液态转谷氨酰胺酶酶制剂的制作方法

本发明涉及液态转谷氨酰胺酶酶制剂和交联蛋白质的制造方法。更详细而言，本发明涉及热稳定性提高的液态转谷氨酰胺酶酶制剂和转谷氨酰胺酶的热稳定性提高的反应体系中的交联蛋白质的制造方法。

背景技术：

1、转谷氨酰胺酶是分配ec 2.3.2.13作为ec编号的酰基转移酶，通过催化蛋白质中的谷氨酰胺残基的γ-羧酰胺基与赖氨酸残基的ε-氨基之间的酰基转移反应而使蛋白质交联。根据该特性，转谷氨酰胺酶是在食品蛋白质等的改性中利用性高的酶。

2、含有转谷氨酰胺酶作为有效成分的酶制剂期望通过以稳定性高的配方进行制剂化，从而能够在食品蛋白质等的改性中以高的酶利用效率使用。

3、例如，专利文献1中记载了通过使转谷氨酰胺酶等乳蛋白质交联和/或修饰酶包含于多元醇-水悬浮液中而稳定化的液态酶制剂，所述多元醇-水悬浮液包含25％～100％(w/w)的多元醇且具有4.4～5.1的范围内的ph值；专利文献2中记载了通过使转谷氨酰胺酶同时包含5重量％以上的选自甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸盐、天冬氨酸盐和有机酸盐中的1种或2种以上而稳定化的液态酶制剂。

4、现有技术文献

5、专利文献

6、专利文献1：国际公开第2013/064736号

7、专利文献2：国际公开第2019/182123号

技术实现思路

1、发明所要解决的技术问题

2、迄今为止报道的转谷氨酰胺酶的液态酶制剂的配方限制严格，或者通过使用氨基酸、有机酸等有机化合物作为稳定剂而将酶制剂的用途限制为仅食品用，因此期望新的稳定化方法。

3、因此，本发明的目的在于提供一种转谷氨酰胺酶的新的稳定化方法。

4、用于解决技术问题的技术方案

5、本发明人为了解决上述技术问题进行了深入研究，结果发现，转谷氨酰胺酶在碳酸钠和/或硫酸钠的存在下且在ph6.5以下的条件下呈现优异的稳定性。本发明是基于该见解进一步反复研究而完成的。即，本发明提供下述揭示的方式的发明。

6、项1.一种液态转谷氨酰胺酶酶制剂，其包含(a)转谷氨酰胺酶和(b)碳酸钠和/或硫酸钠，25℃的条件下的ph为6.5以下。

7、项2.根据项1所述的酶制剂，其中，相对于所述(a)成分1u，包含0.001～1mmol所述(b)成分。

8、项3.根据项1或2所述的酶制剂，其用作蛋白质交联化剂。

9、项4.一种交联蛋白质的制造方法，其包括在(b)碳酸钠和/或硫酸钠的存在下且25℃的ph为6.5以下的条件下使(a)转谷氨酰胺酶作用于蛋白质的工序。

10、项5.根据项4所述的制造方法，其中，相对于所述(a)成分1u，使用0.001～1mmol所述(b)成分。

11、项6.根据项4或5所述的制造方法，其中，在45℃以上的温度下进行所述工序。

1.一种液态转谷氨酰胺酶酶制剂，其特征在于，包含(a)转谷氨酰胺酶和(b)碳酸钠和/或硫酸钠，25℃的ph为6.5以下。

2.根据权利要求1所述的酶制剂，其中，所述酶制剂中，相对于所述(a)成分1u，包含0.001～1mmol所述(b)成分。

3.根据权利要求1所述的酶制剂，其中，所述酶制剂用作蛋白质交联化剂。

4.一种交联蛋白质的制造方法，其特征在于，包含在(b)碳酸钠和/或硫酸钠的存在下且25℃的ph为6.5以下的条件下使(a)转谷氨酰胺酶作用于蛋白质的工序。

5.根据权利要求4所述的制造方法，其中，相对于所述(a)成分1u，使用0.001～1mmol所述(b)成分。

6.根据权利要求4所述的制造方法，其中，在45℃以上的温度下进行所述工序。