环状RNAcirc_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用

本发明涉及分子标志物，尤其涉及环状rna circ_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用。

背景技术：

1、结直肠癌(crc)是世界上最常见的恶性肿瘤之一；crc病例数量逐年增加，对人类生命健康构成严重威胁。这病因不明、早期症状不明显、转移率高是导致大肠癌患者预后差、死亡率高的重要因素。尽管在诊断和治疗策略方面取得了进展，但患有晚期疾病的大肠癌患者的临床结果和预后仍然很差。

2、环状rna(circularrna，circrna)是非编码rna领域的新星，因其 5′末端和3′末端首尾相连形成闭合环状结构而得名，在真核细胞中广泛表达。环状rna分子呈现封闭环状结构，具有更高的核酸酶稳定性，不受rna外切酶的影响，不易降解，可作为mirna分子海绵，调节基因表达，与蛋白质发挥重要的相互作用。目前，有关环状rnacirc_0000615对于结直肠癌的影响及其在肿瘤中的应用尚未见报道。

技术实现思路

1、为克服现有技术中存在的上述缺陷，本发明提供了环状rna circ_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了环状rnacirc_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用，所述环状rnacirc_0000615的核苷酸序列如seq id no.1 所示。

4、本发明还提供了一种用于检测上述环状rnacirc_0000615的pcr引物对，所述pcr引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示。

5、本发明还提供了一种用于检测上述环状rnacirc_0000615的线性引物 znf609引物对，所述线性引物znf609引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示。

6、本发明还提供了一种结直肠癌检测试剂盒，所述试剂盒包括上述的pcr 引物对和线性引物znf609引物对。

7、优选的，所述试剂盒还包括内参引物对。

8、优选的，所述内参引物对包括gapdh扩增引物对，所述gapdh扩增引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.6所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.7所示。

9、本发明还提供了环状rna circ_0000615过表达载体在抑制结直肠癌细胞增殖中的应用。

10、本发明还提供了环状rna circ_0000615过表达载体在制备治疗结直肠癌的药物中的应用。

11、优选的，所述环状rna circ_0000615过表达载体包括上述的环状rna circ_0000615和原始载体，所述原始载体包括pgc-fu。

12、与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

13、本发明的研究结果表明，环状rna circ_0000615的表达水平与结直肠癌呈现负相关关系，是一个在crc组织中表达显著下调的rna，可以作为癌症的诊断标志物。同时，环状rna circ_0000615过表达后，可显著抑制结直肠癌的增殖能力，抑制肿瘤的发生和发展，可作为癌症治疗的潜在方式。

技术特征：

1.环状rna circ_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述环状rna circ_0000615的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种用于检测权利要求1所述环状rna circ_0000615的pcr引物对，其特征在于，所述pcr引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.3所示。

3.一种用于检测权利要求1所述环状rna circ_0000615的线性引物znf609引物对，其特征在于，所述线性引物znf609引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq id no.4所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.5所示。

4.一种结直肠癌检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求2所述的pcr引物对和权利要求3所述的线性引物znf609引物对。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括内参引物对。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述内参引物对包括gapdh扩增引物对，所述gapdh扩增引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如seq idno.6所示，所述下游引物的核苷酸序列如seq id no.7所示。

7.环状rna circ_0000615过表达载体在抑制结直肠癌细胞增殖中的应用。

8.环状rna circ_0000615过表达载体在制备治疗结直肠癌的药物中的应用。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，所述环状rna circ_0000615过表达载体包括权利要求1所述的环状rna circ_0000615和原始载体，所述原始载体包括pgc-fu。

技术总结
本发明属于分子标志物技术领域，本发明提供了环状RNAcirc_0000615作为标志物在制备结直肠癌检测试剂盒中的应用。本发明所述环状RNA circ_0000615的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的研究结果表明，环状RNAcirc_0000615的表达水平与结直肠癌呈现负相关关系，是一个在CRC组织中表达显著下调的RNA，可以作为癌症的诊断标志物。同时，环状RNAcirc_0000615过表达后，可显著抑制结直肠癌的增殖能力，抑制肿瘤的发生和发展，可作为癌症治疗的潜在方式。

技术研发人员：钟加滕,胡育涵,丁爽,赵瑶,张馨予,苏蔚,郜庆祖
受保护的技术使用者：新乡医学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11