胚胎培养器皿及其制作工装

1.本实用新型涉及胚胎培养领域，特别涉及一种胚胎培养器皿及其制作工装。


背景技术：

2.随着体外受精和胚胎移植技术的不断成熟，国际伦理标准规定：仅允许人类受精卵在体外存活14天，所以相应科学研究也只能止步于14天。而出生缺陷相关的疾病，如无脑儿、先天性心脏病等的发生，大多与以原肠运动为基础的三胚层分化异常密切相关，发生在受精后14天(day post fertilization,d.p.f.14)之后。所以人类胚胎体外培养技术目前尚不允许用于该阶段发育过程的研究，更不能用于疾病研究。但是小鼠和猴子作为重要的模式动物，一直是发育生物学领域的重要贡献者，尤其是猴子，其基因组与人类仅有0.1％的差异，是研究人类生理和病理状态的理想模式动物之一，国内外有充分的研究表明，模式动物的胚胎发育研究对灵长类动物发育生物学可以提供重要的理论基础。
3.传统的从受精卵养成囊胚的胚胎体外培养体系一般为微滴培养，培养空间大小和培养液用量已经无法适应更长时程的胚胎培养要求，目前借助模式动物进行胚胎长时程培养时，培养容器常用多孔板培养皿，单个孔格可容纳1ml左右的培养液，能满足胚胎长时程发育需求。胚胎培养期间置于专用的培养箱中，当需要换液或显微观察时需要从培养箱中取出进行操作，容易引起染菌、光辐照、温度、ph等培养环境的变动，大大降低了胚胎的成活率。因此，为了保证胚胎发育条件的一致性，提高胚胎养成率，摸索胚胎体外培养的最佳条件，需要开发出配套的可满足长时程培养状态下在线换液和显微观察的胚胎培养器皿。而现在的胚胎培养器皿难以满足在线换液和显微观察的需求，所以需要提供一种更可靠的方案。


技术实现要素：

4.本实用新型所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种胚胎培养器皿及其制作工装。
5.为解决上述技术问题，本实用新型采用的技术方案是：一种胚胎培养器皿，包括进液针和排液针，其特征在于，所述胚胎培养器皿还包括：培养皿、设置在所述培养皿中的栅罩以及盖合在所述培养皿上的皿盖；
6.所述栅罩包括两个沿x方向设置的长片和若干沿y方向设置的隔片，两个长片和若干隔片拼接形成多个沿x方向布置的四侧面围成的可容纳单个胚胎的胚胎室，所述胚胎室的四侧面均开设有栅孔；
7.所述栅罩的上下表面分别与所述皿盖的下表面和培养皿的底面贴合，从而封闭所述胚胎室的上下面。
8.优选的是，相邻的所述胚胎室之间的间隔形成导流空间，所述导流空间位置处的长片上开设有供培养液进出的导流孔。
9.优选的是，所述培养皿和皿盖均呈圆形状，所述皿盖的外周边沿具有向下凸起的
用于盖住所述培养皿的环形壁板。
10.优选的是，所述皿盖的中部向下凸出形成凸起平面，所述皿盖盖合在所述培养皿上后，所述凸起平面能完全覆盖住所述胚胎室的上表面。
11.优选的是，所述凸起平面的四个角处对称设置限位凸起，所述皿盖盖合在所述培养皿上后，所述凸起平面与所述胚胎室的上表面接触，所述限位凸起的内侧与所述胚胎室的x方向的外侧面配合。
12.本实用新型还提供一种如上所述的胚胎培养器皿的制作工装，包括栅罩拼接工装和栅罩定位工装。
13.优选的是，所述栅罩拼接工装包括工装底板、开设在所述工装底板上的操作槽以及沿x方向间隔设置在所述操作槽内的若干定位凸台，所述定位凸台的数量不小于所述栅罩上的胚胎室的数量；
14.所述定位凸台的大小与所述胚胎室的大小匹配，以通过所述定位凸台的四个外壁对所述胚胎室的四侧面进行定位；若干所述定位凸台之间的间隙与若干所述胚胎室之间的间隙匹配，以通过所述定位凸台对若干胚胎室之间的间距进行定位。
15.优选的是，所述操作槽的内侧壁与所述定位凸台之间具有间隙，每个所述定位凸台的底部的四个角点处均对应开设有从所述操作槽向下贯通所述工装底板的排胶孔。
16.优选的是，所述栅罩定位工装包括可配合盖在所述培养皿上的套盘以及设置在所述套盘底面上的若干用于对所述栅罩在所述培养皿上的安装位置进行定位的定位销，所述定位销包括x向定位销单元和y向定位销单元；
17.所述x向定位销单元包括沿x方向设置的两个x定位销，两个x定位销之间的距离与所述栅罩的沿x方向的长度度相等，两个x定位销之间的连线的中心与所述套盘的中心重合；
18.所述y向定位销单元包括至少两个沿x方向间隔设置的y向定位销组，所述y向定位销组包括关于两个x定位销之间的连线对称布置的两个y定位销，y向定位销组中的两个y定位销之间的距离与所述栅罩的沿y方向的宽度相等。
19.优选的是，所述套盘上还开设有点胶孔。
20.本实用新型的有益效果是：
21.1.本实用新型提供的胚胎培养器皿通过栅罩约束胚胎，使得通过进液针和排液针进行培养液在线更换时，胚胎仍能约束在胚胎室内，可实现胚胎长时程培养状态下在线换液和显微观察。
22.2.本实用新型的栅罩采取玻璃材质拼接而成，相比注塑一体成型，成本低廉，便于灭菌和重复利用；
23.3.本实用新型进一步提供的制作工装，能保证培养器皿各部件的装配关系和装配精度，可利于与外部自动化仪器配合，便于显微观察。
附图说明
24.图1为本实用新型的实施例1中的胚胎培养器皿的结构示意图；
25.图2为本实用新型的实施例1中的胚胎培养器皿卸去部分组件后的结构示意图；
26.图3为本实用新型的实施例1中的栅罩的结构示意图；
27.图4为本实用新型的实施例1中的胚胎培养器皿的剖视图；
28.图5为本实用新型的实施例1中的皿盖的底部的结构示意图；
29.图6为本实用新型的实施例1中的皿盖与栅罩配合的结构示意图；
30.图7为本实用新型的实施例2中的栅罩拼接工装的结构示意图；
31.图8为本实用新型的实施例2中的栅罩拼接工装与栅罩配合的结构示意图；
32.图9为本实用新型的实施例2中的栅罩定位工装的结构示意图；
33.图10为本实用新型的实施例2中的栅罩定位工装与栅罩配合的结构示意图；
34.图11为本实用新型的实施例2中的栅罩定位工装与栅罩配合的剖视图。
35.附图标记说明：
36.1—培养皿；2—栅罩；3—皿盖；4—进液针；5—排液针；6—栅罩拼接工装；7—栅罩定位工装；20—长片；21—隔片；22—胚胎室；23—栅孔；24—导流空间；25—导流孔；30—环形壁板；31—凸起平面；32—限位凸起；60—工装底板；61—操作槽；62—定位凸台；63—排胶孔；70—套盘；71—x向定位销单元；72—y向定位销单元；73—点胶孔；700—环形边沿；710—x定位销；720—y向定位销组；721—y定位销。
具体实施方式
37.下面结合实施例对本实用新型做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
38.应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
39.实施例1
40.如图1-6所示，本实施例的一种胚胎培养器皿，包括：进液针4、排液针5、培养皿1、设置在培养皿1中的栅罩2以及盖合在培养皿1上的皿盖3。
41.培养皿1为普通的圆形培养皿。
42.栅罩2包括两个沿x方向设置的长片20和若干沿y方向设置的隔片21，两个长片20和若干隔片21拼接形成多个沿x方向布置的四侧面围成的可容纳单个胚胎的胚胎室22，胚胎室22的四侧面均开设有栅孔23。栅罩2用于将胚胎约束在特定的空间内，每个胚胎室22内部容纳一枚胚胎，栅罩2的上面和底面贯通，栅罩2整体结构的上表面和下表面齐平，且相互平行。在一种优选的实施例中，胚胎室22的横截面为方形，尺寸约为5mm
×
5mm。
43.栅孔23允许胚胎室22内外液体交换，同时能有效阻挡胚胎从胚胎室22内部随液体流出至外部。在一种优选的实施例中，栅孔23缝隙为100～150μm。
44.栅罩2的上下表面分别与皿盖3的下表面和培养皿1的底面贴合，从而封闭胚胎室22的上下面，形成六面封闭的空间。
45.相邻的胚胎室22之间的间隔形成导流空间24，导流空间24位置处的长片20上开设有供培养液进出的导流孔25，培养液可通过导流孔25进出导流空间24，再通过导流空间24两侧的栅孔23进出胚胎室22。在一种优选的实施例中，导流孔25为方孔。
46.培养皿1和皿盖3均呈圆形状，皿盖3的外周边沿具有向下凸起的用于盖住培养皿1的环形壁板30。皿盖3的中部向下凸出形成凸起平面31，皿盖3盖合在培养皿1上后，凸起平面31能完全覆盖住胚胎室22的上表面。在优选的实施例中，凸起平面31的四个角处对称设
置限位凸起32，皿盖3盖合在培养皿1上后，凸起平面31与胚胎室22的上表面接触，限位凸起32的内侧与胚胎室22的x方向的外侧面配合，起限位作用，保证凸起平面31覆盖栅罩2区域。
47.在优选的实施例中，长片20和隔片21均为玻璃材质。皿盖3采用透明玻璃或塑料材质，使得在不打开皿盖3使也可对栅罩2中的胚胎进行观察。
48.进液针4和排液针5均与培养皿1连通，用于输入新的培养液以及排放废液。胚胎通过栅罩2约束，使得通过进液针4和排液针5进行培养液在线更换时，胚胎仍能约束在胚胎室22内，从而可实现长时程培养状态下在线换液和显微观察。
49.实施例2
50.参照图7-11，本实施例提供一种实施例1的胚胎培养器皿的制作工装，该制作工装包括栅罩拼接工装6和栅罩定位工装7。
51.栅罩拼接工装6包括工装底板60、开设在工装底板60上的操作槽61以及沿x方向间隔设置在操作槽61内的若干定位凸台62，定位凸台62的数量不小于栅罩2上的胚胎室22的数量。本实施例中，定位凸台62的数量和胚胎室22的数量均为4个。
52.定位凸台62的大小与胚胎室22的大小匹配，以通过定位凸台62的四个外壁对胚胎室22的四侧面进行定位；若干定位凸台62之间的间隙与若干胚胎室22之间的间隙匹配，以通过定位凸台62对若干胚胎室22之间的间距进行定位。
53.操作槽61的内侧壁与定位凸台62之间具有间隙。栅罩2拼接时，长片20和隔片21分别与凸台的侧面贴合进行定位，操作槽61的内侧壁与定位凸台62之间预留的间隙里可以填充弹性体，如海绵，橡胶等材料，将长片20和隔片21进行约束夹紧，避免其滑脱。定位夹紧后，长片20和隔片21可以通过uv胶进行粘接，借助紫外固化灯加速固化效率，点胶处为胚胎室22外围的t型搭接处。
54.每个定位凸台62的底部的四个角点处均对应开设有从操作槽61向下贯通工装底板60的排胶孔63。涂抹uv胶时，多余胶水下流从该排胶孔63排出，不至于与拼接工装接触粘接无法取出栅罩2。
55.栅罩定位工装7包括可配合盖在培养皿1上的套盘70以及设置在套盘70底面上的若干用于对栅罩2在培养皿1上的安装位置进行定位的定位销，定位销包括x向定位销单元71和y向定位销单元72；
56.x向定位销单元71包括沿x方向设置的两个x定位销710，两个x定位销710之间的距离与栅罩2的沿x方向的长度度相等，两个x定位销710之间的连线的中心与套盘70的中心重合；通过两个x定位销710与栅罩2的长度方向两端面配合，限制使栅罩2在该方向居中；
57.y向定位销单元72包括至少两个沿x方向间隔设置的y向定位销组720，本实施例中为两组y向定位销组720，y向定位销组720包括关于两个x定位销710之间的连线对称布置的两个y定位销721，y向定位销组720中的两个y定位销721之间的距离与栅罩2的沿y方向的宽度相等。两组y向定位销处于栅罩2的两端位置，y定位销721与栅罩2两侧面配合，限制使栅罩2在该方向居中。
58.通过x向定位销单元71和y向定位销单元72可确保栅罩2在培养皿1内的中心位置。
59.套盘70的外周具有环形边沿700，可配合盖在培养皿1上。
60.在优选的实施例中，套盘70上还开设有点胶孔73。点胶孔73为点胶操作空间，方便点胶针头伸入培养皿1内，在栅罩2底部与培养皿1底面搭接处点入胶水。栅罩2在培养皿1上
安装时，套盘70盖合在培养皿1上，栅罩2被约束在x向定位销单元71和y向定位销单元72之间的空间中，从而定位到培养皿1的中心位置，再通过点胶孔73，在栅罩2底部与培养皿1底面搭接处点入胶水，并固定即可。
61.尽管本实用新型的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本实用新型的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本实用新型并不限于特定的细节。