一种高特异性的心肌肌钙蛋白I抗体及其制备方法和用途与流程

一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途
技术领域
1.本发明涉及心肌肌钙蛋白i抗体技术领域，具体为一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途。


背景技术：

2.由于心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)具有组织特异性强、宽阔的诊断窗口期、明确的诊断界限、快速的测定方法、血液中出现早等优点，在临床上以得到广泛应用，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)是心肌细胞损伤最敏感和最特异性的血清标志物之一,加之心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)具有诊断阈值明确、窗口期宽以及检测快速等优点，已逐渐判断ami患者心肌细胞损伤的主要生化指标，因此，对一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途的需求日益增长。
3.目前市场上存在的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)来源腹水，存在其它鼠源成分的干扰，产品质量一般，而且批次间差异较大，稳定性差，因此，针对上述问题提出一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途，以解决上述背景技术中提出的问题。
5.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
6.一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途，心肌肌钙蛋白i抗体包括210个氨基酸组成，分子量23.9，等电点9.87，是一种富含α螺旋的蛋白质，有5个螺旋区域，呈伸展式构型，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)为鼠单抗，体外纯化细胞培养上清获得，用于免疫发光和化学发光。
7.优选的，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)小部分(约3％)游离于包浆中，为可溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)大部分以结构蛋白的形式固定在肌原纤维上，为不溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在心肌细胞膜完整的状态下，不能透过细胞膜进入血循环，血液中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)的含量很低，当细胞膜的完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)可迅速透过细胞膜进入血流，而结合的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)则逐渐分解出来，成为游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)。
8.优选的，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＜0.1ng/ml。
9.优选的，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.1-0.5ng/ml。
10.优选的，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.5-25ng/ml。
11.优选的，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＞25ng/ml。
12.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
13.本发明中，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)抗体采用体外纯化细胞培养上清得到，与腹水来源的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)相比，细胞体外培养生产的抗体避免了腹水中其它鼠
源成分的干扰，产品质量更好，同时批次间差异更小，更稳定。
附图说明
14.图1为本发明免疫荧光平台样本符合率(用心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)抗体制备心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)免疫荧光纸条，检测雅培赋值样本30例(浓度范围0.05-45ng/ml)，样本符合率r2》98％)；
15.图2是将心肌肌钙蛋白l稀释成5ng/ml-20ng/ml和0.1ng/ml-2ng/ml两个浓度水平的样本，对每个样品重复测定3次，根据公式b＝(m-t)/tx100％(式中b为相对偏差,m为测量浓度的均值，t为标定浓度)计算相对偏差,相对偏差应不大于15％；
16.图3是用心肌肌钙蛋白l浓度为0.1ng/ml-2ng/ml和5ng/ml-20ng/ml的两个水平的质控品为样本，重复测定各10次,计算测量值的平均值和标准差,按公式cv＝(标准差/平均值)x100％，计算变异系数(cv),结果应不大于15％。
具体实施方式
17.实施例1：本发明提供一种技术方案：
18.一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途，心肌肌钙蛋白i抗体包括210个氨基酸组成，分子量23.9，等电点9.87，是一种富含α螺旋的蛋白质，有5个螺旋区域，呈伸展式构型，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)为鼠单抗，体外纯化细胞培养上清获得，用于免疫发光和化学发光。
19.所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)小部分(约3％)游离于包浆中，为可溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)大部分以结构蛋白的形式固定在肌原纤维上，为不溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在心肌细胞膜完整的状态下，不能透过细胞膜进入血循环，血液中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)的含量很低，当细胞膜的完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)可迅速透过细胞膜进入血流，而结合的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)则逐渐分解出来，成为游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)，可以实际的使用过程中通过血液中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)的含量对疾病进行检测；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＜0.1ng/ml，可以排除心肌损伤的问题；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.1-0.5ng/ml，心肌损伤低风险，需结合多种诊断结果及临床症状综合判断；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.5-25ng/ml，心肌损伤高风险；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＞25ng/ml，严重心肌损伤。
20.心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)为心肌组织特有的一种调节蛋白，可抑制肌球蛋白与肌动蛋白结合，在心肌收缩过程中起重要作用，在急性心肌梗死(acute myocardial infaction,ami)早期心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)水平变化幅度较大,具有较高的敏感性，且心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)不在任何类型的骨骼肌中表达，具有较高的心肌细胞特异性。正常人血清中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)平均浓度《0.06ng/ml，当心肌轻微损伤时其浓度明显升高，可达100-1300ng/ml，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)诊断心肌梗塞的特异性为96％，敏感性为97％，因此，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)是心肌细胞损伤最敏感和最特异性的血清标志物之一,加之心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)具有诊断阈值明确、窗口期宽以及检测快速等优点，已逐渐判断ami患者心肌细胞损伤的主要生化指标。
21.实施例2：本发明提供一种技术方案：
22.一种高特异性的心肌肌钙蛋白i抗体及其制备方法和用途，心肌肌钙蛋白i抗体包括210个氨基酸组成，分子量23.9，等电点9.87，是一种富含α螺旋的蛋白质，有5个螺旋区域，呈伸展式构型，心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)为鼠单抗，体外纯化细胞培养上清获得，用于免疫发光和化学发光。
23.所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)小部分(约3％)游离于包浆中，为可溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)大部分以结构蛋白的形式固定在肌原纤维上，为不溶性，所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在心肌细胞膜完整的状态下，不能透过细胞膜进入血循环，血液中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)的含量很低，当细胞膜的完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)可迅速透过细胞膜进入血流，而结合的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)则逐渐分解出来，成为游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)，可以实际的使用过程中通过血液中心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)的含量对疾病进行检测；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＜0.1ng/ml，恢复较好；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.1-0.5ng/ml，心肌损伤低风险，恢复良好需要复查；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量在0.5-25ng/ml，恢复效果一般；所述心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)在血液中的含量＞25ng/ml，恢复效果十分不理想。
24.静脉注入溶栓药物是近年来常用的急性心肌梗死治疗方法，在治疗后判断是否出现冠状脉血管再灌通，梗塞开通后，血流进入病变部位,将游离的心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)或心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)冲洗入血液而出现第一个峰，此后可观察到第二个较小的峰，检测心肌肌钙蛋白i抗体(ctnl)可以对这类溶栓药物的作用进行判断。
25.本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，由于文字表达的有限性，而客观上存在无限的具体结构，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进、润饰或变化，也可以将上述技术特征以适当的方式进行组合；这些改进润饰、变化或组合，或未经改进将发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均应视为本发明的保护范围。