技术特征：
1.一种鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的鱼皮源非变性胶原的制备方法如下：1)将鱼皮剪碎置于含有菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶的冰水中处理，处理结束后用冰水进行冲洗；2)接着将处理后的鱼皮放入到含nacl的臭氧冰水中进行超声处理，超声处理后再加入表面活性剂进行间歇超声处理；超声处理后的鱼皮进行漂洗，再加入h2o2进行处理；3)将步骤2)处理的鱼皮加入到含edta的naoh溶液中，在100-200w功率下间歇超声处理，超声处理后的鱼皮用预冷的去离子水反复清洗至中性；超声处理步骤及清洗步骤控制温度0-4℃；4)将步骤3)处理按鱼皮质量加入0.5mol/l的醋酸溶液中进行匀浆，同时加入胃蛋白酶至终浓度1.0-5.0g/l进行处理；处理期间使用超声进行处理；控制温度0-4℃；5)将步骤4)制备的提取液进行离心，收集上清液调节ph为6.8-7.2，并加入nacl进行盐析，收集盐析出的蛋白，将沉淀出的蛋白复溶于0.5m的醋酸，先用0.1m的醋酸透析，再用去离子水透析，透析液干燥获得本发明制备的高纯度鱼皮源医用级非变性胶原。2.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的鱼皮为鳕鱼或罗非鱼皮。3.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的2)中nacl在臭氧冰水中的添加浓度为0.9-1.0％；所述的臭氧冰水，其中臭氧浓度为5-8mg/l。4.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的2)中表面活性剂的添加浓度为0.5％-1.0％。5.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的3)中含edta的naoh溶液，是含20mmol edta的0.1mol/l naoh溶液。6.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的4)中鱼皮与醋酸溶液的质量体积比g/ml为1：20-60。7.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的4)中胃蛋白酶后处理时间为12-48h。8.如权利要求1所述的鱼皮源非变性胶原，其特征在于，所述的5)中nacl加入的终浓度为0.9-1.5m。9.权利要求1-8任一项所述的鱼皮源非变性胶在制备医用材料中的应用。10.一种医用材料，其特征在于，所述的医用材料是使用权利要求1-8任一项所述的鱼皮源非变性胶制备的。
技术总结
本发明提供了一种鱼皮源医用级非变性胶原及其制备方法，所提供的高纯度鱼皮源医用级非变性胶原在医疗领域具有广泛的应用前景。本发明的制备方法可以有效除去鱼皮上的色素、细菌、残余核酸、残留的细胞与细胞表面的抗原、潜在的病毒、内毒素、非胶原蛋白等，从原料上减少了胶原免疫原的产生。本发明的方法缩短了胶原提取时间，增加了胶原提取率，有效去除了胶原C、N末端肽；缩短了纯化时间，显著提高了胶原纯度，根据SDS-PAGE电泳分析胶原纯度大于99％，色泽洁白，DNA残留量小于2μg/L。DNA残留量小于2μg/L。DNA残留量小于2μg/L。
技术研发人员：侯虎 樊燕 马盼盼
受保护的技术使用者：中国海洋大学
技术研发日：2021.04.21
技术公布日：2022/2/28