一种富含Sn-2位DHA的DHA藻油的生产方法与流程

一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法
技术领域
1.本发明涉及海洋微生物制品技术领域，具体为一种富含sn-2位dha的dha 藻油的生产方法。


背景技术：

2.dha是对人体非常重要的长碳链多不饱和脂肪酸，俗称脑黄金。
3.卫生部2010年3号公告，根据《中华人民共和国食品安全法》和《新资源食品管理办法》的规定，批准以裂壶藻或吾肯氏壶藻或寇氏隐甲藻为菌种，通过发酵、分离、提纯等工艺生产的藻油dha作为新资源食品。
4.dha的来源主要有两种，一是来自于深海鱼油，另一是来自于微藻，广泛应用于婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、调制乳粉、食用油、保健食品、饮料和糖果等。
5.富含sn-2位dha的dha藻油，在营养代谢方面，功能上具有一定差异性，尤其适用于特定的用途，富含sn-2位dha的dha藻油的商业化生产方法，尚未见报道，现有微藻来源的dha藻油，其sn-2位dha占dha总量的比例较低，为此，我们开发一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法。


技术实现要素：

6.鉴于上述，针对一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，提出本发明，旨在解决现有dha藻油生产技术存在的问题。
7.因此，本发明的目的是提供一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，通过利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液，从发酵液提取dha藻油，经过冷冻结晶分离，得到富含sn-2位dha的dha藻油，解决上述提出现有的问题。
8.为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：
9.一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，包括如下操作步骤：
10.s1：利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液；
11.s2：制备目标产物发酵液，发酵液先经离心机脱水；
12.s3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到压榨dha藻油；
13.s4：压榨饼经过亚临界萃取，得到萃取dha藻油；
14.s5：合并压榨与萃取得到的粗dha藻油；
15.s6：粗dha藻油,先经低温酸化脱胶，再经冷冻结晶分离，从而得富含sn-2 位dha的dha藻油。
16.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述s1中的dha藻油来源为裂壶藻。
17.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述s2中发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约120-180小时，制
备目标产物发酵液，发酵温度、时间会显著影响sn-2 位dha的含量。
18.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述s2中发酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到30％以上。
19.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述s5中粗dha藻油，先在较低温度下进行酸化反应以便脱除胶质类物质，经离心机分离，得到半成品dha藻油。
20.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述酸化反应温度25
±
1℃，酸化反应完毕，升温到75～85℃，并送去离心机分离脱除胶质等杂质、水份。
21.作为本发明所述的一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法的一种优选方案，其中：所述s6中冷冻过程温度区间为0～75℃，粗dha藻油先升温至75℃，然后缓慢降温冷却，直到0～3℃之间的某一个显而易见的温度波动点，这个温度点出现大量结晶会造成温度升高，这时应放缓降温速度，直到在这个温度点结晶完毕。
22.与现有技术相比：本发明采用裂殖壶菌，利用菌株筛选以及优化发酵培养基、发酵条件，开发一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液，从发酵液提取dha藻油，经过冷冻结晶分离，得到富含sn-2位dha的dha藻油，sn-2位dha占dha总量的比例达到40％。
具体实施方式
23.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的实施方式作进一步地详细描述。
24.实施例1，本发明提供一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，包括如下操作步骤：
25.s1：利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液，dha 藻油来源为裂壶藻；
26.s2：制备目标产物发酵液，发酵液先经离心机脱水，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约150小时，制备目标产物发酵液，酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到30％；
27.s3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到压榨dha藻油；
28.s4：压榨饼经过亚临界萃取，得到萃取dha藻油；
29.s5：合并压榨与萃取得到的粗dha藻油，先在较低温度下进行酸化反应以便脱除胶质类物质，经离心机分离，得到半成品dha藻油，酸化反应温度25℃，酸化反应完毕升温到85℃；
30.s6：将粗dha藻油先经低温酸化脱胶，再经冷冻结晶分离，从而得富含sn-2 位dha的dha藻油，35℃下冷冻结晶分离的固相为富含蜡质的高熔点dha藻油；从35℃到0℃的降温过程形成结晶，分离固相富含sn-2位dha的dha藻油，分离液相则sn-2位dha含量稍低；
31.粗dha藻油，经检测其sn-2位dha占dha总量的比例达到38.3％，相关产品指标参阅下表：
[0032][0033]
实施例2，本发明提供一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，包括
[0034]
s1：利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液，dha 藻油来源为裂壶藻；
[0035]
s2：制备目标产物发酵液，发酵液先经离心机脱水，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约160小时，制备目标产物发酵液，酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到25％；
[0036]
s3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到压榨dha藻油；
[0037]
s4：压榨饼经过亚临界萃取，得到萃取dha藻油；
[0038]
s5：合并压榨与萃取得到的粗dha藻油，粗dha藻油，先经酸化反应以便脱除胶质类物质，经离心机分离，得到半成品dha藻油；
[0039]
s6：上述s5所得半成品，再经冷冻结晶分离，得富不同熔点的含sn-2位dha 的dha藻油，冷冻度过程温度区间为75～2℃，冷冻时间14小时。
[0040]
粗dha藻油检测sn-2位棕榈酸占总棕榈酸含量达到40.5％，相关产品的指标参阅下表：
[0041][0042]
实施例3，本发明提供一种富含sn-2位dha的dha藻油的生产方法，包括
[0043]
s1：利用筛选的富产sn-2位dha的dha藻油的菌株发酵生产发酵液，dha 藻油来源为裂壶藻；
[0044]
s2：制备目标产物发酵液，发酵液先经离心机脱水，发酵过程在一定压力下进行，并持续通空气，发酵持续时间约180小时，制备目标产物发酵液，酵液先经离心机脱水从而浓缩至细胞干重达到20％；
[0045]
s3：将浓缩发酵液送入喷雾干燥塔进行干燥脱水，然后送入双螺旋榨油机，得到压榨dha藻油；
[0046]
s4：压榨饼经过亚临界萃取，得到萃取dha藻油；
[0047]
s5：合并压榨与萃取得到的粗dha藻油，先进行酸化反应，酸化反应温度75 ℃，经离心机分离脱除胶质类物质以及水份、杂质，得到半成品dha藻油；
[0048]
s6：上述半成品，经冷冻结晶分离，冷冻过程温度区间为75～0℃，从而得富含sn-2位dha的dha藻油，且得到副产品为滤饼，富含蜡质的dha藻油，其中冷冻停留时间12小时，其中冷冻完毕经过滤分离，滤液为富含sn-2位dha 的dha藻油；
[0049]
分离液相富含sn-2位棕榈酸的dha藻油，占49％；分离固相的sn-2位dha 含量更高，占51％；相关指标如下：
[0050][0051]
其中冷冻结晶分离的目的是满足不同下游产品的应用需求，经35℃冷冻结晶分离的固相，因为熔点高、稳定性好，主要应用于饮料(液体、固体)、软糖类产品；0～3℃之间某一个温度点下冷冻结晶分离的液相，sn-2位dha含量稍低，主要应用于软胶囊、凝胶糖果；0～3℃之间某一个温度点下冷冻结晶分离的固相，sn-2位dha含量较高，应用更广泛。
[0052]
本发明人发现：可以通过选择筛选的、可识别的目标菌株，提高粗dha藻油的sn-2位dha的含量，而且采用优化的发酵培养基以及优化的工艺步骤、工艺条件，进行发酵，也可以提高粗dha藻油的sn-2位的dha的含量，从目标发酵液提取粗dha藻油，经过酸化脱胶、离心机分离，再经过冷冻结晶分离，可以进一步富集sn-2位dha，其中高熔点dha藻油的sn-2位的dha占dha总质量比例≥40％。
[0053]
虽然在上文中已经参考实施方式对本发明进行了描述，然而在不脱离本发明的范围的情况下，可以对其进行各种改进并且可以用等效物替换其中的部件。尤其是，只要不存在结构冲突，本发明所披露的实施方式中的各项特征均可通过任意方式相互结合起来使用，在本说明书中未对这些组合的情况进行穷举性的描述仅仅是出于省略篇幅和节约资源的考虑。因此，本发明并不局限于文中公开的特定实施方式，而是包括落入权利要求的范围内的所有技术方案。