一种真菌微生物组作为胃癌诊断的标志物的应用的制作方法

文档序号:30952007发布日期:2022-07-30 08:02阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种真菌微生物组作为胃癌诊断的标志物的应用,其特征在于,所述真菌微生物组包含cystobasidium,cutaneotrichosporon,apodus,apiotrichum,simplicillium,lecanactis,rhizopus,rhodotorula,exophiala和sarocladium中的任意一种或几种的组合,其中,真菌微生物为真菌中门水平、属水平以及种水平中的一种或以上。2.权利要求1所述的标志物的应用,其特征在于,所述真菌微生物的筛选方法为:通过提取组织中的dna,进行its测序和读数分类学注释,判断胃癌患者与健康对照之间的所述真菌微生物的差异度和/或相似性,得到真菌微生物标志物。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述组织包括胃癌组织、癌旁组织和健康胃组织。4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述its测序的过程为:(1)提取组织中的dna;(2)使用its引物进行建库和pcr扩增;(3)使用nanodrop 2000紫外分光光度计和1%的琼脂糖凝胶电泳检测pcr产物的浓度和纯度;(4)利用illumina miseqpe 300测序仪进行测序。5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤(2)中的its引物为:上游引物its3f:gcatcgatgaagaacgcagc,下游引物its4r:tcctccgcttattgatatgc。6.根据权利要4所述的应用,其特征在于,所述的读数分类学注释过程为:(1)删除错配、缺失和重复的序列,只允许2个核苷酸错配;(2)使用uparse.7将相似性97%以上的分类单元(otu)聚集为相同otu;(3)使用qiime计算α多样性,包括chao1、物种和pd_whole_tree;(4)使用lefse方法对gc和hc组差异表达的真菌进行分析。7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,使用受试者工作曲线roc分析真菌标志物,分析工具为excel和graphpad 8.0。8.一种用于胃癌诊断的试剂盒,其特征在于,包含能够检测出权利要求1所述的标志物所属真菌的试剂。

技术总结
本发明公开了一种真菌微生物组作为胃癌诊断的标志物的应用,所述的真菌微生物组选自真菌中门水平、属水平以及种水平中的一种或以上。通过对GC组织、癌旁组织和健康(HC)胃组织进行真菌DNA的ITS测序和读数的分类学注释,总共生成450万个有效标签,分成了1631个分类单元(OTUs),鉴定到了10个门水平和301个属水平的真菌亚群。GC组中Basidiomycota与Ascomycota的比例增加,同时GC中高表达的Cystobasidium,Cutaneotrichosporon,Apodus,Apiotrichum,Simplicillium,Lecanactis,Rhizopus,Rhodotorula,Exophiala,Sarocladium可以作为胃癌诊断的真菌微生物组标志物,并且与胃癌的发生和发展密切相关。并且与胃癌的发生和发展密切相关。并且与胃癌的发生和发展密切相关。


技术研发人员:杨平 李智洋 徐志鹏
受保护的技术使用者:南京鼓楼医院
技术研发日:2022.04.21
技术公布日:2022/7/29
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