一种尿源性干细胞的培养基、培养方法及其应用与流程

文档序号:29949786发布日期:2022-05-07 17:44阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种干细胞培养基,其特征在于,所述干细胞培养基包含基础培养基、wnt信号通路抑制剂和腺苷酸环化酶激活剂;所述wnt信号通路抑制剂的浓度为0.5~1.5μm,所述腺苷酸环化酶激活剂的浓度为16~20μm。2.根据权利要求1所述的干细胞培养基,其特征在于,所述wnt信号通路抑制剂为小分子化合物iwp-2;所述腺苷酸环化酶激活剂为毛喉素。3.根据权利要求1所述的干细胞培养基,其特征在于,所述基础培养基为dmem培养基。4.根据权利要求3所述的干细胞培养基,其特征在于,所述基础培养基还包括:胎牛血清、乙醇胺、谷胱甘肽、抗坏血酸、胰岛素和转铁蛋白。5.根据权利要求4所述的干细胞培养基,其特征在于,所述的胎牛血清占干细胞培养基体积的5~15%、所述的乙醇胺浓度为1.7~2.1mg/l、所述的谷胱甘肽浓度为0.8~1.2mg/l、所述的抗坏血酸浓度为2.3~2.7mg/l、所述的胰岛素浓度为8~12mg/l、所述的转铁蛋白浓度为7.3~7.7mg/l。6.根据权利要求1~5任一项所述的干细胞培养基,其特征在于,所述干细胞为尿源性干细胞。7.权利要求1~6任一所述的干细胞培养基在如下任一中的应用:1)增加尿源性干细胞传代次数;2)提高尿源性干细胞增殖能力;3)维持尿源性干细胞干性;4)尿源性干细胞培养;5)尿源性干细胞建系;6)制备尿源性干细胞增殖培养基。8.一种尿源性干细胞培养方法,其特征在于,利用权利要求1~6任一项所述的干细胞培养基进行尿源性干细胞培养。9.根据权利要求8所述的培养方法,其特征在于,所述培养方法包括以下步骤:将干细胞接种于权利要求1~6任一项所述的干细胞培养基中进行培养,培养至尿源性干细胞密度为80%~90%汇合时进行传代。10.根据权利要求9所述的培养方法,其特征在于,所述接种密度为(1~1.25)
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105个/cm2。

技术总结
本发明公开了一种尿源性干细胞的培养基、培养方法及其应用,基础培养基、8~12%胎牛血清、1.7~2.1mg/L乙醇胺、0.8~1.2mg/L谷胱甘肽、2.3~2.7mg/L抗坏血酸、8~12mg/L胰岛素、7.3~7.7mg/L转铁蛋白、16~20μM毛喉素、0.8~1.2μM IWP2。本发明通过在基础培养基的基础上复配毛喉素、IWP2等成分,提供了一种配比优良、利于尿源性干细胞的生长、大大提高了尿源性干细胞增殖率以及维持干性的培养基,能让尿源性干细胞扩增,提高可传代次数达到至少15次,而且尿源性干细胞的干性维持,基本没有出现分化,细胞形态好。细胞形态好。


技术研发人员:张家盛 邝源源 郑立新 王恒 邱江
受保护的技术使用者:广州华越肾科再生医学科技有限公司
技术研发日:2022.02.28
技术公布日:2022/5/6
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