技术特征：
1.一种家猪家系划分及亲子鉴定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括14个ssr位点，所述ssr位点分别为位于第1条染色体的s0155微卫星座、位于第2条染色体的sw240微卫星座、位于第3条染色体的sw72微卫星座、位于第4条染色体的s0227微卫星座；位于第5条染色体的sw963微卫星座；位于第6条染色体的sw122微卫星座；位于第7条染色体的s0101微卫星座；位于第8条染色体的s0225微卫星座；位于第11条染色体的s0386微卫星座；位于第12条染色体的s0090微卫星座；位于第15条染色体的s0355微卫星座；位于第16条染色体上的s0026微卫星座；位于第17条染色体上的sw24微卫星座；位于性染色体上的sw2156微卫星座。2.权利要求1所述的鉴定试剂盒，其特征在于，所述14个ssr位点pcr扩增所需的引物如下所述：s0155微卫星座正向引物序列如seq id no.1所示，反向引物序列如seq id no.2所示；sw240微卫星座正向引物序列如seq id no.3所示，反向引物序列如seq id no.4所示；sw72微卫星座正向引物序列如seq id no.5所示，反向引物序列如seq id no.6所示；s0227微卫星座正向引物序列如seq id no.7所示，反向引物序列如seq id no.8所示；sw963微卫星座正向引物序列如seq id no.9所示，反向引物序列如seq id no.10所示；sw122微卫星座正向引物序列如seq id no.11所示，反向引物序列如seq id no.12所示；s0101微卫星座正向引物序列如seq id no.13所示，反向引物序列如seq id no.14所示；s0225微卫星座正向引物序列如seq id no.15所示，反向引物序列如seq id no.16所示；s0386微卫星座正向引物序列如seq id no.17所示，反向引物序列seq id no.18所示；s0090微卫星座正向引物序列如seq id no.19所示，反向引物序列如seq id no.20所示；s0355微卫星座正向引物序列如seq id no.21所示，反向引物序列如seq id no.22所示；s0026微卫星座正向引物序列如seq id no.23所示，反向引物序列如seq id no.24所示；sw24微卫星座正向引物序列如seq id no.25，反向引物序列如seq id no.26所示；sw2156微卫星座正向引物序列如seq id no.27所示，反向引物序列如seq id no.28所示。3.权利要求2所述的鉴定试剂盒，其特征在于：位点s0155、sw963、s0386荧光标记为5`
‑
fam，位点sw240、sw72、sw122、sw24、s0026荧光标记为5`
‑
hex，位点s0227、s0101、s0090、s0355荧光标记为5`tamra；位点s0155、sw240、sw72、s0227、sw963、s0101、s0225、s0386、s0090、s0355、sw24的pcr退火温度为55℃，位点sw122的pcr退火温度为58.5℃，位点sw2156退火温度为60℃。4.权利要求3所述的鉴定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒为25μl反应体系，包括1μl上游引物，1μl下游引物，1μl mix dntr，2.5μl包括mgcl2taq buffer，0.5μl taq酶，19μl ddh2o。5.权利要求4所述的鉴定试剂盒，其特征在于：所述14个ssr位点可应用于安庆六白猪群体家系划分及亲子鉴定。6.一种家猪家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于：以权利要求3所述试剂盒中ssr引物序列进行pcr从而进行家系划分及亲子鉴定。7.权利要求6所述的家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于，具体步骤如下所述：(1)样品采集；(2)dna提取：采用北京艾德莱生物科技公司组织基因组dna快速提取试剂盒进行猪dna提取；(3)ssr引物序列合成；(4)pcr扩增；(5)pcr产物毛细管电泳检测；(6)数据处理及结果分析。
8.权利要求7所述的家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于：步骤(6)数据处理及结果分析具体步骤为：使用popgene3.2软件对微卫星位点多态性进行等位基因数目、有效等位基因数、观测纯和度、期望纯和度、观测杂合度、期望杂合度、香农指数、hard
‑
weinberg平衡指标分析；使用pic_cale0.6软件进行多态信息含量计算；利用diploiddate程序对个体间的nei氏遗传距离进行计算并获得，以非加权组平均法(unweighted pair
‑
group method with arithmetic mean，upgma)构建的亲缘聚类图。9.权利要求8所述的家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于：所述家猪为安庆六白猪；所述样品采集位点为猪耳。10.权利要求9所述的家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于：步骤4)pcr过程为：95℃预变性3分钟；30秒94℃变性，30秒60℃退火，30秒72℃延伸，10个循环；30秒94℃变性，30秒55℃退火，30秒72℃延伸，35个循环；8分钟72℃修复延伸。
技术总结
本发明属于家畜分子生物技术领域，提供一种家猪家系划分及亲子鉴定试剂盒及方法，该试剂盒及方法特异性地选择家猪尤其是安庆六白猪14个SSR位点，并合成相应位点引物，通过对98头安庆六白猪的耳组织DNA进行毛细管电泳检测，统计、计算各位点有效等位基因数，杂合度，多态信息含量，遗传距离，排除率，获取家猪尤其是安庆六白猪家系划分，并进行亲子鉴定。14个微卫星位点累积排除概率达99％。本研究所选取的14个微卫星位点在安庆六白猪群体中均具有多态性，可作为有效的遗传标记应用于家猪尤其是安庆六白猪群体家系划分、亲子鉴定等生产实践中。践中。践中。
技术研发人员：丁月云 殷宗俊 张晓东 吴旭东 郑先瑞 曹邦基 陈琼 夏静 凌紫荆 侯银辉 孔诚诚
受保护的技术使用者：安徽农业大学
技术研发日：2021.07.12
技术公布日：2021/9/9