一种嘧啶并五元氮杂环类衍生物的盐、晶型及其制备方法与流程

1.本公开涉及一种嘧啶并五元氮杂环类衍生物的盐型及其制备方法、医药用途，属于制药领域。


背景技术：

2.含src同源2蛋白质酪氨酸磷酸酶2(src homology domain 2containing tyrosine phosphatase-2，shp2)是由ptpn11基因编码的一种进化保守的非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(ptp)，主要由两个sh2结构域(n-sh2、c-sh2)和一个ptp催化域组成，广泛表达于人类各个组织，在维持组织发育和细胞稳态等方面发挥了重要作用。shp2与通过ras-有丝分裂原-活化的蛋白激酶、jak-stat或磷酸肌醇3-激酶akt通路的信号有关。ptpn11基因的突变以及随后shp2的突变已经在多种人类疾病中获得识别，例如努南综合征(noonan syndrome)、豹皮综合征(leopard syndrome)、幼年性骨髓单核细胞白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性骨髓性白血病以及乳腺癌、肺癌和结肠癌(与claim19相同)。因此，对于治疗各种疾病的新疗法的发展而言，shp2代表可具有高吸引力的靶点。
3.已公开的shp2靶点的相关研究的专利申请有wo2018136264a、wo2015003094a、wo2018160731a、wo2018130928a1、wo2018136265a、wo2018172984a、wo2018081091、wo2016203405、wo2017211303a、wo2018013597a等；目前诺华的shp2抑制剂tno155及jacobio的shp2抑制剂jab-3068均在处于i期临床阶段，尚无已上市的该靶点的产品，因此仍需要继续开发更高效的新的shp2抑制剂，以期为患者提供新的有效的抗癌药物。
4.wo2020259679a的专利申请公开了一种式(i)所示化合物，为满足用药需求，对其盐及其晶型进行研究很有必要，
5.

技术实现要素：

6.本公开提供一种式(i)所示化合物的药学上可接受的盐，所述药学上可接受的盐选自草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐或盐酸盐，
[0007][0008]
本公开提供的式(i)所示化合物的药学上可接受的盐，其中式(i)所示化合物与酸分子的物质的量比选自5:1-1:5。
[0009]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物与酸分子的物质的量比为2:1。
[0010]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物与酸分子的物质的量比为1:1。
[0011]
本公开提供一种式(i)所示化合物的草酸盐，其中式(i)所示化合物与草酸分子的物质的量比为2:1。
[0012]
本公开提供一种式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.954、9.590、13.167、18.615、21.602、24.571处有特征峰。
[0013]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.954、9.590、10.111、11.199、12.276、13.167、13.552、18.615、19.441、21.273、21.602、23.867、24.571、25.455、28.691处有特征峰。
[0014]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.954、9.590、10.111、11.199、12.276、13.167、13.552、15.839、18.615、19.441、19.839、20.466、21.273、21.602、22.377、23.867、24.571、25.455、26.872、27.953、28.691、30.272、31.240、31.881、33.149、34.054、35.346处有特征峰。
[0015]
本公开提供一种式(i)所示化合物的草酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0016]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及水混合的步骤。
[0017]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与草酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0018]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与草酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0019]
本公开提供一种式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0020]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及水混合的步骤。
[0021]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与草酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0022]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的草酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与草酸与水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与草酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0023]
本公开提供一种式(i)所示化合物的富马酸盐，其中式(i)所示化合物与富马酸的物质的量比为2:1。
[0024]
本公开提供一种式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.677、10.086、13.134、14.364、19.560、20.439、22.061、26.010处有特征峰。
[0025]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.677、9.856、10.086、11.738、13.134、13.428、14.364、19.107、19.560、20.439、22.061、22.674、23.781、25.133、26.010、28.419处有特征峰。
[0026]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.677、9.856、10.086、11.738、13.134、13.428、14.364、17.229、19.107、19.560、20.439、22.061、22.674、23.781、24.507、25.133、26.010、27.287、28.419、29.074、30.337、32.089、32.891、34.152、39.348处有特征峰。
[0027]
本公开提供一种式(i)所示化合物的富马酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0028]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及水混合的步骤。
[0029]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与富马酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0030]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与富马酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0031]
本公开提供一种式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0032]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及水混合的步骤。
[0033]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与富马酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0034]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的富马酸盐的i晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与富马酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与富马酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0035]
本公开提供一种式(i)所示化合物琥珀酸盐，其中式(i)所示化合物与琥珀酸的物质的量比为2:1。
[0036]
本公开提供一种式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.591、10.115、19.378、21.969、25.788处有特征峰。
[0037]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.591、9.864、10.115、11.744、13.103、14.236、19.016、19.378、20.402、21.712、21.969、22.691、25.023、25.788处有特征峰。
[0038]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.591、7.978、9.864、10.115、11.744、12.534、13.103、13.398、14.236、17.007、17.537、18.261、19.016、19.378、20.402、21.712、21.969、22.691、23.318、23.691、24.339、25.023、25.788、27.004、28.195、28.980、30.861、31.947、
32.520、33.977、39.171、46.718处有特征峰。
[0039]
本公开提供一种式(i)所示化合物的琥珀酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0040]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及水混合的步骤。
[0041]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与琥珀酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0042]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与琥珀酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0043]
本公开提供一种式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0044]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及水混合的步骤。
[0045]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与琥珀酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0046]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的琥珀酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与琥珀酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与琥珀酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0047]
本公开提供一种式(i)所示化合物酒石酸盐，其中式(i)所示化合物与酒石酸的物质的量比为2:1。
[0048]
本公开提供一种式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.467、10.279、13.275、14.585、19.755、21.105、25.970处有特征峰。
[0049]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.467、9.876、10.279、11.754、12.303、13.275、14.585、19.755、20.624、21.105、21.874、22.269、22.693、25.466、25.970处有特征峰。
[0050]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.467、9.876、10.279、10.675、11.754、12.303、13.275、14.585、17.357、18.076、19.755、20.624、21.105、21.874、22.269、22.693、24.164、25.466、25.970、26.777、27.749、29.893、30.524、31.658、33.667处有特征峰。
[0051]
本公开提供一种式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.505、9.791、14.150、20.377、22.248处有特征峰。
[0052]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.505、9.791、10.759、12.071、13.205、14.150、14.822、19.703、20.377、21.119、22.248、25.374、25.983处有特征峰。
[0053]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.505、9.791、10.759、11.253、11.840、12.071、
13.205、14.150、14.822、17.296、18.429、19.703、20.377、21.119、22.248、22.755、23.824、25.374、25.983、27.026、27.810、28.556、29.193、29.917、31.301、40.492处有特征峰。
[0054]
本公开提供一种式(i)所示化合物的酒石酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0055]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤。
[0056]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0057]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0058]
本公开提供一种式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0059]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤。
[0060]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0061]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0062]
本公开提供一种式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0063]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤。
[0064]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0065]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的酒石酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与酒石酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与酒石酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0066]
本公开提供一种式(i)所示化合物硫酸盐，其中式(i)所示化合物与硫酸的物质的量比为2:1。
[0067]
本公开提供一种式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在10.310、20.484、23.647、24.838、26.534处有特征峰。
[0068]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在10.310、20.484、23.647、24.838、26.534、33.821、44.087处有特征峰。
[0069]
本公开提供一种式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.217、7.888、8.586、14.559、25.421处有特征峰。
[0070]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.217、6.811、7.888、8.586、10.985、13.729、14.559、15.769、16.243、21.197、23.812、25.421、27.803、28.109、28.476处有特征峰。
[0071]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.217、6.811、7.888、8.586、10.985、12.359、13.729、14.559、15.769、16.243、16.576、17.986、18.970、21.197、22.604、23.207、23.812、25.421、26.457、27.803、28.109、28.476、38.017处有特征峰。
[0072]
本公开提供一种式(i)所示化合物的硫酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0073]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤。
[0074]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0075]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0076]
本公开提供一种式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0077]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤。
[0078]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0079]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0080]
本公开提供一种式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0081]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤。
[0082]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0083]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的硫酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与硫酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与硫酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0084]
本公开提供一种式(i)所示化合物的马来酸盐，其中式(i)所示化合物与马来酸的物质的量比为2:1。
[0085]
本公开提供一种式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.576、10.021、11.734、19.570、22.658、24.945处有特征峰。
[0086]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.576、10.021、11.734、12.973、14.658、19.116、19.570、20.677、21.952、22.337、22.658、23.439、24.945、26.413处有特征峰。
[0087]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.576、10.021、11.734、12.973、14.658、16.575、18.092、19.116、19.570、20.439、20.677、21.952、22.337、22.658、23.022、23.439、24.267、24.945、25.636、26.413、26.826、28.344、28.945、29.946、30.718、32.727、33.448、34.341、38.952、40.283处有特征峰。
[0088]
本公开提供一种式(i)所示化合物的马来酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0089]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及水混合的步骤。
[0090]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与马来酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0091]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与马来酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0092]
本公开提供一种式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0093]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及水混合的步骤。
[0094]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与马来酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0095]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的马来酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与马来酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与马来酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0096]
本公开提供一种式(i)所示化合物的柠檬酸盐，其中式(i)所示化合物与柠檬酸的物质的量比为2:1。
[0097]
本公开提供一种式(i)所示化合物的柠檬酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.651、9.550、11.761、14.067、20.280、21.929处有特征峰。
[0098]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的柠檬酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.651、9.550、10.470、11.761、14.067、14.460、17.570、20.280、20.880、21.929、23.048、24.975、26.828、27.346处有特征峰。
射线粉末衍射图谱，在10.092、12.831、14.863、18.823、21.331、24.171、26.499处有特征峰。
[0113]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在10.092、12.831、14.863、16.192、16.907、18.823、20.505、21.331、21.901、22.595、24.171、25.591、26.026、26.499、28.286处有特征峰。
[0114]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在10.092、11.723、12.831、14.247、14.863、16.192、16.907、17.890、18.823、19.648、20.505、21.331、21.901、22.595、24.171、25.591、26.026、26.499、27.954、28.286、28.913、30.570、32.760、34.211、35.259、39.906处有特征峰。
[0115]
本公开提供一种式(i)所示化合物的苹果酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0116]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤。
[0117]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0118]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0119]
本公开提供一种式(i)所示化合物的苹果酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0120]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤。
[0121]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0122]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0123]
本公开提供一种式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0124]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤。
[0125]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0126]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的苹果酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与苹果酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与苹果酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选2:1或1:1。
[0127]
本公开提供一种式(i)所示化合物氢溴酸盐，其中式(i)所示化合物与氢溴酸的物质的量比为1:1。
[0128]
本公开提供一种式(i)所示化合物氢溴酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在9.640、12.809、17.986、21.348、23.835、24.443处有特征峰。
[0129]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物氢溴酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.834、9.640、12.809、15.893、17.986、19.723、21.348、21.883、23.835、24.443、25.315、29.799处有特征峰。
[0130]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物氢溴酸盐的a晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.834、9.640、12.239、12.809、13.874、15.893、16.524、17.986、19.723、20.511、21.348、21.883、23.057、23.835、24.443、25.315、26.034、26.716、27.860、29.799、31.901、33.323、35.100、36.034、36.967、38.922、42.122、43.278处有特征峰。
[0131]
本公开提供一种式(i)所示化合物的氢溴酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0132]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及水混合的步骤。
[0133]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与氢溴酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0134]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与氢溴酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0135]
本公开提供一种式(i)所示化合物的氢溴酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0136]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及水混合的步骤。
[0137]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与氢溴酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0138]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的氢溴酸盐的a晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与氢溴酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与氢溴酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0139]
本公开提供一种式(i)所示化合物盐酸盐，其中式(i)所示化合物与盐酸的物质的量比为1:1。
[0140]
本公开提供一种式(i)所示化合物盐酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.750、12.810、17.842、21.635、23.613、24.423、26.392处有特征峰。
[0141]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物盐酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.488、5.750、9.705、12.810、16.591、17.842、21.126、21.635、22.354、23.613、24.423、25.135、26.392、29.613处有特征峰。
[0142]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物盐酸盐的α晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.488、5.750、9.705、12.810、13.901、16.029、16.591、17.842、19.809、20.353、21.126、21.635、22.354、23.613、24.423、25.135、26.392、27.062、27.676、28.009、29.056、29.613、31.866、35.719、41.838、49.861处有特征峰。
[0143]
本公开提供一种式(i)所示化合物盐酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.847、9.802、17.975、21.709、23.706、23.959、29.725处有特征峰。
[0144]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物盐酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.847、9.802、12.917、16.481、17.975、21.195、21.709、23.706、23.959、24.602、25.158、29.725处有特征峰。
[0145]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物盐酸盐的β晶型，以衍射角2θ角度表示的x-射线粉末衍射图谱，在5.847、9.802、12.917、14.174、16.481、17.975、20.369、21.195、21.709、23.706、23.959、24.602、25.158、26.721、27.764、29.725、32.080、32.985、41.982处有特征峰。
[0146]
本公开提供一种式(i)所示化合物的盐酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0147]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤。
[0148]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0149]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0150]
本公开提供一种式(i)所示化合物的盐酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0151]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤。
[0152]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0153]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的α晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0154]
本公开提供一种式(i)所示化合物的盐酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤。
[0155]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤。
[0156]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及成盐溶剂混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质
的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0157]
可选的实施方案中，式(i)所示化合物的盐酸盐的β晶型的制备方法，包括将式(i)所示化合物与盐酸及水混合的步骤，所述式(i)所示化合物与盐酸的投料量的物质的量比选自10:1-1:10，可选5:1-1:5，可选2:1-1:2，可选1:1或1:2。
[0158]
可选的实施方案中，本公开提供的式(i)所示化合物的草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐或盐酸盐的制备方法进一步包括将式(i)所示化合物的草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐或盐酸盐与成盐溶剂分离的步骤。
[0159]
本公开中所述的成盐溶剂选自1)低级醇，所述低级醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇；2)醚类溶剂，所述醚类溶剂选自乙醚、四氢呋喃、二氧六环、环氧丙烷、甲基叔丁基醚、乙二醇单甲醚、乙二醇单乙醚或乙二醇单丁醚；3)酮类溶剂，所述酮类溶剂选自丙酮、甲基丁酮、甲基异丁酮或n-甲基吡咯烷酮；4)酰胺类溶剂，酰胺类溶剂选自n，n-二甲基甲酰胺；5)卤化烃类溶剂，所述卤化烃类溶剂选自氯苯、二氯苯、二氯甲烷、三氯甲烷；6)酯类溶剂，所述酯类溶剂选自醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸丙酯；7)腈类溶剂，所述腈类溶剂选自乙腈或丙腈；8)水。
[0160]
在某些实施方式中，本公开所述的晶型的制备方法还包括过滤、洗涤或干燥步骤。
[0161]
本公开提供一种经由上述制备方法制备得到的式(i)所示化合物的草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐或其对应晶型。
[0162]
可选的实施方案中，本公开中式(i)所示化合物的药学上可接受的盐及其对应晶型，每一个氘原子(d)具有至少20％的丰度。
[0163]
可选的实施方案中，本公开中式(i)所示化合物的药学上可接受的盐及其对应晶型，每一个氘原子(d)具有至少50％的丰度。
[0164]
可选的实施方案中，本公开中式(i)所示化合物的药学上可接受的盐及其对应晶型，每一个氘原子(d)具有至少90％的丰度。
[0165]
可选的实施方案中，本公开中式(i)所示化合物的药学上可接受的盐及其对应晶型，每一个氘原子(d)具有至少98％的丰度。
[0166]
本公开还提供了一种药物组合物，含以下组分：
[0167]
1)式(i)所示化合物的草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐或其对应晶型或其混合物，和
[0168]
2)任选自药学上可接受的赋形剂。
[0169]
本公开还提供了一种药物组合物的制备方法，包括将前述式(i)所示化合物的草酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐或其对应晶型或其混合物和药学上可接受的赋形剂混合的步骤。
[0170]
本公开提供一种由上述制备方法制备得到的组合物。
[0171]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物的药学上可接受的盐或其对应晶型或其混合物或前述组合物，或由前述方法制备得到的组合物在制备治疗与shp2调节有关的疾病或病症的药物中的用途。
[0172]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物药学上可接受的盐或其对应晶型或其混合
物或前述组合物，或由前述方法制备得到的组合物在制备治疗肿瘤或癌症的药物中的用途。
[0173]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物药学上可接受的盐或其对应晶型或其混合物或前述组合物，或由前述方法制备得到的组合物在制备治疗努南综合征、豹皮综合征的药物中的用途。
[0174]
本公开还提供了前述式(i)所示化合物药学上可接受的盐或其对应晶型或其混合物或前述组合物，或由前述方法制备得到的组合物在制备治疗幼年性骨髓单核细胞白血病、神经母细胞瘤、黑素瘤、急性骨髓性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、结肠癌、头癌、胰腺癌、头和颈鳞状细胞癌、胃癌、肝癌、间变性大细胞淋巴瘤和成胶质细胞瘤的药物中的用途。
[0175]
本公开所述的“2θ或2θ角度”是指衍射角，θ为布拉格角，单位为
°
或度；每个特征峰2θ的误差范围为
±
0.20，可以为-0.20、-0.19、-0.18、-0.17、-0.16、-0.15、-0.14、-0.13、-0.12、-0.11、-0.10、-0.09、-0.08、-0.07、-0.06、-0.05、-0.04、-0.03、-0.02、-0.01、0.00、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10、0.11、0.12、0.13、0.14、0.15、0.16、0.17、0.18、0.19、0.20。
[0176]
本公开所述的“结晶析出”包括但不限于搅拌结晶、降温析晶、打浆结晶和挥发结晶。
[0177]
本公开中所述的“差示扫描量热分析或dsc”是指在样品升温或恒温过程中，测量样品与参考物之间的温度差、热流差，以表征所有与热效应有关的物理变化和化学变化，得到样品的相变信息。
[0178]
本公开中所述干燥温度一般为25℃-100℃，优选40℃-70℃，可以常压干燥，也可以减压干燥。
[0179]
除另有说明，当一个位置被特别地指定为氘(d)时，该位置应理解为具有大于氘的天然丰度(其为0.015％)至少1000倍的丰度的氘(即，至少10％的氘掺入)。示例中化合物的具有大于氘的天然丰度可以是至少1000倍的丰度的氘、至少2000倍的丰度的氘、至少3000倍的丰度的氘、至少4000倍的丰度的氘、至少5000倍的丰度的氘、至少6000倍的丰度的氘或更高丰度的氘。
[0180]
本公开中所述的“赋形剂”包括但不限于任何已经被美国食品和药物管理局批准对于人类或家畜动物使用可接受的任何助剂、载体、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增香剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂或乳化剂。
附图说明
[0181]
图1.式(i)所示化合物a晶型的xrpd谱图。
[0182]
图2.式(i)所示化合物草酸盐a晶型xrpd谱图。
[0183]
图3.式(i)所示化合物富马酸盐i晶型xrpd谱图。
[0184]
图4.式(i)所示化合物琥珀酸盐α晶型xrpd谱图。
[0185]
图5.式(i)所示化合物酒石酸盐α晶型xrpd谱图。
[0186]
图6.式(i)所示化合物酒石酸盐β晶型xrpd谱图。
[0187]
图7.式(i)所示化合物硫酸盐α晶型xrpd谱图。
[0188]
图8.式(i)所示化合物硫酸盐β晶型xrpd谱图。
[0189]
图9.式(i)所示化合物马来酸盐a晶型xrpd谱图。
[0190]
图10.式(i)所示化合物柠檬酸盐a晶型xrpd谱图。
[0191]
图11.式(i)所示化合物苹果酸盐α晶型xrpd谱图。
[0192]
图12.式(i)所示化合物苹果酸盐β晶型xrpd谱图。
[0193]
图13.式(i)所示化合物氢溴酸盐a晶型xrpd谱图。
[0194]
图14.式(i)所示化合物盐酸盐α晶型xrpd谱图。
[0195]
图15.式(i)所示化合物盐酸盐β晶型xrpd谱图。
具体实施方式
[0196]
通过以下实施例和实验例进一步详细说明本发明。这些实施例和实验例仅用于说明性目的，而并不用于限制本发明的范围。
[0197]
实验所用仪器的测试条件：
[0198]
化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或/和质谱(ms)来确定的。nmr位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0199]
ms的测定用shimadzu 2010mass spectrometer或agilent 6110a msd质谱仪。
[0200]
hplc的测定使用安捷伦1260dad高压液相色谱仪(sunfire c18 150
×
4.6mm色谱柱)和thermo u3000高压液相色谱仪(gimini c18 150
×
4.6mm色谱柱)。
[0201]
hplc的测定使用shimadzu lc-20a systems、shimadzu lc-2010ht series或安捷伦agilent 1200lc高压液相色谱仪(ultimate xb-c18 3.0*150mm色谱柱或xtimate c18 2.1*30mm色谱柱)。
[0202]
手性hplc分析测定使用chiralpak ic-3 100
×
4.6mm i.d.,3um、chiralpak ad-3 150
×
4.6mm i.d.,3um、chiralpak ad-3 50
×
4.6mm i.d.,3um、chiralpak as-3 150
×
4.6mm i.d.,3um、chiralpak as-3 100
×
4.6mm i.d.,3μm、chiralcel od-3 150
×
4.6mm i.d.,3um、chiralcel od-3 100
×
4.6mm i.d.,3μm、chiralcel oj-h 150
×
4.6mm i.d.,5um、chiralcel oj-3 150
×
4.6mm i.d.,3um色谱柱；
[0203]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，薄层色谱法(tlc)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
[0204]
柱层析一般使用烟台黄海硅胶100～200目、200～300目或300～400目硅胶为载体。
[0205]
手性制备柱使用daicel chiralpak ic(250mm*30mm,10um)或phenomenex-amylose-1(250mm*30mm,5um)。
[0206]
combiflash快速制备仪使用combiflash rf150(teledyne isco)。
[0207]
激酶平均抑制率及ic
50
值的测定用novostar酶标仪(德国bmg公司)。
[0208]
本公开的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自abcr gmbh&co.kg，acros organics，aldrich chemical company，韶远化学科技(accela chembio inc)、达瑞化学品等公司。
[0209]
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
[0210]
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氩气或氮气气球。
[0211]
氢气氛是指反应瓶连接一个约1l容积的氢气气球。
[0212]
加压氢化反应使用parr 3916ekx型氢化仪和清蓝ql-500型氢气发生器或hc2-ss型氢化仪。
[0213]
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
[0214]
微波反应使用cem discover-s 908860型微波反应器。
[0215]
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
[0216]
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
[0217]
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(tlc)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：a：二氯甲烷/甲醇体系，b：正己烷/乙酸乙酯体系，c：石油醚/乙酸乙酯体系，d：石油醚/乙酸乙酯/甲醇，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
[0218]
xrpd为x射线粉末衍射检测：测定使用bruker d8型x射线衍射仪进行，具体采集信息：cu阳极(40kv，40ma)，cu-kα1射线kα2射线kβ射线扫描方式：θ/2θ，扫描范围：3-48
°
。dsc为差示扫描量热：测定采用mettler toledo dsc3+，升温速率10℃/min，25-350℃，氮气吹扫速度50ml/min。
[0219]
tga为热重分析：检测采用mettler toledo tga2，升温速率10℃/min，温度具体范围参照相应图谱，氮气吹扫速度50ml/min。
[0220]
dvs为动态水分吸附：采用surface measurement systems advantage 2，湿度从50％起，考察湿度范围为0％-95％，步进为10％，判断标准为每个梯度质量变化dm/dt小于0.002，tmax小于360min，循环两圈。
[0221]
代谢产物14结构如下：
[0222][0223]
实施例1
[0224]
(s)-1'-(8-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0225]
[0226][0227]
第一步
[0228]
(3-溴吡啶-2-基)甲醇1b
[0229]
将化合物1a(17.2g，79.6mmol)溶于甲醇(50ml)，在0℃下加入硼氢化钠(15.1g，398mmol)。反应体系于室温条件下搅拌12小时。反应结束后加入饱和氯化铵水溶液(600ml)，乙酸乙酯(200ml
×
3)萃取。合并有机相，饱和氯化钠(200ml
×
2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到白色固体化合物1b(9.7g，产率：64.8％)。
[0230]
ms(esi)m/z 187.8[m+h]
+
[0231]1h nmr:(400mhz,meod-d4)δ＝8.52(d,j＝4.8hz,1h),8.01(dd,j＝1.2,8.0hz,1h),7.26(dd,j＝4.4,6.4hz,1h),4.77(s,2h).
[0232]
第二步
[0233]
3-溴-2-(氯甲基)吡啶1c
[0234]
将化合物1b(9.70g，51.6mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，室温下加入二氯亚砜(7.48ml，103mmol)。室温条件下搅拌3小时。反应完成后在0℃下加入饱和碳酸氢钠水溶液(300ml)，二氯甲烷萃取(80ml
×
3)。合并有机相，饱和氯化钠(100ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压浓缩得到粉红油状物化合物1c(10.3g，产率：96.9％)。
[0235]
ms(esi)m/z 207.7[m+h]
+
[0236]1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ＝8.55-8.45(m,1h),8.12-7.99(m,1h),7.37-7.21(m,1h),4.84-4.80(m,2h).
[0237]
第三步
[0238]
1-(叔丁基)4-乙基4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯1e
[0239]
氮气氛下，将化合物1c(9.97g，38.7mmol)溶于四氢呋喃(80ml)中，-78℃条件下逐滴滴加lda(13.5ml,2m四氢呋喃和正己烷溶液)。滴加完毕后在-78℃下搅拌1小时。再在-78℃下逐滴滴加化合物1d(8.8g,35.07mmol)，并继续在-78℃条件下搅拌9小时。反应完成后加入饱和氯化铵水溶液(400ml)，乙酸乙酯萃取(100ml
×
3)，合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤(100ml
×
2)，无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到粗产品，用硅胶色谱法以石油醚、乙酸乙
酯洗脱纯化，得到黄色油状物化合物1e(14.8g，产率：89.4％)。
[0240]
ms(esi)m/z 429.0[m+h]
+
[0241]
第四步
[0242]
4-((3-溴吡啶-2-基)甲基)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸1f
[0243]
将化合物1e(14.8g，34.6mmol)溶于甲醇(3ml)，0℃条件下加入氢氧化钠水溶液(13.8g,346mmol,溶于40ml水)，80℃条件下搅拌12小时。反应完成后将反应液浓缩，再向其中加入乙酸乙酯(300ml)和水(300ml)。加入饱和氢氧化钠水溶液(10ml)调节ph至12，分离水相，并用乙酸乙酯洗涤(80ml
×
2)。向所得水相中加入2n盐酸(25ml)调节ph至3，乙酸乙酯萃取(100ml
×
3)。合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤(150ml)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到白色固体化合物1f(11.4g，产率：82.4％)
[0244]
ms(esi)m/z 344.0[m-56+h]
+
[0245]
第五步
[0246]
叔丁基5-羰基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯1g
[0247]
氮气氛下，在-15℃条件下将氢化钠(60％煤油混合物，1.32g，33.1mmol)加入到化合物1f(11.0g，27.6mmol)的四氢呋喃(100ml)中。在-15℃条件下搅拌1小时。再将反应液冷却到-78℃，逐滴滴加2.5m正丁基锂的正己烷溶液(16.5ml，41.3mmol)，在-78℃条件下搅拌1小时。反应完成后在0℃下加入饱和氯化铵水溶液(400ml)，乙酸乙酯萃取(100ml
×
3)。合并有机相，饱和氯化钠(100ml
×
2)洗涤，无水硫酸钠干燥。真空浓缩得到粗产品，用硅胶色谱法以二氯甲烷、甲醇洗脱纯化，得到白色固体化合物1g(4.60g，产率：55.2％)。ms(esi)m/z 246.9[m-56+h]
+
.
[0248]1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ＝8.82(dd,j＝1.6,4.8hz,1h),8.12(dd,j＝1.6,7.6hz,1h),7.50(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),4.08(td,j＝3.6,13.6hz,2h),3.25(s,2h),3.12(br s,2h),1.88-1.77(m,2h),1.51(br s,2h),1.49(s,9h).
[0249]
第六步
[0250]
叔丁基(s)-5-((s)-叔丁基亚磺酰氨基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-羧酸酯1i
[0251]
氮气氛下，将钛酸四乙酯(9.4ml,44.6mmol)加入到化合物1g(4.50g，14.9mmol)的无水甲苯(80ml)中，室温条件下搅拌10分钟。再将化合物1h(5.4g，44.6mmol)加入反应液中，120℃条件下反应5小时。冷却至0℃并加入硼氢化锂(1.58g，89.2mmol)继续反应30分钟后，升温至室温搅拌1小时。反应完成后在0℃下逐滴滴加甲醇(20ml)。再加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)并搅拌5分钟。硅藻土滤去悬浮物并用乙酸乙酯(300ml)和水(300ml)洗涤。合并有机相，饱和氯化钠(500ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压浓缩得到粗产品，用硅胶色谱法以石油醚、乙酸乙酯洗脱纯化，得到黄色固体化合物1i(4.40g，产率：72.6％)
[0252]
ms(esi)m/z 408.1[m+h]
+
[0253]
第七步
[0254]
(s)-n-((s)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺1j
[0255]
将化合物1i(4.40g，10.8mmol)溶于二氯甲烷(15ml)，0℃条件下加入三氟乙酸(5ml)，0℃条件下搅拌1小时。减压浓缩得到粗产品，加入4m氢氧化钠水溶液至ph＝11。氯仿
和异丙醇(体积比3:1)萃取(30ml
×
3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥。减压浓缩得到黄色油状产物1j(3.32g，产率：100％)。ms(esi)m/z 307.9[m+h]
+
[0256]
第八步
[0257]
(s)-n-((s)-1'-(8-溴咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺1l
[0258]
氮气氛下，将化合物1j(3.30mg，10.7mmol)和化合物1k(2.50g，10.7mmol)溶于二甲基亚砜(40ml)，加入二异丙基乙基胺(7.7g，59.8mmol)，90℃条件下搅拌2小时。加入乙酸乙酯(50ml)和水(100ml)，乙酸乙酯萃取(50ml
×
2)，合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
3)，无水硫酸钠干燥。减压浓缩得到粗产物，用硅胶色谱法以二氯甲烷、甲醇洗脱纯化得到化合物1l(2.96g，产率：54.6％)
[0259]
ms(esi)m/z 503.1[m+h]
+
[0260]1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ＝8.41(d,j＝4.8hz,1h),7.97(s,1h),7.92(d,j＝1.5hz,1h),7.81(d,j＝7.5hz,1h),7.66(d,j＝1.5hz,1h),7.32(dd,j＝5.0,7.5hz,1h),4.61(br s,2h),3.95-3.83(m,2h),3.30-3.21(m,2h),2.99(d,j＝16.6hz,1h),2.40(dt,j＝4.0,12.7hz,1h),2.14(dt,j＝3.6,12.4hz,1h),1.82(br d,j＝13.3hz,1h),1.54(br d,j＝12.3hz,1h),1.36(s,9h).
[0261]
第九步
[0262]
(s)-n-((s)-1'-(8-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺1n
[0263]
氮气氛下，将化合物1l(70mg，0.14mmol)和化合物1m(33mg，0.21mmol，采用专利申请“wo2015107495 a1”公开的方法制备而得)溶于1,4-二氧六环(1ml)，室温条件下加入二异丙基乙胺(54mg，0.42mmol)。加入三(二亚苄基丙酮)二钯(13mg，0.014mmol)和2-二环己基膦-2’,6
’‑
二甲氧基联苯(14mg，0.028mmol)，110℃条件下加热搅拌12小时。反应完成后将反应液过滤，所得滤液浓缩，残余物用c-18反相色谱法以水、甲醇洗脱纯化得到棕色油状化合物1n(45mg，产率：55.1％)。
[0264]
ms(esi)m/z 583.1[m+h]
+
[0265]
第十步
[0266]
(s)-1'-(8-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺1
[0267]
将化合物1n(25mg，0.035mmol)溶于1，4-二氧六环中，0℃条件下加入氯化氢的1，4-二氧六环溶液(0.2ml，4n)，2-7℃下反应1小时。反应完成后加入水(30ml)，乙酸乙酯萃取(15ml
×
2)。合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤(20ml)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后残余物用c-18反相色谱法纯化得到化合物1(3.9mg，产率：19.0％)。
[0268]
ms(esi)m/z 479.1[m+h]
+
[0269]1h nmr:(400mhz,meod-d4)δ＝8.38(d,j＝4.8hz,1h),8.06(s,1h),7.90-7.84(m,2h),7.57(s,1h),7.50(d,j＝5.2hz,1h),7.30(dd,j＝5.6,7.6hz,1h),5.90(d,j＝6.0hz,1h),4.16(s,1h),4.06(br d,j＝13.6hz,2h),3.48-3.36(m,2h),3.30-3.24(m,1h),3.01(br d,j＝16.4hz,1h),2.20-2.01(m,2h),1.80-1.71(m,1h),1.61-1.53(m,1h).
[0270]
实施例2
[0271]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0272][0273][0274]
第一步
[0275]
(s)-n-((s)-1'-(8-溴-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺2b
[0276]
将化合物1j(260mg，0.85mmol)和化合物2a(271mg,1.10mmol)溶于二甲基亚砜(3ml)，加入二异丙基乙基胺(547mg，4.23mmol)，90℃条件下搅拌1小时。向反应液中加入水(30ml)，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3).合并有机相，再用饱和氯化钠溶液洗涤(50ml
×
2)，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液通过减压浓缩得到粗产物，用硅胶色谱法以甲醇、二氯甲烷洗脱纯化得到化合物2b(370mg，产率：84.5％)
[0277]
ms(esi)m/z 518.8[m+h]
+
[0278]
1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ＝8.39(d,j＝4.8hz,1h),7.82(d,j＝1.2hz,1h),7.79(d,j＝8.0hz,1h),7.55(d,j＝1.6hz,1h),7.30(dd,j＝4.8hz,7.6hz,1h),3.90-3.81(m,2h),3.37-3.32(m,1h),3.29-3.17(m,3h),3.00-2.92(m,1h),2.57(s,3h),2.37(td,j＝4.4hz,12.8hz,1h),2.13(td,j＝4.4hz,13.2hz,1h),1.83-1.75(m,1h),1.56-1.49(m,1h),1.34(s,9h).
[0279]
第二步
[0280]
(s)-n-((s)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺2d
[0281]
将化合物2b(50mg，0.10mmol)，化合物2c(77mg，0.39mmol)和磷酸钾(41mg,0.19mmol)溶于1,4-二氧六环(1ml)中，在搅拌的情况下，氮气置换三次。氮气气氛下，快速的加入1,10-菲罗啉(3.5mg,0.02mmol)和碘化亚铜(1.8mg,0.01mmol),再氮气置换三次，并
在130℃条件下加热搅拌10小时。向反应液加入水(50ml)并用乙酸乙酯萃取(40ml
×
3)，合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤(70ml
×
2)，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液通过减压浓缩得到粗产物，用硅胶板层析分离技术，用二氯甲烷、甲醇层析纯化得到化合物2d(36mg，产率：58.5％)。
[0282]
ms(esi)m/z 611.1[m+h]
+
[0283]
第三步
[0284]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-(甲基氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺2
[0285]
将化合物2d(36mg，0.059mmol)溶于干燥的二氧六环(1ml)，10℃条件下滴加氯化氢的1，4-二氧六环溶液(1ml，4n)，10℃反应15分钟。向悬浊的反应液中加入水(30ml)，并用乙酸乙酯萃取(30
×
3)。将水相用饱和碳酸氢钠水溶液调节ph＝8，再用氯仿萃取(40ml
ꢀ×
4)。将所有有机相合并，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液进行减压浓缩得到粗产物。粗产物通过高效液相色谱法制备纯化并冻干得到化合物2(2.3mg，产率：7.7％)。
[0286]
ms(esi)m/z 507.3[m+h]
+
[0287]
1h nmr(400mhz,methanol-d4)δ＝8.35(d,j＝4.4hz,1h),7.85(d,j＝7.6hz,1h),7.76(d,j＝1.6hz,1h),7.58(d,j＝5.6hz,1h),7.48(d,j＝1.6hz,1h),7.29(dd,j＝5.2hz,7.6hz,1h),5.75(d,j＝6.0hz,1h),4.12-4.00(m,3h),3.46-3.34(m,2h),3.29-3.23(m,1h),3.01-2.92(m,4h),2.55(s,3h),2.17-2.01(m,2h),1.74(d,j＝13.6hz,1h),1.53(d,j＝13.6hz,1h).
[0288]
实施例3
[0289]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d3)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0290][0291]
2-((甲基-d3)氨基)-3-氯吡啶-4-硫醇钠
[0292][0293][0294]
第一步
[0295]
3-氯-4-碘-n-(甲基-d3)吡啶-2-胺3b
[0296]
将化合物3a(3.0g，12mmol)和甲基-d
3-胺盐酸盐(1.2g,16mmol)溶于dmso(50ml)，加入diea(5.8ml,35mmol)。70℃下反应12小时。反应结束后加入冰水混合物(50ml)，过滤，冰水洗涤(50ml
×
3)。所得固体减压干燥得到化合物3b(2.8g，产率：83％)。
[0297]
ms(esi)m/z 272.0[m+h]
+
[0298]1h nmr:(400mhz,cdcl3)δ＝7.67(d,j＝5.2hz,1h),7.02(d,j＝5.2hz,1h),5.14(br s,1h)。
[0299]
第二步
[0300]
3-((3-氯-2-((甲基-d3)氨基)吡啶-4-基)硫基)丙酸乙酯3d
[0301]
将化合物3b(2.7g，10mmol)溶于二氯甲烷(30ml)，加入3-硫基丙酸乙酯3c(2.0g，15mmol)，三(二亚苄基丙酮)(0.46g，0.50mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.58g，0.99mmol)和n,n-二异丙基乙基胺(4.9ml,30mmol)。氮气氛下100℃条件下反应3小时。反应完成后过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶色谱法以乙酸乙酯、石油醚洗脱纯化得到化合物3d(2.5g，产率：90％)。
[0302]
ms(esi)m/z 278.1[m+h]
+
[0303]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝7.96(d,j＝5.6hz,1h),6.45(d,j＝5.6hz,1h),5.00(br s,1h),4.19(q,j＝7.2hz,2h),3.23(t,j＝7.6hz,2h),2.72(t,j＝7.6hz,2h),1.28(t,j＝7.2hz,3h)。
[0304]
第三步
[0305]
2-((甲基-d3)氨基)-3-氯吡啶-4-硫醇钠中间体3e
[0306]
将化合物3d(2.4g，8.6mmol)溶于四氢呋喃(25ml)中，0℃条件下加入乙醇钠乙醇溶液(3.5g,10mmol,20％w/w,)，0℃下反应1小时。反应完成后，将反应液浓缩，加入50:1甲基叔丁基醚和二氯甲烷的混合溶液(20ml)，过滤，50:1甲基叔丁基醚和二氯甲烷洗涤(10ml
×
3)。所得固体真减压干燥得到中间体3e(2.0g，产率：99％)。
[0307]
ms(esi)m/z 178.0[m+h]
+
[0308]1h nmr(400mhz,dmso_d6)δ＝7.12(d,j＝5.6hz,1h),6.43(d,j＝5.2hz,1h),5.29(s,1h)。
[0309]
第四步
[0310]
(s)-n-((s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d3)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺3f
[0311]
氮气氛下，将化合物2b(200mg，0.39mmol)中间体3e(156mg，0.77mmol)溶于1,4-二氧六环(5ml)，加入碘化亚铜(74mg，0.39mmol)，n,n'-二甲基乙二胺(34mg，0.39mmol)和磷酸钾(246mg，1.2mmol)，130℃氮气氛下加热反应15小时。反应完成后加入氨水(30ml)和乙酸乙酯(15ml)，水相以乙酸乙酯萃取(25ml
×
3)，合并所有有机相，饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得残余物用硅胶色谱法以二氯甲烷、甲醇洗脱纯化得到化合物3f(130mg，产率：55％)。
[0312]
ms(esi)m/z 614.3[m+h]
+
[0313]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.47(d,j＝4.4hz,1h),7.68(d,j＝5.6hz,1h),7.64(d,
j＝7.2hz,1h),7.48(dd,j＝1.2,9.2hz,2h),7.17(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),5.73(d,j＝5.6hz,1h),5.28(s,1h),5.03(s,1h),4.64(d,j＝10.0hz,1h),4.05-3.93(m,2h),3.73(d,j＝10.0hz,1h),3.33-3.16(m,3h),2.94(d,j＝16.4hz,1h),2.54(s,3h),2.52-2.44(m,1h),2.13(dt,j＝4.0,12.4hz,1h),1.82-1.74(m,1h),1.52-1.44(m,1h),1.30(s,9h)。
[0314]
第五步
[0315]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d3)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺3
[0316]
将化合物3f(130mg，0.21mmol)溶于干燥的二氯甲烷(4.5ml)，0℃条件下滴加氯化氢的1，4-二氧六环溶液(1.5ml，4n)，20℃下反应1小时。向反应液中加入0.1m氢氧化钠水溶液(30ml)调节ph＝14，再用二氯甲烷萃取(30ml
×
2)。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液进行减压浓缩得到粗产物。粗产物通过反相色谱法以0.1％氨水、乙腈洗脱纯化得到化合物3(65mg，产率：41％)。
[0317]
ms(esi)m/z 510.2[m+h]
+
[0318]1h nmr(400mhz,meod_d4)δ＝8.36(d,j＝4.4hz,1h),7.86(d,j＝7.6hz,1h),7.76(d,j＝1.6hz,1h),7.57(d,j＝5.6hz,1h),7.47(d,j＝1.6hz,1h),7.29(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),5.75(d,j＝6.0hz,1h),4.11(s,1h),4.05(br d,j＝13.6hz,2h),3.45-3.35(m,2h),3.27(d,j＝16.8hz,1h),2.97(d,j＝16.4hz,1h),2.55(s,3h),2.17-2.03(m,2h),1.74(br d,j＝14.0hz,1h),1.53(br d,j＝13.6hz,1h)。
[0319]
实施例4
[0320]
(s)-1'-(8-((2-(二(甲基-d3)氨基)-3-氯吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0321][0322]
2-(二(甲基-d3)氨基)-3-氯吡啶-4-硫醇钠
[0323][0324]
中间体4a的合成步骤参见中间体3e，其中以化合物二甲基-d
6-胺盐酸盐替换甲基-d
3-胺盐酸盐制备获得前述中间体4a。
[0325]
ms(esi)m/z 195.1[m+h]
+
[0326]1h nmr(400mhz,dmso_d6)δ＝7.24(d,j＝5.2hz,1h),6.79(d,j＝5.2hz,1h)。
[0327]
化合物4的合成步骤参见实施例3，其中以中间体4a替换中间体3e制备获得化合物4。
[0328]
ms(esi)m/z 527.2[m+h]
+
[0329]1h nmr(400mhz,meod_d4)δ＝8.36(d,j＝4.4hz,1h),7.86(d,j＝7.6hz,1h),7.77(d,j＝1.6hz,1h),7.72(d,j＝5.2hz,1h),7.47(d,j＝1.6hz,1h),7.29(dd,j＝5.2,7.6hz,1h),6.06(d,j＝5.6hz,1h),4.11(s,1h),4.06(br d,j＝13.6hz,2h),3.44-3.37(m,2h),3.25(s,1h),2.97(d,j＝16.8hz,1h),2.56(s,3h),2.14-2.03(m,2h),1.75(br d,j＝13.2hz,1h),1.54(br d,j＝13.6hz,1h)。
[0330]
实施例5
[0331]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d2)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0332][0333][0334]
第一步
[0335]
n,n-双(4-甲氧基苄基)甲胺-d
2 5b
[0336]
将化合物5a(4.0g，16mmol)溶于甲醇(50ml)，室温下加入氘代甲醛的氘水溶液(3.7g,23mmol,20％w/w)和醋酸(0.93g，16mmol)。再加入氰基硼氢化钠(2.9g，47mmol)，室温下反应15小时。反应完成后，将反应液浓缩，加入2m氢氧化钠溶液调节ph至9～10，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶色谱法以石油醚、乙酸乙酯洗脱纯化得到化合物5b(4.0g，产率：95％)。
[0337]
ms(esi)m/z 274.3[m+h]
+
[0338]1h nmr:(400mhz,cdcl3)δ＝7.28-7.25(m,4h),6.89-6.84(m,4h),3.88-3.74(m,7h),3.45(s,4h)。
7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺5g
[0361]
氮气氛下，将化合物2b(153mg，0.30mmol)中间体5f(188mg，0.59mmol)溶于1,4-二氧六环(5ml)，加入碘化亚铜(56mg，0.30mmol)，n,n'-二甲基乙二胺(52mg，0.59mmol)和磷酸钾(188mg，0.89mmol)，130℃氮气氛下加热反应15小时。反应完成后加入氨水(20ml)和乙酸乙酯(10ml)，水相以乙酸乙酯萃取(20ml
×
3)，合并所有有机相，饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得残余物用硅胶色谱法以二氯甲烷、甲醇洗脱纯化得到化合物5g(190mg，产率：45％)。
[0362]
ms(esi)m/z 733.3[m+h]
+
[0363]
第七步
[0364]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d2)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺5
[0365]
将化合物5g(160mg，0.22mmol)溶于tfa中(3ml)，室温条件下反应4小时。再在0℃下滴加氯化氢的1，4-二氧六环溶液(1ml，4n)，室温反应1小时。向反应液中加入0.1m氢氧化钠水溶液(30ml)调节ph＝14，再用二氯甲烷萃取(30ml
×
2)。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液进行减压浓缩得到粗产物。粗产物通过硅胶色谱法以二氯甲烷、甲醇洗脱纯化得到化合物5(51mg，产率：46％)。
[0366]
ms(esi)m/z 509.2[m+h]
+
[0367]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.45(d,j＝4.4hz,1h),7.71(d,j＝5.2hz,1h),7.67(d,j＝7.2hz,1h),7.56(d,j＝1.2hz,1h),7.44(d,j＝1.6hz,1h),7.18(dd,j＝5.2,7.6hz,1h),5.78(d,j＝5.6hz,1h),5.03(d,j＝4.4hz,1h),4.11(s,1h),4.04-3.93(m,2h),3.33(q,j＝11.6hz,2h),3.25(d,j＝16.8hz,1h),3.00(br s,1h),2.93(d,j＝16.8hz,1h),2.58(s,3h),2.11(dt,j＝4.0,12.8hz,1h),2.02(dt,j＝4.4,12.4hz,1h),1.81-1.73(m,1h),1.52-1.47(m,1h)。
[0368]
实施例6
[0369]
(s)-1'-(8-((3-氯-2-((甲基-d)氨基)吡啶-4-基)硫代)-7-甲基咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺
[0370]
[0371][0372]
n,n-双(4-甲氧基苄基)甲胺-d 6a
[0373]
将化合物5a(3.0g，12mmol)溶于无水甲醇(30ml)，室温下加入甲醛水溶液(2.6ml,37％w/w)和醋酸(0.67ml,12mmol)。室温下反应2小时，再在0℃下加入硼氘化钠(0.97g，23mmol)，室温下再反应1.5小时。反应完成后，将反应液浓缩，加入水(50ml)，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到化合物6a(3.3g，产率：94％)。
[0374]1h nmr:(400mhz,cdcl3)δ＝7.30-7.25(m,4h),6.91-6.84(m,4h),3.81(s,6h),3.45(s,4h),2.13(s,2h)。
[0375]
第二步
[0376]
(4-甲氧基苄基)(甲基-d)氨基甲酸苄酯6b
[0377]
将化合物6a(3.3g，12mmol)溶于甲苯(30ml)，加入氯甲酸苄酯(4.1ml,29mmol)，氮气氛下120℃反应14小时。反应完成后将反应液减压浓缩，加入乙酸乙酯(50ml)，水(20ml)、饱和食盐水(20ml
×
2)洗涤，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物用硅胶色谱法以石油醚、乙酸乙酯洗脱纯化得到化合物6b(3.8g粗品)。
[0378]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝7.43-7.31(m,5h),7.21(d,j＝7.6hz,1h),7.13(d,j＝7.6hz,1h),6.91-6.82(m,2h),5.20(s,2h),4.45(s,2h),3.82(s,3h),2.86(d,j＝10.8hz,2h)。
[0379]
第三步
[0380]
n-(4-甲氧基苄基)甲烷-d-胺盐酸盐6c
[0381]
将化合物6b(3.8g，12mmol)溶于甲醇(40ml)，加入10％钯碳(1.0g)。氢气氛下40℃反应16小时。过滤，甲醇(80ml)洗涤，滤液减压浓缩干燥得到化合物6c(2g，产率：99％)。
[0382]
ms(esi)m/z 152.9[m+h]
+
[0383]
第四步
[0384]
3-氯-4-碘-n-(4-甲氧基苄基)-n-(甲基-d)吡啶-2-胺6d
[0385]
将化合物6c(2g，12mmol)和化合物3a(2.3g,8.8mmol)溶于dmso(4ml)，加入diea(4.3ml,26mmol)。60℃下反应5小时。反应结束后加入水(50ml)，乙酸乙酯萃取(30ml
×
3)。合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶色谱法以石油醚、乙酸乙酯洗脱纯化得到化合物6d(2.6g，产率：76％)。
[0386]
ms(esi)m/z 390.0[m+h]
+
[0387]1h nmr:(400mhz,cdcl3)δ＝7.76(d,j＝4.8hz,1h),7.35(d,j＝5.2hz,1h),7.32-7.27(m,2h),6.92-6.83(m,2h),4.45(s,2h),3.81(s,3h),2.82(s,2h)。
[0388]
第五步
[0389]
3-((3-氯-2-((4-甲氧基苄基)(甲基-d)氨基)吡啶-4-基)硫基)丙酸乙酯6e
[0390]
将化合物6d(2.6g，6.7mmol)溶于1,4-二氧六环(30ml)，加入3-硫基丙酸乙酯3c(1.3g，10mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(310mg，0.34mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(390mg，0.67mmol)和n,n-二异丙基乙胺(3.3ml,20mmol)。氮气氛下100℃条件下反应6小时。反应完成后过滤，滤液减压浓缩，所得残留物用硅胶色谱法以乙酸乙酯、石油醚洗脱纯化得到化合物6e(2.3g，产率：88％)。
[0391]
ms(esi)m/z 396.1[m+h]
+
[0392]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.07(d,j＝5.2hz,1h),7.34-7.28(m,2h),6.93-6.82(m,2h),6.72(d,j＝5.2hz,1h),4.43(s,2h),4.20(q,j＝7.2hz,2h),3.81(s,3h),3.24(t,j＝7.6hz,2h),2.81(s,2h),2.75(t,j＝7.6hz,2h),1.29(t,j＝6.8hz,3h)。
[0393]
第六步
[0394]
3-氯-2-((4-甲氧基苄基)(甲基-d)氨基)吡啶-4-硫醇钠中间体6f
[0395]
将化合物6e(2.3g，5.9mmol)溶于四氢呋喃(25ml)中，0℃条件下加入乙醇钠乙醇溶液(2.4g,7.1mmol,20％w/w,)，0℃下反应1小时。反应完成后，将反应液浓缩，加入甲基叔丁基醚和二氯甲烷的混合溶液(40ml,v/v＝50/2)，过滤，甲基叔丁基醚洗涤(15ml
×
3)。所得固体真减压干燥得到中间体6f(1.7g，产率：91％)。
[0396]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.29-7.23(m,3h),6.89-6.79(m,3h),4.12(s,2h),3.72(s,3h),3.34(s,2h)。
[0397]
化合物6的合成步骤参见实施例5，其中以中间体6f替换中间体5f制备获得前述化合物6。
[0398]
ms(esi)m/z 508.2[m+h]
+
[0399]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.47(d,j＝4.4hz,1h),7.68(d,j＝5.6hz,1h),7.64(d,j＝7.2hz,1h),7.48(dd,j＝1.2,9.2hz,2h),7.17(dd,j＝4.8,7.6hz,1h),5.73(d,j＝5.6hz,1h),5.28(s,1h),5.03(s,1h),4.64(d,j＝10.0hz,1h),4.05-3.93(m,2h),3.73(d,j＝10.0hz,1h),3.33-3.16(m,3h),2.94(d,j＝16.4hz,1h),2.54(s,3h),2.52-2.44(m,1h),2.13(dt,j＝4.0,12.4hz,1h),1.82-1.74(m,1h),1.52-1.44(m,1h),1.30(s,9h)。
[0400]
生物学评价
[0401]
以下结合测试例进一步描述解释本公开，但这些实施例并非意味着限制本公开的范围。
[0402]
测试例1、本公开化合物对shp2磷酸酶活性检测
[0403]
1、实验材料及仪器
[0404]
仪器名称设备厂家型号恒温恒温振荡器imbmb-1002a微孔板读板仪mdspectramaxm5
[0405]
试剂名称厂商货号shp2金斯瑞n/a激活型多肽金斯瑞n/admsosigmac34557
1m hepesthermofisher156300805m naclthermofisheram9760g2m kclthermofisheram9640g1m dttthermofisherp232510％sdsthermofisheram982230％brij
tm-35thermofisher20150edtasigmaeds-500gdifmupinvitrogentm 6567
[0406]
2、实验步骤
[0407]
将0.2nm重组表达的全长shp2(aa 1-593)，0.5nm带有双磷酸化位点的激活型多肽irs1(sequence:h2n-ln(py)idldly(dpeg8)lst(py)asinfqk-amide)以及一系列浓度的测试化合物(终浓度为1μm，0.3μm，0.1μm，0.03μm，0.01μm，0.003μm，0.001μm，0.0003μm，0.0001μm，0.00003μm)加入磷酸酶反应液(60mm hepes,ph 7.5 0.005％brij-35,75mm nacl,75mm kcl,1mm edta,5mm dtt)中，室温震荡(350rpm)30分钟。再加入终浓度为30μm反应底物difmup室温反应30分钟后，用5μl反应终止液(60mm hepes,ph 7.5，0.2％sds)终止磷酸酶反应。在荧光读板仪md spectramax上读取ex358nm/em455荧光值。
[0408]
化合物的ic
50
值用四参数logit方法计算.下列公式中x代表化合物浓度的对数形式；f(x)代表效应值(该浓度条件下细胞增殖的抑制率):f(x)＝((a-d)/(1+((x/c)^b)))+d。a,b,c和d为四个参数。不同的浓度对应不同的磷酸酶活抑制率，做出一条反曲线，从曲线上算出抑制剂的ic
50
。用primer premier 6.0计算化合物的ic
50
。
[0409]
本公开化合物对shp2体外活性通过以上的试验进行测定，选取有口服活性的shp2抑制剂shp099做为阳性药，该化合物结构公开于文献j.med.chem.2016,59,7773-7782中，具体化合物购买自上海皓元生物医药科技有限公司(medchemexpress.cn)。
[0410]
测得的ic
50
值见表1。
[0411]
表1.化合物对shp2磷酸酶ic
50
[0412]
实施例编号ic
50
(nm)实施例编号ic
50
(nm)shp0997911.722.134.554.864.7
[0413]
测试例2、大鼠肝微粒体体外代谢稳定性实验
[0414]
利用lc/ms/ms测定反应体系中的化合物浓度，以此来计算待测化合物的固有清除率，并评估在大鼠肝微粒体中的体外代谢稳定性。
[0415]
将222.5μl，1.1236mg/ml的大鼠肝微粒体(雄性wistar han品系,购自corning公司，货号452511)混合液和25μl，10mm的nadph加入孵育板中。用涡旋混匀10秒。在37℃水浴中孵育8分钟。将2.5μl，100μm的待测化合物或阳性对照加入孵育板起始反应。在涡旋上混匀12秒后在37℃水浴中继续孵育。分别在0.5、5、10、15、20和30分钟时将20μl孵育体系转移到含有100μl冷终止液的终止板上来终止反应，用涡旋混匀2分钟。将终止板以4000rpm离心20分钟，然后4℃下静置30分钟，再以4000rpm离心20分钟。转移40μl每个化合物上清液至96孔进样板中，加入160μl纯水稀释样品。
[0416]
所得样品由离子色谱图定量，根据待测化合物或阳性对照的峰面积来计算残余率。斜率k使用microsoft excel由剩余率的自然对数值对孵育时间的线性回归测定。
[0417]
体外半衰期(in vitro t1/2)由斜率计算：in vitro t1/2＝-(0.693/k)
[0418]
用以下等式将体外半衰期转化为固有清除率(in vitro clint，μl/min/mg蛋白)：
[0419]
in vitro clint＝(0.693/t1/2)
×
(孵育体积(μl)/蛋白量(mg))
[0420]
测得的大鼠肝微粒体固有清除率值见表2。
[0421]
表2.大鼠肝微粒体固有清除率
[0422][0423][0424]
测试例3、大鼠体内药代动力学实验
[0425]
以大鼠为受试动物，应用lc/ms/ms法测定了大鼠灌胃给予本发明化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
[0426]
试验动物：每组健康6-8周雄性sd大鼠3只
[0427]
药物配制
[0428]
称取一定量药物，加0.5％质量的羟丙甲纤维素、0.1％体积的吐温80和99.4％体积的水配制成1mg/ml的白色悬浊液。
[0429]
给药
[0430]
sd大鼠禁食过夜后灌胃给药，参照物给药剂量为7.5mg/kg，实施例1给药剂量为5mg/kg。
[0431]
操作
[0432]
大鼠灌胃给药本发明化合物，给药后0.25、0.5、1、2、4、8、24小时由颈静脉采血0.2ml，置于含edta-k2的试管中，4℃、4000转/分钟离心5分钟分离血浆，于-75℃保存。
[0433]
测定不同浓度的药物灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量：取给药后各时刻的大鼠血浆50μl，加入内标地塞米松(50ng/ml)的乙腈溶液200μl，涡旋混合30秒，4℃、4700转/分钟离心15分钟，血浆样品取上清液加水稀释三倍，取2.0μl进行lc/ms/ms分析。
[0434]
药代动力学参数结果
[0435]
本发明化合物的大鼠药代动力学参数如下表3。
[0436]
表3.化合物的大鼠药代动力学参数
[0437][0438][0439]
测试例4、食蟹猴体内药代动力学实验
[0440]
以食蟹猴为受试动物，应用lc/ms/ms法测定了食蟹猴灌胃给予本发明化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在食蟹猴体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
[0441]
试验动物：每组健康2-5岁雄性食蟹猴3只；
[0442]
药物配制
[0443]
灌胃给药：称取一定量药物，加0.5％质量的羟丙甲纤维素、0.1％体积的吐温80和99.4％体积的水配制成1mg/ml的白色悬浊液。
[0444]
给药
[0445]
食蟹猴禁食过夜后灌胃给药，给药剂量为5mg/kg。
[0446]
操作
[0447]
食蟹猴灌胃给药本发明化合物，给药后0.25、0.5、1、2、4、8、24小时由外周静脉采血0.2ml，置于含edta-k2的试管中，2～8℃、2000转/分钟离心10分钟分离血浆，于-75℃保存。
[0448]
测定不同浓度的药物灌胃给药后食蟹猴血浆中的待测化合物含量：取给药后各时刻的食蟹猴血浆55μl，加入内标维拉帕米或地塞米松的乙腈溶液200μl，涡旋混合30秒，4℃、3900转/分钟离心15分钟，血浆样品取上清液加水稀释三倍，取15μl进行lc/ms/ms分析。
[0449]
药代动力学参数结果
[0450]
本发明化合物的食蟹猴药代动力学参数如下表4。
[0451]
表4.食蟹猴药代动力学参数
[0452][0453]
测试例5、caco-2渗透性实验
[0454]
通过caco-2细胞模型利用液相色谱串联质谱(lc/ms/ms)测定分析药物的表观渗透系数(p
app
)。
[0455]
在caco-2细胞(购自atcc)密度为7.92
×
105cells/cm2的transwell(购自康宁公司)小室顶端加入210μl含10μm待测化合物的hbss(25mm hepes，ph 7.4，含50μm quinidine,30μm benzbromarone,20μm sulfasalazine)，同时立即取出10μl样品到已加有90μl hbss(25mm hepes，ph 7.4，含50μm quinidine,30μm benzbromarone,20μm sulfasalazine)的96深孔板中作为初始加药端样品，基底端加入800μl hbss(25mm hepes，ph 7.4，含50μm quinidine,30μm benzbromarone,20μm sulfasalazine)。37℃孵育2小时。在45分钟和2小时时间点分别从顶端吸取10μl样品到含有90μl hbss(25mm hepes，ph 7.4，含50μm quinidine,30μm benzbromarone,20μm sulfasalazine)的96孔深孔板中。在45分钟和2小时时间点分别从基底端吸取100μl样品到96孔深孔板中。然后每孔加入3倍体积的预冷内标。1000rmp涡旋10分钟，4000rpm离心20分钟。每孔取出100μl样品，3个样品一起与100μl纯水混合进行lc/ms/ms分析。
[0456]
使用microsoft excel计算数据，峰面积根据色谱图计算。表观渗透系数(papp)的单位是cm/s，用如下公式进行计算：
[0457][0458]cr
为基底端待测化合物浓度(上标“120”或“45”为取样时间，单位：分钟)，cd为顶端待测化合物浓度(上标“120”或“45”为取样时间，单位：分钟)，area为膜表面积(0.33cm2)，时间为总的转运时间(75
×
60秒)。
[0459]
测得的caco-2细胞表观渗透系数值见表5。
[0460]
表5.化合物caco-2细胞表观渗透系数
[0461]
实施例编号papp
(a-b)
(10-6
,cm/s)12.71212.05317.22
[0462]
测试例6、cyp抑制实验
[0463]
使用150个供体混合人肝微粒体(购自corning,货号452117)评估人主要5个cyp亚型(cyp1a2、cyp2c9、cyp2c19、cyp2d6、cyp3a4/5)的代表性底物代谢反应。通过液相色谱串联质谱(lc/ms/ms)测定不同浓度待测化合物对非那西丁(cyp1a2)、双氯芬酸钠(cyp2c9)、s-美芬妥英(cyp2c19)、丁呋洛尔盐酸盐(2d6)、咪达唑仑(cyp3a4/5)代谢反应的影响。
[0464]
将30μm非那西丁、10μm双氯芬酸钠、35μm s-美芬妥英、5μm丁呋洛尔盐酸盐、3μm咪达唑仑、1mm nadph、待测化合物(浓度分别为0.1、0.3、1、3、10、30μmol/l)或阳性化合物或空白对照与混合人肝微粒体(0.2mg/ml)的反应体系200μl(100mmol/l磷酸盐缓冲液，ph 7.4，含体积比分别为0.3％的dmso、0.6％的乙腈、0.1％的甲醇)在37℃孵育5分钟。然后加入200μl含3％甲酸及40nm内标维拉帕米的乙腈溶液，4000rpm离心50分钟。置于冰上冷却20分钟，再4000rpm离心20分钟析出蛋白。取200μl上清液进行lc/ms/ms分析。
[0465]
峰面积根据色谱图计算。残余活性比例(％)用如下公式进行计算：
[0466]
峰面积比例＝代谢产物峰面积/内标峰面积
[0467]
残余活性比例(％)＝待测化合物组的峰面积比例/空白组的峰面积比例cyp半数抑制浓度(ic
50
)通过excel xlfit 5.3.1.3计算得到。
[0468]
测得的cyp半数抑制浓度(ic
50
)数值见表6。
[0469]
表6.化合物对cyp的半数抑制浓度(ic
50
)
[0470][0471]
实施例7、(i)所示化合物a晶型的制备
[0472]
实施例3中第五步采用甲醇-二氯甲烷溶剂体系柱层析，旋蒸，得固体，经x-射线粉末衍射检测，该固体为a晶型，xrpd谱图如图1所示，其特征峰位置如表7所示。
[0473]
表7.a晶型特征峰
[0474]
[0475][0476]
实施例8、式(i)所示化合物草酸盐a晶型的制备
[0477]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与9.0mg草酸，加入1.5ml的水50℃搅拌过夜，抽滤，放于40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其草酸根离子含量为7.05％，式(i)所示化合物与草酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图2所示，其特征峰位置如表8所示，将其定义为a晶型。tga谱图显示，草酸盐a晶型25-60℃之间失重4.05％，60-105℃之间失重2.89％，145-270之间失重5.12％；dsc谱图显示草酸盐a晶型具有两个吸热峰，峰值分别为90.48℃和119.38℃。
[0478]
表8.草酸盐a晶型特征峰
[0479]
[0480][0481]
实施例9、式(i)所示化合物富马酸盐i晶型的制备
[0482]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与6.0mg富马酸，加入1.5ml的水，50℃搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其富马酸根离子含量为8.72％，式(i)所示化合物与富马酸的物质的量比为2:1，经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图3所示，其特征峰位置如表9所示，将其定义为i晶型。tga谱图显示富马酸盐i晶型在25-120℃之间失重4.29％；dsc谱图显示富马酸盐i晶型具有两个吸热峰，吸热峰值分别是91.94℃及147.77℃。
[0483]
表9.富马酸盐i晶型特征峰
[0484][0485]
实施例10、式(i)所示化合物琥珀酸盐α晶型的制备
[0486]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与6.0mg琥珀酸，加入1.5ml的水，50℃搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其琥珀酸根离子含量为9.24％，式(i)所示
化合物与琥珀酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图4所示，其特征峰位置如表10所示，将其定义为α晶型。tga谱图显示琥珀酸盐α晶型在25-120℃之间失重5.31％；dsc谱图显示琥珀酸盐α晶型具有四个吸热峰，峰值分别为111.42℃、119.36℃、127.09℃及203.10℃，具有一个放热峰，峰值为156.88℃。
[0487]
表10.琥珀酸盐α晶型特征峰
[0488][0489]
实施例11、式(i)所示化合物酒石酸盐α晶型的制备
[0490]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与7.5mg酒石酸，加入1.5ml的水，50℃搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h的固体，离子色谱检测其酒石酸根离子含量为11.42％，式(i)所示化合物与酒石酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图5所示，其特征
峰位置如表11所示，将其定义为α晶型。tga谱图显示酒石酸盐α晶型25-130℃之间失重3.40％；dsc谱图显示酒石酸盐α晶型具有三个吸热峰，峰值分别为88.03℃、100.93℃、145.10℃。
[0491]
表11.酒石酸盐α晶型特征峰
[0492][0493]
实施例12、式(i)所示化合物酒石酸盐β晶型的制备
[0494]
式(i)所示化合物酒石酸盐α晶型放置于高温60℃，一个月后测其经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图6所示，其特征峰位置如表12所示，将其定义为β晶型。dsc谱图显示酒石酸盐β晶型具有四个吸热峰，峰值分别为81.09℃、96.14℃、140.49℃、153.48℃。
[0495]
表12.酒石酸盐β晶型特征峰
[0496][0497]
实施例13、式(i)所示化合物硫酸盐α晶型制备
[0498]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型，加入1.5ml的水，加入3.0μl浓硫酸(98％)，常温搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其硫酸根离子含量为7.05％，式(i)所示化合物与硫酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图7所示，其特征峰位置如表13所示，将其定义为α晶型。tga谱图显示硫酸盐α晶型25-160℃之间失重10.11％；dsc谱图显示硫酸盐α晶型具有两个吸热峰，峰值分别是87.36℃、105.69℃。
[0499]
表13.硫酸盐α晶型特征峰
[0500]
[0501][0502]
实施例14、式(i)所示化合物硫酸盐β晶型制备
[0503]
称量150mg式(i)所示化合物a晶型，加入3.0ml的水，加入15.0μl浓硫酸(98％)，常温搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图8所示，其特征峰位置如表14所示，将其定义为β晶型。tga谱图显示硫酸盐β晶型25-100℃之间失重19.22％，160-260℃之间失重2.48％；dsc谱图显示硫酸盐β晶型具有两个吸热峰，分别是101.80℃、221.42℃。
[0504]
表14.硫酸盐β晶型特征峰
[0505][0506]
实施例15、式(i)所示化合物马来酸盐a晶型制备
[0507]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与6.0mg马来酸，加入1.5ml的水50℃搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其马来酸根离子含量为9.29％，式(i)所示化合物与马来酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图9所示，其特征
峰位置如表15所示，将其定义为a晶型。tga谱图显示马来酸盐a晶型25-80℃之间失重2.50％，80-160℃之间失重1.08％；dsc谱图显示马来酸盐a晶型具有三个吸热峰，峰值分别为81.53℃、120.09℃、139.09℃。
[0508]
表15.马来酸盐a晶型特征峰
[0509][0510]
实施例16、式(i)所示化合物柠檬酸盐a晶型制备
[0511]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型与11.0mg柠檬酸，加入1.5ml的水，50℃搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其柠檬酸根离子含量为12.69％，式(i)所示化合物与柠檬酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图10所示，其特征峰位置如表16所示，将其定义为a晶型。tga谱图显示柠檬酸盐a晶型25-60℃之间失重5.76％，60-120℃之间失重1.02％，130-290℃之间失重6.44％。dsc谱图显示柠檬酸盐a
晶型具有三个吸热峰，峰值分别是101.33℃、131.43℃、159.60℃。
[0512]
表16.柠檬酸盐a晶型特征峰
[0513][0514]
实施例17、式(i)所示化合物苹果酸盐α晶型制备
[0515]
称量50mg式(i)所示化合物，加入1.5ml的水，加入7.0mg苹果酸，50℃搅拌过夜，抽滤，用水洗涤，40℃条件下烘干2h得固体。
[0516]
离子色谱检测其苹果酸根离子含量为11.38％，式(i)所示化合物与苹果酸的物质的量比为2:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图11所示，其特征峰位置如表17所示，将其定义为α晶型。tga谱图显示苹果酸盐α晶型在25-140℃之间失重4.24％，dsc谱图显示苹果酸盐α晶型具有三个吸热峰，峰值分别是69.39℃、92.96℃、140.73℃。
[0517]
表17.苹果酸盐α晶型特征峰
[0518][0519]
实施例18、式(i)所示化合物苹果酸盐β晶型制备
[0520]
称量150mg式(i)所示化合物，加入5.0ml的水，加入35.0mg苹果酸，50℃搅拌过夜，抽滤，用水洗涤，40℃条件下烘干4h。经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图12所示，其特征峰位置如表18所示，将其定义为β晶型。tga谱图显示苹果酸盐β晶型在25-150℃之间失重13.11％，dsc谱图显示苹果酸盐β晶型具有两个吸热峰，峰值分别是100.78℃、126.72℃。
[0521]
表18.苹果酸盐β晶型特征峰
[0522][0523]
实施例19、式(i)所示化合物氢溴酸盐a晶型制备
[0524]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型，加入1.5ml的水，加入12.0μl氢溴酸(40％)，常温搅拌过夜，抽滤，40℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其溴离子含量为11.43％，式(i)所示化合物与氢溴酸的物质的量比为1:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图13所示，其特征峰位置如表19所示，将其定义为a晶型。tga谱图显示溴酸盐a晶型25-75℃之间失重4.01％，75-140℃之间失重2.07％；dsc谱图显示溴酸盐a晶型具有三个吸热峰，峰值分别是73.10℃、87.91℃、130.10℃。
[0525]
表19.氢溴酸a晶型特征峰
[0526][0527]
实施例20、式(i)所示化合物盐酸盐α晶型制备
[0528]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型，加入1.5ml的水，加入8.5μl浓盐酸(36.5％)，常温搅拌过夜，抽滤，放于30℃条件下烘干2h得固体，离子色谱检测其氯离子含量为4.61％，式(i)所示化合物与盐酸的物质的量比为1:1；经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图14所示，其特征峰位置如表20所示，将其定义为α晶型。tga谱图显示盐酸盐α晶型25-80℃失重4.75％，80-135℃之间失重3.04％；dsc谱图显示盐酸盐α晶型具有两个吸热峰，峰值分别是88.04℃、136.09℃。
[0529]
表20.盐酸盐α晶型特征峰
[0530][0531]
实施例21、式(i)所示化合物盐酸盐β晶型制备
[0532]
称量50mg式(i)所示化合物a晶型，加入1.5ml的水，加入8.5μl浓盐酸(36.5％)，常温搅拌过夜，抽滤，60℃条件下烘干2h得固体，经x-射线粉末衍射检测，xrpd谱图如图15所示，其特征峰位置如表21所示。tga谱图显示盐酸盐β晶型25-85℃失重7.55％，85-135℃之间失重1.50％；dsc谱图显示盐酸盐β晶型具有两个吸热峰，峰值分别是97.59℃、140.33℃。
[0533]
表21.盐酸盐β晶型特征峰
[0534]
[0535][0536]
实施例22、草酸盐a晶型、富马酸盐i晶型、酒石酸盐α晶型、马来酸盐a晶型、柠檬酸盐a晶型、苹果酸盐β晶型、氢溴酸盐a晶型、盐酸盐α晶型、盐酸盐β晶型的引湿性研究
[0537]
采用surface measurement systems advantage 2，在25℃，湿度从50％起，考察湿度范围为0％-95％，步进为10％，判断标准为每个梯度质量变化dm/dt小于0.002％，tmax小于360min，循环两圈。
[0538]
表22.引湿性研究
[0539][0540]
实施例23、影响因素稳定性研究
[0541]
氢溴酸盐a晶型、柠檬酸盐a晶型、富马酸盐i晶型、马来酸盐a晶型、酒石酸盐α晶型、苹果酸β晶型、琥珀酸盐α晶型、硫酸盐β晶型、盐酸盐β晶型、草酸盐a晶型10种晶型敞口平摊放置，分别考察在光照(4500lux)、高温(40℃、60℃)、高湿(rh 75％、rh 92.5％)条件
下样品的稳定性，取样考察期30天。
[0542]
表23.氢溴酸盐a晶型影响因素稳定性数据
[0543][0544]
表24.柠檬酸盐a晶型影响因素稳定性数据
[0545][0546][0547]
表25.富马酸盐i晶型影响因素稳定性数据
[0548][0549]
表26.马来酸盐a晶型影响因素稳定性数据
[0550][0551][0552]
表27.酒石酸盐α晶型影响因素稳定性数据
[0553][0554]
表28.苹果酸盐β晶型影响因素稳定性数据
[0555][0556]
表29.琥珀酸盐α晶型影响因素稳定性数据
[0557][0558]
表30.硫酸盐β晶型影响因素稳定性数据
[0559][0560]
表31.盐酸盐β晶型影响因素稳定性数据
[0561]
[0562][0563]
表32.草酸盐a晶型影响因素稳定性数据
[0564][0565]
结论：影响因素实验表明：除高温60℃外，氢溴酸盐a晶型、柠檬酸盐a晶型、富马酸盐、马来酸盐i晶型、酒石酸盐α晶型、苹果酸β晶型、琥珀酸盐α晶型、硫酸盐β晶型、盐酸盐β晶型、草酸盐a晶型10种晶型化学性质基本稳定；硫酸盐β晶型在高温条件下容易转化成无定型，盐酸盐β晶型物理稳定性差，酒石酸盐α晶型在高温条件下转晶，其余晶型稳定。
[0566]
实施例24、长期/加速稳定性研究
[0567]
氢溴酸盐a晶型、柠檬酸盐a晶型、富马酸盐i晶型、马来酸盐a晶型、酒石酸盐α晶型、苹果酸β晶型、琥珀酸盐α晶型、硫酸盐β晶型、盐酸盐β晶型、草酸盐a晶型，分别放置25℃，60％rh和40℃，75％rh、5℃、-20℃考察其稳定性。
[0568]
表33.氢溴酸盐a晶型长期加速稳定性数据
[0569][0570]
表34.柠檬酸盐a晶型长期加速稳定性数据
[0571]
[0572][0573]
表35.富马酸盐i晶型长期加速稳定性数据
[0574]
[0575][0576]
表36.马来酸盐a晶型长期加速稳定性数据
[0577][0578]
表37.酒石酸盐α晶型长期加速稳定性数据
[0579]
[0580][0581]
表38.苹果酸盐β晶型长期加速稳定性数据
[0582]
[0583][0584]
表39.琥珀酸盐α晶型长期加速稳定性数据
[0585][0586]
表40.硫酸盐β晶型长期加速稳定性数据
[0587]
[0588][0589]
表41.盐酸盐β晶型长期加速稳定性数据
[0590][0591]
表42.草酸盐a晶型长期加速稳定性数据
[0592]
[0593][0594]
结论：长期加速实验表明：氢溴酸盐a晶型、柠檬酸盐a晶型、富马酸盐i晶型、马来酸盐a晶型、酒石酸盐α晶型、苹果酸β晶型、琥珀酸盐α晶型、硫酸盐β晶型、盐酸盐β晶型、草酸盐a晶型在长期加速条件下化学与物理性质基本稳定。