本发明属于作物病害防控基因。
背景技术：
1、rna干扰(rna interference,rnai)是真核生物细胞中高度保守的、由双链rna(double strain rna，dsrna)产生小rna(small rna，srna)引发的基因表达调控机制。rnai能够在转录水平(transcriptional gene silencing，tgs)以及转录后水平(post-transcriptional gene silencing，ptgs)调控基因表达，具有高效和特异靶向的特点。
2、人工设计靶向病原菌生长发育或致病性相关基因的dsrna并转入目标作物或者通过体外喷洒，沉默目的基因，达到病害防控的目的。例如，2010年提出的寄主诱导的基因沉默(host-induced gene silence，higs)技术，即通过在寄主植物中表达靶向于病原菌的dsrna，进而抑制病原菌对植物致病性。然而，很多作物缺少成熟的转化技术，体外喷洒的dsrna在环境中不稳定并且不能够持续提供dsrna。
技术实现思路
1、有鉴于此，本发明提供了一种避免作物转基因、摆脱dsrna体外喷洒诸多局限的生防工程菌制备方法。该方法利用广泛使用的生防真菌哈茨木霉产生靶向病原真菌内源基因的dsrna，达到抑制病菌真菌生长的目的，包括如下步骤：依据病原真菌确定靶标基因；以靶标基因为臂序列，以大丽轮枝菌内源基因vdtublin内含子序列为中心，将两段相同臂序列分别正向和反向连接至内含子两端，构建dsrna序列；利用atmt将dsrna序列转入哈茨木霉中，得哈茨木霉工程菌。
2、在本发明的具体实施例中，所述臂序列的具体序列信息为如序列表中seq idno.1所示、如序列表中seq id no.2所示或如序列表中seq id no.4所示。
3、在本发明的具体实施例中，所述vdtublin内含子序列如序列表中seq id no.3所示。
4、在本发明的具体实施例中，所述哈茨木霉工程菌为哈茨木霉工程菌株th-dspmt1-1、哈茨木霉工程菌株th-dspmt1-2或哈茨木霉工程菌株th-dspmt2。
5、在本发明的具体实施例中，所述致病菌为大丽轮枝菌(verticillium dahliae)和尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)。
6、本发明获得的工程菌株具有抑制病原真菌基因表达进而影响其致病性、防控病害的作用。
1.以哈茨木霉作为dsrna载体制备生防工程菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.依据权利要求1所述的方法，其特征在于，
3.依据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述vdtublin内含子序列如序列表中seqid no.3所示。
4.依据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述哈茨木霉工程菌为哈茨木霉工程菌株th-dspmt1-1、哈茨木霉工程菌株th-dspmt1-2或哈茨木霉工程菌株th-dspmt2。
5.依据权利要求1所述的含有dsrna序列的哈茨木霉工程菌制备方法，其特征在于，所述致病菌为大丽轮枝菌(verticillium dahliae)和尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)。