技术特征：
1.一种生产莽草酸的重组菌，其特征在于：所述重组菌敲除了编码莽草酸激酶i的基因arok和编码莽草酸激酶ii的基因arol，并表达了调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控莽草酸生产的靶点基因；所述调控细胞不对称分裂的靶点基因包括编码细胞骨架蛋白popz的基因popz，所述调控莽草酸生产的靶点基因依次为编码3-脱氢奎宁酸合酶的基因arob、编码dahp合成酶的基因arog和编码转酮醇酶的基因tkta。2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌以菌株gl0002为宿主。3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌以petac-popz和pj01-gab为表达载体，其中，所述petac-popz以petac为载体连接了基因popz，所述pj01-gab以pj01为载体依次连接了基因arob、基因arog和基因tkta。4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于，所述表达载体的构建方法为：将含有b0034rbs的基因popz插入至petac载体中得到petac-popz；将含有b0034rbs的基因arob、arog和tkta依次插入至pj01载体中得到pj01-gab。5.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：所述编码细胞骨架蛋白popz的基因popz的核苷酸序列如seq id no.1所示。6.权利要求1-5任一项所述的重组菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将popz片段插入到质粒petac中，得到重组质粒petac-popz；将arob、arog、tkta片段利用质粒pj01依次串联构建重组质粒pj01-gab；将所述重组质粒petac-popz和重组质粒pj01-gab转化入菌株gl0002中构建得到所述重组菌。7.一种生产莽草酸的方法，其特征在于：采用权利要求1-5任一项所述的重组菌发酵生产莽草酸。8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述发酵的条件为35-38℃，480-530rpm，接种量为5-10％，装液量为30-50％，ph为6.0-7.0，菌株发酵初始od
600
为0.04-0.3，通气量为1-2vvm，发酵72-100h。9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述发酵的条件为35-38℃，200-220rpm，菌株发酵初始od
600
为0.04-0.1，发酵70-90h。10.权利要求1-5任一项所述的重组菌在制备莽草酸、含有莽草酸的产品或目的蛋白中的应用。
技术总结
本发明涉及一种生产莽草酸的重组菌，表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控莽草酸生产的靶点基因；调控细胞不对称分裂的靶点基因包括编码细胞骨架蛋白PopZ的基因popZ，调控莽草酸生产的靶点基因包括编码DAHP合成酶的基因aroG，编码3-脱氢奎宁酸合酶的基因aroB和编码转酮醇酶的基因tktA。本发明的重组菌实现了从头合成莽草酸，底物为葡萄糖，价格低廉，且该菌株在7.5L发酵罐发酵后，莽草酸最高产量为88.1g/L，得率为0.33g/g，生产强度为1.1g/L/h。生产强度为1.1g/L/h。生产强度为1.1g/L/h。
技术研发人员：刘立明 丁强 陈修来 高聪 郭亮 胡贵鹏 刘佳
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2021.11.26
技术公布日：2022/2/28