一种地衣芽孢杆菌及其应用的制作方法

本技术涉及农业微生物的，更具体地说，涉及一种地衣芽孢杆菌及其应用。

背景技术：

1、土壤微生物是农业生态系统中重要的组成部分，具有促生功能的微生物作为农业微生物的一部分，可直接或间接地促进农作物的生长生育，对农作物的高产种植具有重要的意义。促生菌通过不同的作用机制促进农作物生长，例如合成吲哚乙酸(iaa)。iaa是调节植物生长发育的主要激素，可以促进农作物对养分的吸收利用。菌株的iaa合成能力是衡量菌株促生能力的一个关键指标。此外，菌株也可以通过合成铁载体、蛋白酶和解磷、解钾等途径促进农作物生长。促生菌合成产物的量或种类也是衡量菌株促生能力和产业化的一个重要因素，促生菌合成产物的量越多或种类越丰富，其农业应用的潜力和价值就越突出。

2、微生物对酸碱、盐浓度的耐受度以及和其他菌株的相容性是菌株存活和功能表达的重要影响因素。环境胁迫耐受度低的微生物往往会发生休眠甚至死亡，难以表现其功能性，环境胁迫耐受度高的微生物更容易在土壤中存活和繁殖；与其他功能菌株相容性好的菌株，更容易与功能菌株复配而不产生拮抗，达到协同增效的作用，更有利于促进农作物生长并提升农作物产量。

3、地衣芽孢杆菌在农业农村部菌种安全分级目录中，其安全性较高，在农业中具有较大的应用潜力。但目前已有的地衣芽孢杆菌往往促生功能有限，或对极端环境的适应能力较差，限制了其在农业上的应用。

4、具有显著促生功能且环境适应性强的地衣芽孢杆菌更有利于其在土壤中的存活和繁殖，从而发挥其高效促生功能。挖掘和应用代谢产物丰富且环境耐受度更高的促生菌对农业的高产种植具有重要意义。

技术实现思路

1、为了提高地衣芽孢杆菌的促生作用以及对环境的耐受能力，本技术提供一种地衣芽孢杆菌及其应用。上述地衣芽孢杆菌的iaa分泌量高，并且具有分泌铁载体和蛋白酶以及解磷、解钾的能力，对农作物的促生效果十分明显；上述地衣芽孢杆菌还具有良好的耐酸碱性和耐盐性，对环境的适应能力极强；与其他菌株的相容性好，为其在农业上的应用创造了条件。

2、第一方面，本技术提供一种地衣芽孢杆菌，采用如下技术方案：

3、一种地衣芽孢杆菌，所述地衣芽孢杆菌保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.24738，保藏日期为2022年4月21日。

4、本技术中，上述地衣芽孢杆菌命名为bacillus licheniformis s05。

5、本技术中，上述地衣芽孢杆菌是从海南省乐东黎族自治县的根际土壤中分离筛选获得的，分离获得的地衣芽孢杆菌具有良好的耐酸碱能力以及对高盐离子浓度的耐受性，且与其他的功能菌具有良好的相容性，能稳定地在土壤中存活繁殖，为其在不同农作物生长环境下的应用创造了条件。

6、本技术中，上述地衣芽孢杆菌具有良好的iaa合成能力，可达53.26μg/ml。此外，上述地衣芽孢杆菌还可以合成铁载体，从而与土壤中的难溶性铁形成铁-铁载体络合物，促进植物对营养元素的吸收与利用。上述地衣芽孢杆菌还具有蛋白酶合成能力，一方面，可以对肥料中的蛋白质进行分解，促进营养物质的吸收；另一方面，分泌的蛋白酶还可以对病原菌的细胞膜进行分解，抑制病原菌的同时也可以减少病原菌生理代谢对营养物质的消耗。上述地衣芽孢杆菌还具有解磷、解钾的作用，可以将土壤中难以被农作物吸收的磷元素和钾元素转化为容易被吸收的形式，从而提高农作物对元素的吸收利用效率。通过上述功能的相互配合，所述的地衣芽孢杆菌对农作物生长的促进作用十分明显。

7、第二方面，本技术提供上述地衣芽孢杆菌的培养方法，采用如下技术方案：

8、一种地衣芽孢杆菌的培养方法，所述地衣芽孢杆菌的培养方法包括：

9、将所述地衣芽孢杆菌接种在培养基中，在25～40℃下培养12～50h。

10、本技术中，上述地衣芽孢杆菌的培养基成分简单，培养方法操作容易，为其大规模生产及应用创造了条件。

11、在一些具体的实施方案中，所述培养的温度为25～28℃、25～30℃、25～37℃、28～30℃、28～37℃、28～40℃、30～37℃、30～40℃或37～40℃等。

12、在一个具体的实施方案中，所述培养的温度为25℃、28℃、30℃、37℃或40℃等。

13、在一些具体的实施方案中，所述培养的时间为12～15h、12～18h、12～20h、12～22h、12～24h、12～28h、12～30h、12～35h、12～40h、12～48h、15～18h、15～20h、15～22h、15～24h、15～28h、15～30h、15～35h、15～40h、15～48h、15～50h、18～20h、18～22h、18～24h、18～28h、18～30h、18～35h、18～40h、18～48h、18～50h、20～22h、20～24h、20～28h、20～30h、20～35h、20～40h、20～48h、20～50h、22～24h、22～28h、22～30h、22～35h、22～40h、22～48h、22～50h、24～28h、24～30h、24～35h、24～40h、24～48h、24～50h、28～30h、28～35h、28～40h、28～48h、28～50h、30～35h、30～40h、30～48h、30～50h、35～40h、35～48h、35～50h、40～48h、40～50h或48～50h等。

14、在一个具体的实施方案中，所述培养的时间为12h、15h、18h、20h、22h、24h、28h、30h、35h、40h、48h或50h等。

15、第三方面，本技术提供一种发酵液，采用如下技术方案：

16、一种发酵液，所述发酵液利用第一方面所述的地衣芽孢杆菌发酵得到。

17、第四方面，本技术提供一种菌悬液，采用如下技术方案：

18、一种菌悬液，所述菌悬液利用第一方面所述的地衣芽孢杆菌制备得到。

19、第五方面，本发明提供第一方面所述的地衣芽孢杆菌、第三方面所述的发酵液或第四方面所述的菌悬液在制备促生微生物菌剂中的应用。

20、第六方面，本发明提供一种促生微生物菌剂，采用如下技术方案：

21、一种促生微生物菌剂，所述促生微生物菌剂包括第一方面所述的地衣芽孢杆菌、第三方面所述的发酵液或第四方面所述的菌悬液。

22、优选地，所述促生微生物菌剂中地衣芽孢杆菌的有效活菌数不低于1亿/ml，或所述促生微生物菌剂中地衣芽孢杆菌的有效活菌数不低于5亿/g。

23、在一些具体的实施方案中，所述促生微生物菌剂为液体，其中地衣芽孢杆菌的有效活菌数为1～2亿/ml、1～3亿/ml、1～4亿/ml、1～5亿/ml、1～6亿/ml、1～7亿/ml、1～8亿/ml、1～9亿/ml、1～10亿/ml、2～3亿/ml、2～4亿/ml、2～5亿/ml、2～6亿/ml、2～7亿/ml、2～8亿/ml、2～9亿/ml、2～10亿/ml、3～4亿/ml、3～5亿/ml、3～6亿/ml、3～7亿/ml、3～8亿/ml、3～9亿/ml、3～10亿/ml、4～5亿/ml、4～6亿/ml、4～7亿/ml、4～8亿/ml、4～9亿/ml、4～10亿/ml、5～6亿/ml、5～7亿/ml、5～8亿/ml、5～9亿/ml、5～10亿/ml、6～7亿/ml、6～8亿/ml、6～9亿/ml、6～10亿/ml、7～8亿/ml、7～9亿/ml、7～10亿/ml、8～9亿/ml、8～10亿/ml或9～10亿/ml等。

24、在一个具体的实施方案中，所述促生微生物菌剂为液体，其中地衣芽孢杆菌的有效活菌数为1亿/ml、2亿/ml、3亿/ml、4亿/ml、5亿/ml、6亿/ml、7亿/ml、8亿/ml、9亿/ml或10亿/ml等。

25、在一些具体的实施方案中，所述促生微生物菌剂为固体，其中地衣芽孢杆菌的有效活菌数为5～5.5亿/g、5～6亿/g、5～6.5亿/g、5～7亿/g、5～7.5亿/g、5～8亿/g、5～8.5亿/g、5～9亿/g、5～9.5亿/g、5～10亿/g、5.5～6亿/g、5.5～6.5亿/g、5.5～7亿/g、5.5～7.5亿/g、5.5～8亿/g、5.5～8.5亿/g、5.5～9亿/g、5.5～9.5亿/g、5.5～10亿/g、6～6.5亿/g、6～7亿/g、6～7.5亿/g、6～8亿/g、6～8.5亿/g、6～9亿/g、6～9.5亿/g、6～10亿/g、6.5～7亿/g、6.5～7.5亿/g、6.5～8亿/g、6.5～8.5亿/g、6.5～9亿/g、6.5～9.5亿/g、6.5～10亿/g、7～7.5亿/g、7～8亿/g、7～8.5亿/g、7～9亿/g、7～9.5亿/g、7～10亿/g、7.5～8亿/g、7.5～8.5亿/g、7.5～9亿/g、7.5～9.5亿/g、7.5～10亿/g、8～8.5亿/g、8～9亿/g、8～9.5亿/g、8～10亿/g、8.5～9亿/g、8.5～9.5亿/g、8.5～10亿/g、9～9.5亿/g、9～10亿/g或9.5～10亿/g等。

26、在一个具体的实施方案中，所述促生微生物菌剂为固体，其中地衣芽孢杆菌的有效活菌数为5亿/g、5.5亿/g、6亿/g、6.5亿/g、7亿/g、7.5亿/g、8亿/g、8.5亿/g、9亿/g、9.5亿/g或10亿/g等。

27、第七方面，本发明提供了第一方面所述的地衣芽孢杆菌、第三方面所述的发酵液、第四方面所述的菌悬液或第六方面所述的促生微生物菌剂在制备微生物肥料中的应用。

28、本技术中，上述促生微生物菌剂与常规肥料混合使用，产生了协同增益的效果。常规肥料中含有丰富的氮、磷以及钾元素，但缺少生物类促生物质，且磷元素和钾元素的吸收效率并不高，对农作物生长的促进作用并不明显。与促生微生物菌剂混合后，菌剂中的地衣芽孢杆菌可以合成并分泌iaa、铁载体以及蛋白酶等生物类促生物质，同时还可以将肥料中的不易吸收的磷元素、钾元素转化为更容易被吸收的形式，从而提高了肥料的利用效率，显著促进了农作物的生长。

29、第八方面，本发明提供了一种微生物肥料，采用如下技术方案：

30、一种微生物肥料，所述微生物肥料包括第一方面所述的地衣芽孢杆菌、第三方面所述的发酵液、第四方面所述的菌悬液或第六方面所述的促生微生物菌剂。

31、第九方面，本技术提供第一方面所述的地衣芽孢杆菌、第三方面所述的发酵液、第四方面所述的菌悬液、第六方面所述的促生微生物菌剂或第八方面所述的微生物肥料在农作物培育中的应用。

32、综上所述，本技术具有以下有益效果：

33、1.本技术中的地衣芽孢杆菌对农作物的生长具有良好的促进作用：iaa合成能力可达53.26μg/ml，促进了根的生长，提升了对营养物质的运输能力；其还可以分泌铁载体和蛋白酶，提高了对铁元素以及蛋白类物质的吸收与利用，此外还具有一定的防控病害的作用；上述地衣芽孢杆菌还具有解磷解钾的作用，提高了农作物对于磷元素和钾元素的利用效率。通过上述作用的相互配合，使农作物植株更为茁壮，产量以及果实品质也有提升。

34、2.本技术中的地衣芽孢杆菌还具有良好的环境耐受能力：在4～11的ph值范围内的生长基本不受影响，具有良好的耐酸碱性；在5％～17.5％的nacl浓度下能够正常生长，在20.0％的nacl浓度下可以存活，具有较强的耐盐性；在25～40℃下可以进行正常的生理代谢。上述特性使其更容易在土壤中存活、繁殖，从而更好地发挥其功能，为其在不同农作物生长环境中的应用创造了条件。另外，所述地衣芽孢杆菌与其他菌种还具有良好的相容性，为其与其他功能菌制成复合产品提供了基础。

35、3.本技术中的地衣芽孢杆菌属于农业农村部菌种安全分级目录第一级菌株，菌株安全，生产工艺简单、生产周期短且原料成本低，适合工业化生产，在农作物高产、健康种植中具有较大的应用潜力。

36、4.上述地衣芽孢杆菌还可以与常规的肥料混合制成微生物肥料，上述微生物肥料中含有丰富氮、磷、钾等无机营养元素，还含有iaa、铁载体以及蛋白酶等生物类促生物质，配合地衣芽孢杆菌的解磷解钾作用，将肥料中不易吸收的磷元素、钾元素转化为更容易被吸收的形式，从而提高了肥料的利用效率，协同增益，对农作物生长的促进作用十分显著。