技术特征：
1.一种促进蛋白二聚体或环肽形成的方法，包括在肽链的末端引入二聚体拉链扣，所述二聚体拉链扣具有如下特性：1)含有 2～9个荷电氨基酸残基；2)具有1个无电荷的间隔区，所述间隔区的长度为1～5个氨基酸；3)所述间隔区中含有一个半胱氨酸残基；4)所述两段二聚体拉链扣之间可以通过荷电氨基酸的静电作用相互亲和并通过间隔区的半胱氨酸残基形成二硫键。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述间隔区两侧的荷电氨基酸对称排列或非对称排列；和/或所述荷电氨基酸为荷正电的氨基酸或荷负电的氨基酸，所述荷正电的氨基酸选自赖氨酸、精氨酸或组氨酸；所述荷负电的氨基酸选自天冬氨酸或谷氨酸；和/或至少一条肽链的n端和c端分别连接有二聚体拉链扣；和/或所述二聚体拉链扣具有4个荷电氨基酸残基，所述二聚体拉链扣中间具有1个半胱氨酸；和/或至少一条肽链上有标签序列。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：肽链的n端和c端分别连接有二聚体拉链扣；和/或两肽链各带一个标签序列；和/或荷电氨基酸分别为赖氨酸和天冬氨酸。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述标签序列选自flag标签序列和组氨酸序列。5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于：所述二聚体拉链扣具有3～8个荷电氨基酸残基和/或所述间隔区的长度为1～4个氨基酸。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述二聚体拉链扣具有3～7个荷电氨基酸残基和/或所述间隔区的长度为1～3个氨基酸。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述二聚体拉链扣具有4～6个荷电氨基酸残基和/或所述间隔区的长度为1～2个氨基酸。8.一种带有二聚体拉链扣的蛋白或多肽，其特征在于：所述蛋白或多肽的至少一个末端连接有二聚体拉链扣，所述二聚体拉链扣如权利要求1～7任一项所述。9.一种表达载体，其特征在于：其插入有可表达权利要求1～8任一项所述含有二聚体拉链扣的肽链的核酸序列。10.一种制备拉链扣型蛋白二聚体或环肽的方法，包括：构建表达载体：其中，所述表达载体如权利要求9所述；表达：将表达载体转入表达菌株或细胞，表达、分离、纯化得到拉链扣型蛋白二聚体或环肽。
技术总结
本发明属于基因工程领域，涉及一种促进蛋白二聚体形成的拉链扣结构及其应用，该拉链扣可用于同种蛋白的二聚，异种蛋白的二聚，也可用于多肽成环，二聚多肽及多肽的延伸。一些实例可以得到接近天然构象的ESAT6-CFP10二聚体，该二聚体具有更好的可溶性，对记忆性T细胞刺激效果要好于线性融合表达的ESAT6-CFP10蛋白。发明人还发现，二聚体拉链扣可帮助形成更稳定的环型多肽，添加了二聚体扣的CCP多肽可以增加对类风湿关节炎病人血清中瓜氨酸化自身抗体的检出率。身抗体的检出率。身抗体的检出率。
技术研发人员：权利要求书1页说明书10页序列表2页附图7页
受保护的技术使用者：广州市雷德生物科技有限公司
技术研发日：2020.04.26
技术公布日：2022/7/29