)rantes的水平从基线(第8天)在统计上显著增加。cnp-301治疗也导致在第14天(d)ifn-g和(e)mcp-1的水平从基线(第8天)增加；然而，该增加在统计上不显著。[0315]如图6所示，与盐水(对照)相比，cnp-301治疗导致在第14天和第20天血液中的pd-l1+单核细胞(图6a)和粒细胞(图6b)的频率从基线(第8天)在统计上显著增加。髓样细胞上的pd-l1+表达与免疫调节功能相关，并且在这些细胞活化时被诱导。与活化表型一致，cnp-301治疗导致在第14天和第20天血液中在其细胞表面上表达il-15的髓样细胞的频率从基线(第8天)在统计上显著增加(图6c)。已知髓样细胞上的细胞表面il-15表达经由髓样细胞上的il-15与t细胞和nk细胞上的其同源受体之间的相互作用而反式诱导t细胞和nk细胞活化。与这些观察一致，cnp-301治疗导致在第14天和第20天血液中的总nk细胞(图6d)和活化的(颗粒酶+、穿孔素+和cd244+)nk细胞(图6e-6g)的频率从基线在统计上显著增加。[0316]与血液中的观察相似，在治疗后不同时间点对b16f10肿瘤的检查揭示，与盐水(对照)相比，用cnp-301治疗导致肿瘤中第20天表达细胞表面il-15的髓样细胞(图7a)、第14天活化cd244+nk细胞(图7b)、第20天活化穿孔素+nk细胞(图7c)和第20天活化颗粒酶+nk细胞(图7d)的频率从基线(第8天)在统计上显著增加。[0317]总之，这些数据展示用cnp-301治疗诱导b16f10荷瘤小鼠的血液和肿瘤中的促炎免疫变化。[0318]实施例5：[0319]用表面官能化颗粒治疗诱导mc38荷瘤小鼠血液和肿瘤中的促炎免疫变化[0320]还检查cnp-301在mc38荷瘤小鼠中诱导促炎抗肿瘤免疫变化的功效。简而言之，向6-8周龄c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(～50mm3)之后，用盐水(对照)或cnp-301治疗动物。每三天治疗一次动物。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。[0321]在不同时间点[肿瘤注射后第7天(第1剂前)、第14天(第3剂后24小时)和第20天(第5剂后24小时)]评价以下参数：血液中的促炎细胞因子/趋化因子(通过elisa)、血液和肿瘤中的髓样细胞表型(通过流式细胞术)，以及血液和肿瘤中的淋巴细胞功能表型(通过流式细胞术)。[0322]如图8a所示，与盐水(对照)相比，用cnp-30治疗导致肿瘤生长显著降低。在肿瘤注射后第14天或者在3剂后观察到cnp-301介导的肿瘤生长抑制，并且继续抑制肿瘤生长直至第20天。[0323]如图8b-8d所示，与盐水(对照)相比，cnp-301治疗导致在第14天和第20天促炎细胞因子/趋化因子mip-1β、tnf-α和rantes的水平从基线(第8天)在统计上显著增加。cnp-301治疗也导致在第14天ifn-g和mcp-1的水平从基线(第8天)增加；然而，该增加在统计上不显著。[0324]如图9所示，与盐水(对照)相比，cnp-301治疗导致在第14天和第20天血液中的pd-l1+单核细胞(图9a)和粒细胞(图9b)的频率分别从基线(第8天)在统计上显著增加。髓样细胞上的pd-l1+表达与免疫调节功能相关，并且在这些细胞活化时被诱导。与活化表型一致，cnp-301治疗导致在第20天血液中在其细胞表面上表达il-15的髓样细胞的频率从基线(第7天)在统计上显著增加(图9c)。与所观察到的il-15增加一致，cnp-301治疗还导致在第14天和第20天血液中的总nk细胞(图9d)和活化的(颗粒酶+、穿孔素+和cd244+)nk细胞(图9e-9g)的频率从基线在统计上显著增加。[0325]总之，这些数据展示用cnp-301治疗诱导mc38荷瘤小鼠的血液中的促炎免疫变化。[0326]实施例6：[0327]表面官能化颗粒的功效取决于b16f10肿瘤模型中il-15和nk细胞的存在[0328]如实施例4和实施例5所示，用cnp-301治疗导致髓样细胞上细胞表面il-15表达的诱导连同nk细胞的活化。接下来检查cnp-301抑制肿瘤生长的功效是否取决于il-15和nk细胞的存在。[0329]首先，评估抗il-15抗体介导的il-15阻断对cnp-301抑制肿瘤生长的功效的影响。简而言之，向6-8周龄c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(～50mm3)之后，将动物随机分到以下治疗组中：[0330]·盐水(对照)+同种型对照抗体[0331]·盐水(对照)+抗il-15[0332]·cnp-301+同种型对照抗体[0333]·cnp-301+抗il-15抗体[0334]动物每三天接受cnp-301治疗一次。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。经由腹膜内注射向动物施用100μg剂量的抗il-15或同种型对照抗体，每三天一次。通过使用标准卡尺测量肿瘤来常规监测肿瘤生长。使用下式计算肿瘤体积：[0335]肿瘤体积＝0.5(长度)×(宽度)2[0336]如图10所示，与盐水相比，不存在il-15阻断(同种型对照)时的cnp-301治疗抑制b16f10肿瘤生长。il-15阻断(抗il-15)在盐水治疗组中逆转了cnp-301抗肿瘤功效并加剧肿瘤生长。总之，这些数据展示cnp-301功效取决于il-15的存在。[0337]接下来，在b16f10肿瘤模型中检查抗nk1.1抗体介导的nk细胞衰竭对cnp-301抑制肿瘤生长的功效的影响。简而言之，向6-8周龄c57bl/6小鼠经皮下注射b16f10肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(～50mm3)之后，将动物随机分到以下治疗组中：[0338]·盐水(对照)+同种型对照抗体[0339]·盐水(对照)+抗nk1.1[0340]·cnp-301+同种型对照抗体[0341]·cnp-301+抗nk1.1[0342]动物每三天接受cnp-301治疗一次。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。将抗nk1.1/同种型抗体治疗在用盐水/cnp-301治疗前一天开始施用。经由腹膜内注射向动物施用100μg剂量的抗nk1.1或同种型对照抗体，每三天一次。通过使用标准卡尺测量肿瘤来常规监测肿瘤生长。使用下式计算肿瘤体积：[0343]肿瘤体积＝0.5(长度)×(宽度)2[0344]如图11所示，与盐水相比，不存在nk细胞衰竭(同种型对照)时的cnp-301治疗抑制b16f10肿瘤生长。nk细胞衰竭(抗nk1.1)逆转了cnp-301抗肿瘤功效。总之，这些数据展示cnp-301功效取决于nk细胞的存在。[0345]实施例7[0346]表面官能化颗粒的功效取决于mc38肿瘤模型中nk细胞的存在[0347]在mc38肿瘤模型中检查抗nk1.1抗体介导的nk细胞衰竭对表面官能化颗粒(例如cnp-301)抑制肿瘤生长的功效的影响。简而言之，向6-8周龄c57bl/6小鼠经皮下注射mc38肿瘤细胞。在可触知的肿瘤形成(～50mm3)之后，将动物随机分到以下治疗组中：[0348]·盐水(对照)+同种型对照抗体[0349]·盐水(对照)+抗nk1.1[0350]·cnp-301+同种型对照抗体[0351]·cnp-301+抗nk1.1[0352]动物每三天接受cnp-301治疗一次。cnp-301经由尾静脉注射以1mg/小鼠的剂量施用。经由腹膜内注射向动物施用100μg剂量的抗nk1.1或同种型对照抗体，每三天一次。通过使用标准卡尺测量肿瘤来常规监测肿瘤生长。使用下式计算肿瘤体积：[0353]肿瘤体积＝0.5(长度)×(宽度)2[0354]如图12所示，与盐水相比，不存在nk细胞衰竭(同种型对照)时的cnp-301治疗抑制mc38肿瘤生长。nk细胞衰竭(抗nk1.1)逆转了cnp-301抗肿瘤功效。总之，这些数据展示cnp-301功效取决于nk细胞的存在。[0355]实施例8[0356]表面官能化颗粒对髓样来源抑制细胞(mdsc)的影响[0357]在鼠4t1原位乳腺癌模型中评价表面官能化颗粒对髓样来源的细胞的影响。简而言之，通过将肿瘤细胞注射到第四个乳腺脂肪垫中，在balb/c小鼠中建立原位4t1肿瘤。在肿瘤注射后第3天，将动物随机分到以下两个治疗组之一中：[0358]·盐水(对照)(n＝4)[0359]·cnp-301(n＝4)[0360]治疗经由尾静脉注射施用。cnp-301以1mg/小鼠的剂量施用。向动物施用盐水或cnp-301的单一治疗，并且在治疗后12小时通过流式细胞术评价中血液中的巨噬细胞immunotherapy.trendsinimmunology40,142-158[0388]9.bonaventura,p.,shekarian,t.,alcazer,v.,valladeau-guilemond,j.,valsesia-wittmann,s.,amigorena,s.,caux,c.,anddepil,s.(2019)coldtumors:atherapeuticchallengeforimmunotherapy.frontiersinimmunology10,168[0389]10.topalian,s.l.,drake,c.g.,andpardoll,d.m.(2015)immunecheckpointblockade:acommondenominatorapproachtocancertherapy.cancercell27,450-461[0390]11.thomas,d.a.,andmassague,j.(2005)tgf-betadirectlytargetscytotoxictcellfunctionsduringtumorevasionofimmunesurveillance.cancercell8,369-380[0391]12.chao,m.p.,weissman,i.l.,andmajeti,r.(2012)thecd47-sirpalphapathwayincancerimmuneevasionandpotentialtherapeuticimplications.currentopinioninimmunology24,225-232[0392]13.le,d.t.,durham,j.n.,smith,k.n.,wang,h.,bartlett,b.r.,aulakh,l.k.,lu,s.,kemberling,h.,wilt,c.,luber,b.s.,wong,f.,azad,n.s.,rucki,a.a.,laheru,d.,donehower,r.,zaheer,a.,fisher,g.a.,crocenzi,t.s.,lee,j.j.,greten,t.f.,duffy,a.g.,ciombor,k.k.,eyring,a.d.,lam,b.h.,joe,a.,kang,s.p.,holdhoff,m.,danilova,l.,cope,l.,meyer,c.,zhou,s.,goldberg,r.m.,armstrong,d.k.,bever,k.m.,fader,a.n.,taube,j.,housseau,f.,spetzler,d.,xiao,n.,pardoll,d.m.,papadopoulos,n.,kinzler,k.w.,eshleman,j.r.,vogelstein,b.,anders,r.a.,anddiaz,l.a.,jr.(2017)mismatchrepairdeficiencypredictsresponseofsolidtumorstopd-1blockade.science(newyork,n.y.)357,409-413[0393]14.yarchoan,m.,hopkins,a.,andjaffee,e.m.(2017)tumormutationalburdenandresponseratetopd-1inhibition.thenewenglandjournalofmedicine377,2500-2501[0394]15.gibney,g.t.,weiner,l.m.,andatkins,m.b.(2016)predictivebiomarkersforcheckpointinhibitor-basedimmunotherapy.thelancet.oncology17,e542-e551[0395]16.malekivareki,s.(2018)highandlowmutationalburdentumorsversusimmunologicallyhotandcoldtumorsandresponsetoimmunecheckpointinhibitors.journalforimmunotherapyofcancer6,157[0396]17.trujillo,j.a.,sweis,r.f.,bao,r.,andluke,j.j.(2018)tcell-inflamedversusnon-tcell-inflamedtumors:aconceptualframeworkforcancerimmunotherapydrugdevelopmentandcombinationtherapyselection.cancerimmunologyresearch6,990-1000[0397]18.kumar,v.,patel,s.,tcyganov,e.,andgabrilovich,d.i.(2016)thenatureofmyeloid-derivedsuppressorcellsinthetumormicroenvironment.trendsinimmunology37,208-220[0398]19.gabrilovich,d.i.(2017)myeloid-derivedsuppressorcells.cancerimmunologyresearch5,3-8[0399]20.qian,b.z.,andpollard,j.w.(2010)macrophagediversityenhancestumorprogressionandmetastasis.cell141,39-51[0400]21.lafleur,l.,boura,v.f.,alexeyenko,a.,berglund,a.,ponten,v.,mattsson,j.s.m.,djureinovic,d.,persson,j.,brunnstrom,h.,isaksson,j.,branden,e.,koyi,h.,micke,p.,karlsson,m.c.i.,andbotling,j.(2018)expressionofscavengerreceptormarcodefinesatargetabletumor-associatedmacrophagesubsetinnon-smallcelllungcancer.internationaljournalofcancer[0401]22.georgoudaki,a.m.,prokopec,k.e.,boura,v.f.,hellqvist,e.,sohn,s.,ostling,j.,dahan,r.,harris,r.a.,rantalainen,m.,klevebring,d.,sund,m.,brage,s.e.,fuxe,j.,rolny,c.,li,f.,ravetch,j.v.,andkarlsson,m.c.(2016)reprogrammingtumor-associatedmacrophagesbyantibodytargetinginhibitscancerprogressionandmetastasis.cellreports15,2000-2011[0402]23.thomas,a.,routh,e.d.,pullikuth,a.,jin,g.,su,j.,chou,j.w.,hoadley,k.a.,print,c.,knowlton,n.,black,m.a.,demaria,s.,wang,e.,bedognetti,d.,jones,w.d.,mehta,g.a.,gatza,m.l.,perou,c.m.,page,d.b.,triozzi,p.,andmiller,l.d.(2018)tumormutationalburdenisadeterminantofimmune-mediatedsurvivalinbreastcancer.oncoimmunology7,e1490854[0403]24.brown,s.d.,warren,r.l.,gibb,e.a.,martin,s.d.,spinelli,j.j.,nelson,b.h.,andholt,r.a.(2014)neo-antigenspredictedbytumorgenomemeta-analysiscorrelatewithincreasedpatientsurvival.genomeresearch24,743-750[0404]25.schrock,a.b.,ouyang,c.,sandhu,j.,sokol,e.,jin,d.,ross,j.s.,miller,v.a.,lim,d.,amanam,i.,chao,j.,catenacci,d.,cho,m.,braiteh,f.,klempner,s.j.,ali,s.m.,andfakih,m.(2019)tumormutationalburdenispredictiveofresponsetoimmunecheckpointinhibitorsinmsi-highmetastaticcolorectalcancer.annalsofoncology:officialjournaloftheeuropeansocietyformedicaloncology[0405]26.dudley,j.c.,lin,m.t.,le,d.t.,andeshleman,j.r.(2016)microsatelliteinstabilityasabiomarkerforpd-1blockade.clinicalcancerresearch:anofficialjournaloftheamericanassociationforcancerresearch22,813-820[0406]27.le,d.t.,uram,j.n.,wang,h.,bartlett,b.r.,kemberling,h.,eyring,a.d.,skora,a.d.,luber,b.s.,azad,n.s.,laheru,d.,biedrzycki,b.,donehower,r.c.,zaheer,a.,fisher,g.a.,crocenzi,t.s.,lee,j.j.,duffy,s.m.,goldberg,r.m.,delachapelle,a.,koshiji,m.,bhaijee,f.,huebner,t.,hruban,r.h.,wood,l.d.,cuka,n.,pardoll,d.m.,papadopoulos,n.,kinzler,k.w.,zhou,s.,cornish,t.c.,taube,j.m.,anders,r.a.,eshleman,j.r.,vogelstein,b.,anddiaz,l.a.,jr.(2015)pd-1blockadeintumorswithmismatch-repairdeficiency.thenewenglandjournalofmedicine372,2509-2520[0407]28.li,j.,byrne,k.t.,yan,f.,yamazoe,t.,chen,z.,baslan,t.,richman,l.p.,lin,j.h.,sun,y.h.,rech,a.j.,balli,d.,hay,c.a.,sela,y.,merrell,a.j.,liudahl,s.m.,gordon,n.,norgard,r.j.,yuan,s.,yu,s.,chao,t.,ye,s.,eisinger-mathason,t.s.k.,faryabi,r.b.,tobias,j.w.,lowe,s.w.,coussens,l.m.,wherry,e.j.,vonderheide,r.h.,andstanger,b.z.(2018)tumorcell-intrinsicfactorsunderlieheterogeneityofimmunecellinfiltrationandresponsetoimmunotherapy.immunity49,178-193.e177[0408]29.rybinski,b.,andyun,k.(2016)addressingintra-tumoralheterogeneityandtherapyresistance.oncotarget7,72322-72342[0409]30.therasse,p.,etal.,newguidelinestoevaluatetheresponsetotreatmentinsolidtumors.jnci:journalofthenationalcancerinstitute,2000.92(3):p.205-216.[0410]31.tovoli,f.,etal.,radiologiccriteriaofresponsetosystemictreatmentsforhepatocellularcarcinoma.hepatoncol,2017.4(4):p.129-137.[0411]32.o,j.h.,m.a.lodge,andr.l.wahl,practicalpercist:asimplifiedguidetopetresponsecriteriainsolidtumors1.0.radiology,2016.280(2):p.576-84.[0412]33.kim,j.anda.hurria,determiningchemotherapytoleranceinolderpatientswithcancer.jnatlcomprcancnetw,2013.11(12):p.1494-502.[0413]34.péus,d.,n.newcomb,ands.hofer,appraisalofthekarnofskyperformancestatusandproposalofasimplealgorithmicsystemforitsevaluation.bmcmedinformdecismak,2013.13:p.72.[0414]35.staneva,r.,etal.,cancercellsinthetumorcoreexhibitspatiallycoordinatedmigrationpatterns.jcellsci,2019.132(6).[0415]36.vignjevic,d.,etal.,fascin,anoveltargetofbeta-catenin-tcfsignaling,isexpressedattheinvasivefrontofhumancoloncancer.cancerres,2007.67(14):p.6844-53.当前第1页12当前第1页12