桔绿木霉、含其的生物制剂及其制备方法和应用与流程

文档序号:38220502发布日期:2024-06-06 18:55阅读:69来源:国知局

本发明属于生防微生物菌剂领域,涉及一种桔绿木霉菌株、含其的生物制剂及其制备方法和应用。


背景技术:

1、桔绿木霉(trichoderma citrinoviride)属于盘菌亚门,肉座菌目,木霉属。其菌落形态起初为白色、致密、圆形、向四周扩展;后期(7d后)菌落产生孢子,逐渐变色。分生孢子黄绿色至深绿色,椭圆形。由于木霉菌具有抗生作用、重寄生作用、溶菌作用和竞争作用等特质,其在国际上已被广泛用于微生物防治。

2、马铃薯是全球第四大重要的粮食作物,而马铃薯黑痣病是由立枯丝核菌引起的一种土传病害,在马铃薯种植区黑痣病日趋严重,且发病较为普遍,一般可造成马铃薯减产15%左右,个别年份可达全田毁灭,严重影响了马铃薯的产量和品质。目前对于马铃薯黑痣病的防治方法主要通过化学农药拌种或土壤喷洒消毒,但防治效果普遍不佳,而且长期以及不合理的使用化学农药对土壤以及生态环境造成了伤害。而木霉菌是自然界中广泛存在的一种生防微生物,其中桔绿木霉对于立枯丝核菌具有优秀的抑制和重寄生作用,不仅能够防止土传病害的防治,而且能够对植物生长具有促进作用,增加作物的品质和产量。

3、高温焚烧还田作为传统的秸秆处理方式,具有投入小、成本低、易操作和见效快等优点,对改善土壤全效和速效养分具有即时效应。但是秸秆焚烧不仅严重污染环境,而且造成较大的资源浪费。将粉碎秸秆与一定量的生物菌剂和适量氮肥混合,洒水堆压,生化腐熟后还田,秸秆的高分子粗纤维经高温堆沤分解成小分子糖醇等,与此同时秸秆中的病原菌和杂草种子等被高温灭杀,在腐熟的同时还降低了病原菌的基数,进而生成有机熟肥。

4、植物病原线虫几乎危害所有的植物,给农业、林业、园林等的发展带来的严重危害,已经超过了细菌和病毒病害,仅次于真菌病害。全球每年由线虫危害导致的作物减产可达14%,每年因线虫造成的损失大约1,570亿美元,与昆虫造成的损失大致相当。目前已知的粮食作物、经济作物、油料作物、果树蔬菜等100多种植物都已发生了植物病原线虫病,其中危害最为严重的植物病原线虫病害是根结线虫病和大豆孢囊线虫病引起的。传统的农业措施防治,如控制种源、苗源以防污染,轮作倒茬等方式无法达到根治的目标,同时也会在一定程度上影响农民经济效益。

5、近年来生物农药以其高效、低毒甚至无毒、环境相容性好,对人畜安全、选择性强、病虫害不易产生抗性等特点受到越来越多的关注。因此,桔绿木霉及含其的生物制剂的开发和生防潜力挖掘,对绿色防控马铃薯黑痣病、秸秆腐熟和根结线虫的防控具有十分重要的意义。


技术实现思路

1、为解决以上现有技术中所存在的问题,本发明提供了一种桔绿木霉菌株、含其的生物制剂及其制备方法和应用,该桔绿木霉具有抑制多种病原菌、促进秸秆腐熟、促进植物生长以及多种植物病原线虫致死效果,同时使用本发明制备方法所制得的桔绿木霉生物制剂还可实际应用于田间防治。相比于现有木霉及含其的制剂,本发明桔绿木霉应用范围更广、田间防治效果更强。

2、为实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:

3、本发明的技术方案之一提供了一种桔绿木霉(trichoderma citrinoviride),菌株名为kn-t108,其微生物保藏编号为cctcc m 20221540。

4、本发明的技术方案之二提供了一种木霉制剂,其包含所述的桔绿木霉或其孢子粉。优选所述木霉制剂为油悬浮剂、可湿性粉剂或颗粒剂。

5、所述油悬浮剂,其还包括大豆油、石蜡油和卵磷脂。优选地,所述油悬浮剂中,孢子粉:大豆油:石蜡油:卵磷脂的质量比为(4-6):(50-60):(20-25):(14-16)。更优选地,所述孢子粉的孢子含量大于等于20亿孢子/g。

6、所述可湿性粉剂,其还包括木质磺酸钠、白炭黑、十二烷基磺酸钠和麦芽糊精。优选地,所述可湿性粉剂中,孢子粉:木质磺酸钠:白炭黑:十二烷基磺酸钠:麦芽糊精的质量比为(10-15):(4-6):(4-6):(6-8):(60-80)。更优选地,所述孢子粉的孢子含量大于等于20亿孢子/g。

7、所述颗粒剂,其还包括高岭土、玉米淀粉、云母粉、腐殖酸和聚谷氨酸。优选地,所述颗粒剂中,孢子粉:高岭土:玉米淀粉:云母粉:腐殖酸:聚谷氨酸的质量比为(3-8):(60-80):(20-30):(10-20):(5-10):(1-5)。更优选地,所述孢子粉的孢子含量大于等于10亿孢子/g。

8、本发明的技术方案之三提供了一种所述桔绿木霉或所述木霉制剂在抑制病原菌中的应用,或所述桔绿木霉在制备抑制病原菌的制剂中的应用。优选地,所述病原菌选自马铃薯黑痣病病原菌、西瓜枯萎病病原菌、番茄灰霉病病原菌、苹果根腐病病原菌和苜蓿根腐病病原菌。

9、本发明的技术方案之四提供了一种所述桔绿木霉或所述木霉制剂在秸秆腐熟中的应用,或所述桔绿木霉在制备秸秆腐熟的制剂中的应用。

10、本发明的技术方案之五提供了一种所述桔绿木霉或所述木霉制剂在防治植物病原线虫中的应用,或所述桔绿木霉在制备防治植物病原线虫的制剂中的应用。优选地,所述植物病原线虫包括根结线虫和大豆孢囊线虫。

11、本发明的技术方案之六还提供一种所述木霉制剂的制备方法,该方法包括以下步骤:

12、(1)将所述桔绿木霉菌接种至培养液,培养获得孢子悬浮液;所述培养液为pdb培养液;所述孢子的浓度为108-109孢子/ml;

13、(2)将所述孢子悬浮液在培养基上发酵,干燥获得固体发酵物;优选所述培养基包括:毛竹粉600-800g、麸皮100-200g、豆粕100-200g、麦芽糊精50-100g、大豆油30-50g,无菌水900-1500ml;

14、(3)粉碎所述发酵物,获得孢子粉;

15、(4)将所述孢子粉制成油悬浮剂、可湿性粉剂或颗粒剂。

16、所述制备方法包括以下条件的一种或多种:

17、(a)pdb培养液的配方为:马铃薯200g/l,葡萄糖20g/l,余量为水;

18、(b)步骤(1)中,培养的温度为28℃,培养在振荡下进行3-4天;

19、(c)步骤(2)中,发酵的温度为28℃,发酵12-15天,干燥2-3天得到固体发酵物。

20、在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实例。

21、本发明的积极进步效果在于:

22、(1)此桔绿木霉菌株从马铃薯黑痣病病菌核中分离得出,对作物、土壤安全无污染,同时,对于马铃薯黑痣病病原菌、西瓜枯萎病病原菌、番茄灰霉病病原菌、苹果根腐病病原菌和苜蓿根腐病病原菌具有较好的拮抗和重寄生作用,其抑菌效果均达到52%以上,其中对番茄灰霉病原菌抑菌效果高达71.93%。

23、(2)此桔绿木霉菌株对小麦秸秆进行处理具有较好的腐熟效果,处理后失重率达到42.61%。

24、(3)此桔绿木霉菌株对根结线虫和大豆孢囊线虫进行处理具有较好的致死效果,发酵液上清处理线虫36h后可分别达到100%和95.8%的死亡率。

25、(4)包含此桔绿木霉孢子粉的木霉制剂在田间防治土传病害效果高且稳定,适用于农业绿色防控。其中,此桔绿木霉颗粒剂田间防治马铃薯黑痣病效果可高达74.53%。

26、生物材料保藏信息

27、本发明的桔绿木霉,已于2022年9月30日保藏在中国典型培养物保藏中心(cctcc),保藏地址:中国武汉,武汉大学,邮编430072,保藏编号为cctcc m 20221540,培养物名称是kn-t108,分类命名是桔绿木霉(trichoderma citrinoviride)。

当前第1页1 2 
当前第1页1 2 
网友询问留言 留言:0条
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1