抗逆性优良的空间育种酿酒酵母及其应用的制作方法

1.本发明涉及发酵工程技术领域，具体涉及一株抗逆性优良的空间育种酿酒酵母及其应用。


背景技术：

2.酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae）是葡萄酒酿造的关键微生物，将葡萄果实中的糖转化为乙醇，并代谢产生多种发酵香气物质，直接决定了葡萄酒的风格。目前我国葡萄酒产业严重依赖进口活性干酵母，酵母种质安全受到威胁，酒类产品的同质化日趋严重，行业亟需通过多种育种手段获得优良本土酵母。
3.我国西部产区昼夜温差大、日照时间长，是优良的葡萄酒产区之一。但夏季炎热的气候、强烈的光照使得葡萄果实中糖含量较高，这为酿酒酵母带来发酵早期的高渗透压胁迫、发酵中晚期的高乙醇胁迫，从而存在葡萄酒发酵不完全、生物稳定性差的风险，给葡萄酒的品质造成不良影响。随着国内葡萄酒产业的发展，亟需开发适用于糖含量高的葡萄果实的葡萄酒酿造工艺，以提高该类葡萄酒的品质。
4.为了进一步提升核心菌种自主率，选育性能更优越的酿酒酵母，完善产业链条，降低生产成本。然而，传统诱变育种技术得到的酵母的生产性能已达到“诱变筛选”瓶颈。越来越多的研究发现，可借助宇宙空间辐射和微重力突破“诱变”瓶颈。太空环境中的微重力效应、极端温差、高真空、高能粒子辐射和弱磁场等可以对空间微生物产生诱变作用，显著提高基因突变频率，从而改变微生物的生物学性状（包括菌落特征、生理生化特性、个体形态等）和发酵生产性能（包括酶活力、产香能力等），这使得航天育种成为近年来备受关注的菌株诱变育种的新科技手段。通过航空育种，可选育性能更优越的酵母，提升我国葡萄酒企业生产力和竞争力。


技术实现要素：

5.本发明的目的是为了克服现有技术存在的现有商业活性干酵母无法保证由糖含量高造成的高酒精胁迫的葡萄酒的品质等问题，提供一株抗逆性优良的空间育种酿酒酵母及其应用。本发明提供的酿酒酵母通过空间诱变育种获得，具有发酵速度快、高耐受渗透压胁迫、高耐受乙醇、产香特性突出等优点，尤其适合糖含量高的葡萄进行高品质葡萄酒酿造使用。
6.为了实现上述目的，本发明一方面提供一株酿酒酵母，所述酿酒酵母为保藏编号为cgmcc no.24017的酿酒酵母。
7.本发明第二方面提供第一方面所述的酿酒酵母在酿酒中的应用。
8.本发明第三方面提供一种酿造葡萄酒的方法，所述方法包括将第一方面所述的酿酒酵母接种至葡萄汁中，在酿酒条件下进行发酵，获得葡萄酒。
9.本发明第四方面提供根据第三方面所述的方法制备获得的葡萄酒。
10.通过上述技术方案，本发明能够取得如下有益效果：
（1）本发明提供的酿酒酵母具有较高的抗胁迫能力，尤其具有较高的乙醇和（由发酵原料中高浓度糖带来的）渗透压胁迫耐受力；（2）本发明提供的酿酒酵母具有良好的产香性能，尤其是酯类物质的产量较高，能够赋予葡萄酒更加丰富的果香味和花香味。并且在发酵过程中对葡萄酒风味不利的代谢产物产量较低，对葡萄酒品质的提高和稳定发挥重要作用，适合高品质葡萄酒酿造使用；（3）本发明提供的酿酒酵母产酸量高，特别适合酸度低、糖度高的葡萄（如我国西部产区的葡萄）进行葡萄酒酿造使用；（4）本发明提供的酿酒酵母能够替代现有菌株使用，为葡萄酒酿造提供更多的菌株选择，改善酒类产品的同质化问题，有助于打破目前国内葡萄酒产业采用的核心菌株受国外垄断限制的局面，完善产业链，降低生产成本。
11.生物保藏本发明提供的酿酒酵母，分类命名为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae，已于2021年12月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.24017。
附图说明
12.图1是实施例1中采用ypd培养基对htzl03-5进行培养时的菌落特征图；图2是实施例1中采用wl培养基对htzl03-5进行培养时的菌落特征图；图3为实施例2中绘制的htzl03-5的葡萄糖耐受性曲线图；图4为实施例4中采用htzl03-5和xr酿造的西部产区马瑟兰干红葡萄酒的感官评价结果对比图。
具体实施方式
13.在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
14.本发明中，未做特殊说明的情况下，“（本发明提供的）酿酒酵母”和“酿酒酵母htzl03-5”均指本发明提供的酿酒酵母cgmcc no.24017。
15.本发明的发明人在研究的过程中，将自然发酵葡萄醪中分离筛选获得的酿酒酵母菌株经太空诱变，而后筛选获得一株酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae），其具有发酵性能良好，高耐受渗透压胁迫和乙醇，具有突出产香特性等特点，尤其适用于采用酸度低、糖度高的酿酒葡萄进行高品质葡萄酒酿造使用。
16.本发明第一方面提供一株酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae），所述酿酒酵母为保藏编号为cgmcc no.24017的酿酒酵母。
17.本发明第二方面提供第一方面所述的酿酒酵母在葡萄酒酿造中的应用。
18.本发明第三方面提供一种酿造葡萄酒的方法，所述方法包括将第一方面所述的酿酒酵母接种至葡萄汁和/或葡萄果浆中，在酿酒条件下进行发酵，获得葡萄酒。
19.本发明提供的方法中，对于用于葡萄酒酿造的原料（酿酒葡萄）来源没有特别限
制，任意可以用于葡萄酒酿造的葡萄制成的葡萄汁或葡萄果浆均可适用于本发明提供的方法。由于本发明提供的酿酒酵母cgmcc no.24017在葡萄酒酿造过程中的产酸量高，因此，特别适合以糖酸比（即还原糖和总酸含量比）较高的酿酒葡萄为原料进行葡萄酒酿造（例如产自我国西部产区的葡萄）。
20.针对本发明提供的酿酒酵母的上述特点，根据本发明的一些优选实施方式，其中，用于制备所述葡萄汁和/或葡萄果浆中的还原糖含量与总酸含量之间的比值不低于50，更优选为50-100。其中，还原糖含量与总酸含量（以酒石酸计）均为质量含量，单位通常为g/l，分别可以采用斐林试剂法和滴定法测得。
21.本发明提供的方法可以采用任意品种的具有上述特征的酿酒葡萄为原料进行葡萄酒酿造。根据本发明的优选实施方式，其中，用于制备所述葡萄汁和/或葡萄果浆的葡萄品种选自马瑟兰、赤霞珠、梅鹿辄、品丽珠、西拉、黑比诺、丹菲特、长相思、贵人香和霞多丽中的至少一种。用于制备所述葡萄汁和/或葡萄果浆的葡萄品种例如为产自西部产区的葡萄。
22.任意采用如上所述特征的酿酒葡萄制成的葡萄汁或葡萄果浆均可适用于本发明提供的方法，对于其中的成分没有特别限制。根据本发明的优选实施方式，其中，所述葡萄汁和/或葡萄果浆中还原糖的含量为200-500g/l，总酸含量为1-10 g/l。
23.优选地，所述葡萄汁和/或葡萄果浆中还原糖的含量为200-400g/l，总酸含量为3-8g/l。
24.更优选地，所述葡萄汁和/或葡萄果浆中还原糖的含量为250-350g/l，总酸含量为4-7 g/l。
25.本发明提供的方法中采用的葡萄汁或葡萄果浆可以采用任意本领域现有方法制备获得，也可以直接从商购途径购买获得，只要其原料符合前述特征即可。
26.本发明提供的方法中，对于酿酒酵母的接种量没有特别限制，可以根据实际情况（例如原料来源、发酵条件、产品要求等）进行调整。根据本发明的优选实施方式，其中，所述酿酒酵母的接种量为10
5-10
10 cfu/ml。所述10
5-10
10 cfu/ml是指接种后发酵体系中酿酒酵母的含量在10
5-10
10 cfu/ml的数量级水平，例如10
5 cfu/ml的数量级水平代表的是大于等于1
×
10
5 cfu/ml至小于10
6 cfu/ml的范围，也即，如1
×
10
5 cfu/ml、5
×
10
5 cfu/ml、9.9
×
10
5 cfu/ml等均属于10
5 cfu/ml的数量级水平。因此，本发明提供的方法中，酿酒酵母的接种量在大于等于1
×
10
5 cfu/ml至小于1
×
10
11 cfu/ml的范围内。
27.优选地，所述酿酒酵母的接种量为10
6-10
8 cfu/ml。
28.任意本领域现有的适用于葡萄酒酿造的酿酒条件均可适用于本发明提供的方法。为了进一步适应糖含量高且酸度低的酿酒葡萄的特点，提高葡萄酒品质，根据本发明的优选实施方式，其中，所述酿酒条件包括：温度10-30℃（优选为12-28℃，更优选为25-28℃），时间5-20天（优选为5-15天）。
29.本发明提供的方法中，出于提升葡萄酒品质的目的，在酿造葡萄酒的原料（即葡萄汁和/或葡萄果浆）中还可以添加辅料，例如，用于帮助酵母发酵的辅料，进一步改善葡萄酒香气和风味的辅料等。根据本发明的优选实施方式，其中，所述葡萄汁和/或葡萄果浆中还包括果胶酶、单宁、氮源、酵母多糖和橡木制品中的至少一种。本发明提供的方法中对于所述辅料的用量没有特别限制，可以根据实际情况（例如原料特性、辅料特性、产品需要等）进
行调整。氮源可以为本领域常见的氮源，例如蛋白胨、酵母提取物等。橡木制品用于进一步改善葡萄酒的香气和风味。
30.本发明的方法中，在发酵前还可以采用常规的方法对菌株进行活化。活化的条件可以包括：温度为25-30℃，时间可以为20-30h。
31.本发明第四方面提供根据第三方面所述的方法制备获得的葡萄酒。
32.任意根据本发明提供的上述方法制备获得的葡萄酒均属于本发明的内容，对于其中的具体成分没有特别限制。
33.由于葡萄酒的成分与酿酒原料和酿酒条件等均有关联，因此，采用不同来源和品种的酿酒葡萄，或采用不同的酿酒条件获得的葡萄酒中的成分均会有所差别。
34.根据本发明的一种特别优选的实施方式，葡萄酒为采用还原糖的含量为280-320g/l，总酸含量为4.5-6.5g/l的马瑟兰葡萄汁为原料，采用如前所述的酿酒条件酿造获得的葡萄酒，其中，所述葡萄酒中含有：乙醇10-20体积%，高级醇250-320 mg/l，酯类物质1-5 mg/l，酸类香气物质0.1-1.5mg/l。所述“酸类香气物质”指的是葡萄酒中的挥发性香气物质中的酸类物质，例如，己酸、辛酸、癸酸等。
35.优选地，所述葡萄酒中含有：乙醇13-17体积%，高级醇270-310 mg/l，酯类物质2-4 mg/l，酸类香气物质0.5-1 mg/l。
36.以下将通过实施例对本发明进行详细描述。应当能够理解的是，以下实施例仅用于示例性地进一步解释和说明本发明的内容，而不用于限制本发明。
37.以下实施例中采用的化学品均购自正规化学品供应商，纯度为化学纯。
38.以下实施例中采用的培养基制备方法如下：ypd培养基：酵母提取物10g/1000ml，葡萄糖20g/1000ml，蛋白胨20g/1000ml。按照上述用量称取试剂，溶于去离子水中，无需调节ph，即得液体ypd培养基。按照1.5g/1000ml的比例在液体ypd培养基中加入琼脂，即得固体ypd培养基。将获得的培养基121℃高压灭菌15min，冷却后备用。
39.将灭菌后的固体ypd培养基冷却至不烫手（约50℃），倒入平板培养皿中，冷却凝固后即得ypd培养平板。
40.wl营养琼脂培养基：酵母浸粉4g/1000ml，氯化铁0.0025g/1000ml，葡萄糖50g/1000ml，硫酸锰0.0025g/1000ml，氯化钾0.425g/1000ml，溴甲酚绿0.022g/1000ml，氯化钙0.125g/1000ml，硫酸镁0.125g/1000ml，酸水解酪蛋白5g/1000ml，磷酸二氢钾0.55g/1000ml。按照上述用量称取试剂，溶于去离子水中，调节ph至5.5
±
0.2，即得液体wl培养基。按照20g/1000ml的比例在液体wl培养基中加入琼脂，即得固体wl培养基。将获得的培养基121℃高压灭菌15min，冷却后备用。
41.将灭菌后的固体wl培养基冷却至不烫手（约50℃），倒入平板培养皿中，冷却凝固后即得wl培养平板。
42.乙醇耐受筛选培养基：酵母提取物10 g/1000 ml，葡萄糖20 g/1000 ml，蛋白胨20 g/1000 ml。按照上述用量称取试剂，溶于去离子水中，无需调节ph，按照1.5g/100ml的比例加入琼脂，121℃高压
灭菌15min，冷却后备用。
43.将灭菌后的培养基冷却至不烫手（约50℃），加入预热的乙醇，使得培养基中乙醇浓度达到18体积%，混匀后倒入平板培养皿中，冷却凝固后即得乙醇耐受筛选培养平板。
44.高糖（300g/l）葡萄汁模拟培养基：葡萄糖150g/1000ml，果糖150g/l，酒石酸3 g/1000ml，柠檬酸0.3 g/1000ml，l-苹果酸0.3 g/1000ml，硫酸铵0.3 g/1000ml，天冬酰胺0.6 g/1000ml，一水合硫酸锰4 mg/1000ml，一水合硫酸锌4 mg/1000ml，磷酸二氢钾2 g/1000ml，五水合硫酸铜1 mg/1000ml，碘化钾1 mg/1000ml，硼酸1 mg/1000ml，(nh4)6mo7o
24
·
4h2o 1 mg/1000ml，cocl2·
6h2o 0.4 mg/1000ml，肌醇0.3 g/1000ml，生物素0.04 mg/1000ml，维生素b
1 1 mg/1000ml，维生素b
6 1 mg/1000ml，烟酸1 mg/1000ml，泛酸1 mg/1000ml，对氨基苯甲酸1 mg/1000ml。按照上述用量称取试剂，溶于去离子水中，调节ph至5.8，过滤除菌即得高糖葡萄汁模拟培养基。
45.实施例1本实施例用于说明酿酒酵母cgmcc no.24017的获得和保藏。
46.（一）菌种诱变从贺兰山东麓产区自然发酵的酿酒葡萄醪中纯化培养获得一株酿酒酵母zl03（保藏于中粮营养健康研究院酒业技术中心微生物菌种库），该菌株搭载经长征五号b运载火箭首飞发射的新一代载人飞船试验船，进行太空诱变，获得空间育种酿酒酵母htzl03。
47.（二）菌种纯化和筛选将冻存于-80℃的太空诱变菌株htzl03的甘油保存管于4℃缓冻，于无菌工作台内以2体积%的接种量接种至wl培养平板中，30℃培养24h，随机挑取单菌落，划线分离纯化3次，获得若干单个纯种菌落。
48.初筛：采用点接法，用无菌接种针将分离纯化获得的菌落依次点接于乙醇耐受筛选培养平板中，每个菌落设置三个平行。30℃培养48h，观察菌落生长情况，从中筛选出8株菌落大小均匀、生长状态良好的菌株，依次编号为htzl03-1至htzl03-8。
49.复筛：将htzl03-1至htzl03-8分别采用ypd液体培养基进行传代，再采用ypd培养平板对传代后的菌株进行培养，从ypd培养平板上挑取菌株，分别接种至装在250ml锥形瓶中的ypd液体培养基（100ml）中，摇床（180rpm，30℃）培养24h，作为种子液。
50.采用地面起始菌株zl03和常用进口商业酿酒酵母xr（购自法国lamothe-abiet公司）作为对照，采用相同的方法制备种子液。
51.采用500ml锥形瓶，按照106cfu/ml的接种量将htzl03-1至htzl03-8、zl03和xr的种子液接种至300ml葡萄汁模拟培养基中，初始总还原糖浓度300g/l，以发酵栓液封，25℃静置培养10-14天（还原糖含量＜4g/l即可终止发酵，第14天时不论还原糖含量如何，均终止发酵）。采用液相色谱仪（安捷伦公司hplc 1200 系列）对发酵产物中的残糖和乙醇含量进行检测，结果详见表1。
52.表1 空间诱变酿酒酵母的发酵性能和乙醇耐受情况
由表1中的数据可以看出，htzl03-5的发酵性能最好，并且对于乙醇的耐受能力最高（与现有商业菌株水平相当）。
53.（三）菌株鉴定形态学鉴定：将试验（二）中获得的htzl03-5种子液划线接种于ydp培养平板和wl培养平板，30℃培养48h，观察获得的菌落特征。
54.ypd培养平板培养结果：菌落为乳白色，圆形，有光泽，边缘整齐，粘稠，易挑起（如图1所示）。
55.wl培养平板培养结果：菌落为奶油色，呈球形突起，表面光滑，不透明，奶油状（如图2所示）。
56.分子生物学鉴定：取菌株htzl03-5总dna（采用百泰克公司的试剂盒dp6201，按照其说明书内容进行提取）为模板，利用真菌its rdna通用引物，按照表2的pcr体系和扩增程序进行its rdna扩增。
57.表2 its鉴定所用pcr体系和程序将扩增产物送至生工生物工程（上海）有限公司进行测序，并将获得的菌株htzl03-5的its rdna序列与ncbi中数据进行比对，发现菌株htzl03-5与saccharomyces cerevisiae具有100%的同源性，结合以上形态学鉴定结果和生理生化鉴定结果，综合认定
其为酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae）。
58.（四）菌株保藏于2021年12月02日，将酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae）保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.24017。保藏证明中的bc 60685即本实施例中筛选获得的菌株htzl03-5。
59.实施例2本实施例用于说明酿酒酵母cgmcc no.24017的抗渗透压胁迫能力。
60.采用实施例1中的方法制备htzl03-5种子液。采用96孔板，将该种子液按照3体积%的接种量分别接种到葡萄糖含量为200g/l、300g/l、400g/l、500g/l和600g/l的ypd液体培养基中，检测该菌株的抗渗透压胁迫能力。
61.每个浓度做3个平行复孔（每孔总体积约为1ml）。30℃，200rpm振荡培养过夜（约18h），采用酶标仪检测od
600nm
值，按照以下公式计算酿酒酵母htzl03-5的葡萄糖耐受性，并绘制糖耐受性曲线（详见图3）。
62.葡萄糖耐受性（%）=[(od
培养后-od
空白（培养时间相同）
)/(od
培养前-od
空白
)-1]
×
100%从图中可以看出，htzl03-5可在500g/l葡萄糖的条件下正常生长发酵，可保证葡萄酒的正常酿造生产。说明该菌株具有良好的抗渗透压胁迫能力。
[0063]
实施例3本实施例用于说明酿酒酵母cgmcc no.24017的发酵效果和产香性能。
[0064]
采用实施例1中的方法进行酿酒酵母htzl03-5和进口商业酿酒酵母xr的种子液制备。
[0065]
采用500ml锥形瓶，按照106cfu/ml的接种量，分别将酿酒酵母htzl03-5和xr种子液接种至300ml高糖葡萄汁模拟培养基中（500ml锥形瓶），以发酵栓液封，25℃下静置发酵培养10-14天（至还原糖含量＜4g/l时终止发酵），获得葡萄酒样品。
[0066]
采用液相色谱法（gb/t 15038-2006）对葡萄酒样品中的葡萄糖、果糖、甘油、乙醇、乙酸、柠檬酸、苹果酸和琥珀酸含量进行检测，检测结果详见表3。
[0067]
表3 葡萄酒样品理化指标检测结果采用agilent 6890 气相色谱（gc）和agilent 5975 质谱（ms）联用仪（agilent，美国）检测葡萄酒样品中挥发性香气物质含量。具体条件：毛细管柱hp-innowax polyethylene glycol 60 m
×
0.25 mm
×
0.25 μm（j&w scientific，美国）载气为高纯氦
气，流速1 ml/min；顶空固相微萃取手动进样，采用不分流模式，插入气相色谱的进样口，进样口温度250℃，热解析25 min。柱温箱的升温程序是：40℃保持5 min，然后以3℃/min的速度升温至200℃，保持2 min。质谱接口温度为280℃，离子源温度为230℃，电离方式ei，离子能量70 ev，质量扫描范围20-450 amu。检测结果详见表4。
[0068]
表4 葡萄酒样品中香气物质含量对比*表4中的高级醇含量是指表4中所示醇类物质的总量，酯类含量是指表4中所示酯类物质的总量，酸类含量是指表4中所示酸类物质的总量。
[0069]
通过表3和表4的内容可以看出，发酵结束时，htzl03-5葡萄酒最终糖度为2.88 g/l，可以完成发酵（《4 g/l）。酒精度为15.84体积%，与商业酵母接近。说明该酵母可完成高渗透压胁迫下的葡萄酒发酵。由表4中htzl03-5所酿造得到的葡萄酒香气成分可知，该酵母高级醇产量适中，含量未超过不良风味最高值（400 mg/l），且总酯产量显著高于商业酵母。由该酵母产生的酯类物质总量2.95 mg/l，是对照的1.4倍，其中乙酸异戊酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯明显高于商业对照，可提高葡萄酒的果香、花香等风味特征，提升葡萄酒的
香气品质。
[0070]
因此，本发明提供的酿酒酵母htzl03-5不仅能顺利完成高糖原料的干红葡萄酒酿造，并使其符合国家标准，同时能够增加葡萄酒的香气复杂性，提升葡萄酒香气品质。
[0071]
实施例4本实施例用于说明采用酿酒酵母cgmcc no.24017酿造获得的葡萄酒的感官评价效果。
[0072]
采用实施例1中的方法进行酿酒酵母htzl03-5和进口商业酿酒酵母xr的种子液制备。
[0073]
采用产自西部产区的马瑟兰葡萄汁作为原料，进行葡萄酒酿造。马瑟兰葡萄汁的制备方法为：将葡萄经机械除梗破碎后出汁，经巴氏杀菌（65
°
c，30 min）后澄清，取清汁备用，从获取的清汁中取样涂布检测确认葡萄汁为无菌状态即可使用。经检测，该葡萄汁中还原糖含量（以葡萄糖计）为300.81
±
10.25g/l，总酸量（以酒石酸计）为5.51
±
0.23g/l。
[0074]
分别将htzl03-5和xr种子液按照106cfu/ml的接种量接种至10l马瑟兰葡萄汁中，20℃静置24h，回温至22℃后得到htzl03-5和xr的活化液。
[0075]
分别将htzl03-5和xr的活化液移入100l发酵罐（华强中天流体设备(北京)有限公司，hcht-100l*8）进行发酵，发酵条件为：27
±
1℃发酵，每日早中晚3次压帽，确保浸湿皮帽。发酵液中还原糖浓度＜4g/l时结束发酵，获得葡萄酒。htzl03-5和xr的发酵时间均为6天。
[0076]
邀请十位评定人员对采用上述方法酿造获得的葡萄酒进行感官评价，受邀的十位评定人员包括国家级葡萄酒品酒师（五位），来自国内高校多年从事葡萄酒研究的教授、副教授（两位），葡萄酒专业硕士、博士研究生（三人）。感官评价项目包括：澄清度、色泽、纯正度、浓郁度、优雅度、酸度、甜度、平衡性、持续性等，并根据对葡萄酒的整体感受评定综合评分，各感官评价项目对应的总分详见表5。每项取各位评定人员评分的平均值，结果详见图4（注：图4中的分值为以10分为总分进行标准化处理后的数值）。
[0077]
表5根据图4中的感官评价分数对比可以看出，采用htzl03-5酿造的马瑟兰干红葡萄酒具有更高的优雅度和浓郁度，香味特性更好，并且显著提高了葡萄酒的酸度，改善了葡萄
酒的平衡性，较好地改善了西部产区干红葡萄酒酸度不足的现状，提高了该产区葡萄酒的品质，表现出良好的酿酒潜力。
[0078]
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。