作为生物标志物的纤毛蛋白及其使用方法

背景技术：

1、纤毛(cilia)是一种从内皮细胞(ec)的顶端腔表面伸出的基于微管的细胞器，被广泛认为是低流量传感器。先前的报告表明，在高剪切应力下，ec表面的纤毛将会损失，而最近的证据表明，脱纤毛化(deciliation)，即物理去除细胞表面的纤毛是哺乳动物细胞中纤毛损失的主要机制。

2、因此，需要新的标志物以及检测由高或低血管流量所引起的变化的方法，上述由高或低血管流量所引起的变化导致内皮损伤或功能障碍或血管损伤。

技术实现思路

1、内皮细胞上表达的纤毛及其相关蛋白在遇到湍流血流时将损失，从而导致纤毛从细胞中被去除，并在红细胞和体液中被检测到。因此，这种游离纤毛可以用作血液中流动改变的生物标志物，其与血管功能障碍和损伤有关。

2、一方面，本公开提供了检测有需要的对象中内皮损伤或功能障碍或血管损伤的方法，该方法包括：检测对象生物样品中一个或多个纤毛标志物，其中在生物样品中检测到相较于对照更高水平的纤毛表明内皮损伤或功能障碍或血管损伤。

3、另一方面，本公开提供了试剂盒，其包含：能与至少一个纤毛标志物结合的至少一种抗体，以及使用说明书。该试剂盒还可包含至少一种具有可检测标记物的第二试剂。这样的一种或多种抗体可以结合选自下组的纤毛标志物：arl13b、γ-微管蛋白、ift88、倒位蛋白、核因子-红细胞因子2相关因子2(nrf2)和乙酰化-α-微管蛋白。

4、另一方面，本公开提供了检测患有镰状细胞病(scd)的对象中与scd相关的闭塞事件的方法，该方法包括：检测对象第一生物样品中的一个或多个纤毛标志物。

5、在另一方面，本公开提供了检测对象样品中红细胞纤毛的方法，该方法包括从对象获得血液样品；从样品中分离红细胞(rbc)，和检测红细胞表面的一个或多个纤毛标志物。

技术特征：

1.一种检测有需要的对象中内皮损伤或功能障碍或血管损伤的方法，所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其中，检测一个或多个标志物包括：

3.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述检测通过酶联免疫测定(elisa)进行。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述检测通过流式细胞术进行。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述一个或多个纤毛标志物是纤毛标志物或基体纤毛标志物。

6.如权利要求5所述的方法，其中，一个或多个标志物选自下组：arl13b、γ-微管蛋白、ift88、倒位蛋白、核因子-红细胞因子2相关因子2(nrf2)和乙酰化-α-微管蛋白。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述方法包括检测选自arl13b，ift88，乙酰化-α微管蛋白和nrf2的一个或多个纤毛标志物，或者选自γ-微管蛋白或倒位蛋白的一个或多个基体标志物。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括：

9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述内皮损伤或功能障碍或血管损伤与选自镰状细胞贫血、动脉粥样硬化、中风、动静脉畸形、静脉曲张、肿瘤脉管系统改变、出血、先兆子痫和高血压的疾病相关。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述生物样品是选自下述的样品：血清、血液、尿液、脑脊液、精液、唾液、泪液、滑液、母乳、胆汁、羊水、房水、阴道润滑液、汗液、淋巴液和骨髓。

11.一种试剂盒，其包括：与至少一个纤毛标志物结合的至少一种抗体，以及使用说明书。

12.如权利要求11所述的试剂盒，其中，所述试剂盒还包含至少一种具有可检测标记物的二抗。

13.如权利要求11或12所述的试剂盒，其中，所述一种或多种抗体结合选自下组的纤毛标志物：arl13b、γ-微管蛋白、ift88、倒位蛋白、核因子-红细胞因子2相关因子2(nrf2)和乙酰化-α-微管蛋白。

14.一种检测患有镰状细胞病(scd)的对象中与scd相关的闭塞事件的方法，所述方法包括：

15.一种检测对象样品中红细胞上纤毛的方法，其中，所述方法包括：

16.如权利要求15所述的方法，其中，检测到所述rbc上纤毛表明血管受损。

17.如权利要求15或16所述的方法，其中，所述方法还包括：

18.如权利要求14所述的方法，所述方法还包括：

19.如权利要求14-18中任一项所述的方法，其中，所述检测一个或多个标志物包括：

20.如权利要求19所述的方法，其中，所述方法还包括：

21.如权利要求20所述的方法，其中，所述纤毛标志物的抗体或二抗与固体支持物连接。

22.如权利要求14-21中任一项所述的方法，其中，所述检测通过酶联免疫测定(elisa)。

23.如权利要求14-21中任一项所述的方法，其中，所述检测通过流式细胞术，任选地，所述纤毛标志物的抗体或二抗与珠连接。

24.如权利要求14-23中任一项所述的方法，其中，所述一个或多个纤毛标志物是纤毛标志物或基体纤毛标志物。

25.如权利要求24所述的方法，其中，一个或多个标志物选自下组：arl13b、γ-微管蛋白、ift88、倒位蛋白、核因子-红细胞因子2相关因子2(nrf2)和乙酰化-α-微管蛋白。

26.如权利要求14-25中任一项所述的方法，其中，所述方法包括检测选自arl13b，ift88，乙酰化-α微管蛋白和nrf2的一个或多个纤毛标志物，或者选自γ-微管蛋白或倒位蛋白的一个或多个基体标志物。

27.如权利要求14-26中任一项所述的方法，其中所述方法还包括：

28.如权利要求14-27中任一项所述的方法，其中，所述闭塞事件包括血管壁弱化或出血倾向增加。

29.如权利要求1-10或14-27中任一项所述的方法，所述方法包括从所述对象获得样品。

技术总结
本发明提供了用于检测样品中纤毛标志物的方法和试剂盒及其用于检测和治疗对象中内皮损伤或功能障碍或血管损伤的用途。一方面，本公开提供了检测有需要的对象中内皮损伤或功能障碍或血管损伤的方法，该方法包括：检测对象生物样品中一个或多个纤毛标志物，其中在生物样品中检测到相较于对照更高水平的纤毛表明内皮损伤或功能障碍或血管损伤。

技术研发人员：R·拉姆钱德兰
受保护的技术使用者：威斯康星州医药大学股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/24