一种立枯丝核菌GH64家族糖苷水解酶及其应用

本发明属于基因工程，尤其涉及一种立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶及其应用。

背景技术：

1、立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)主要侵染土壤中正在发芽的植物种子，也可以感染豆荚、根、叶和茎，常在水稻、玉米和小麦等禾本科作物上引起纹枯病。病害从茎基部开始向上发展，在叶鞘上形成云纹状浅褐色至黑褐色病斑，严重时还会侵染茎秆，造成茎节腐烂引起倒伏、枯穗等症状。近年来，生物防治成为国内外研究领域的热点之一，充分研究病原菌具诱抗活性效应子的功能与机制，对研究治理纹枯病的新策略具有重大意义。

技术实现思路

1、本发明所述的gh64家族糖苷水解酶5093的核苷酸序列如seq id no.1所示，其氨基酸序列如seq id no.2所示。

2、5093核苷酸序列如seq id no.1所示：

3、atgggtcgtacattcacggtctataatgcatgcccattcactgtttggcccgctatcttcactgacctgaacgttggctcggctgttcccgcaatcga

4、aaacggatgggaagcaccagcgttctcaaagcgctccttcaccgttcctgacaactggaaagccggacgcatctggggtcgcacccaatgtga

5、tttctcccagaacccaggaatcaagtcctgtctcactggtggatgtaatggtggattggtgtgcgataacaagactggggttggccttccgccggt

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10、5093氨基酸序列如seq id no.2所示(具体为mktavilaaiagsalgrtftvynacpft vwpaiftdlnvgsavpaiengweapafskrsftvpdnwkagriwgrtqcdfsqnpgikscltggcngglvcdnktgvglppvtfaeftlgadlqdyvdvslvdgfnlpmrisnnggcgtaectvnlnkdcpeplrgpldtngdvaacksaclaqidnpsdspscctggfqkpstcpasgvlyyaffknrcpnsyvyaydessgtalwtcpsskkvdytvtfcp)，n端15个氨基酸为信号肽；分子量大小为45kd。

11、本发明的目的之一在于提供一种立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶，所述糖苷水解酶的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述糖苷水解酶的氨基酸序列如seq id no.2所示。

12、本发明的目的之二在于提供一种含有上述立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶的表达载体。

13、优选地，所述表达载体为pet28a-sumo。

14、本发明的目的之三在于提供一种含有上述表达载体的菌株。

15、优选地，所述菌株为bl21(de3)。

16、本发明的目的之四在于提供上述立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶在禾本科作物纹枯病防治中的应用。

17、优选地，所述禾本科作物为玉米。

18、本发明的目的之五在于提供一种用于防治禾本科作物纹枯病的产品，所述产品中含有上述立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶。

19、优选地，所述产品为水剂、可湿性粉剂、粉剂、颗粒剂中的任一种。

20、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

21、本发明首次揭示了立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶5093的生物学功能，利用基因组分析及生物信息学分析筛选具有gh64糖苷水解酶家族结构域，从而确定其在侵染寄主植物过程中发挥一定的作用。新型糖苷水解酶是gh64家族，通过原核表达进一步验证5093对玉米具有很好的诱导抗病性能力。

技术特征：

1.一种立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶，其特征在于，所述糖苷水解酶的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶，其特征在于，所述糖苷水解酶的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.一种含有权利要求1或2中所述立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶的表达载体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为pet28a-sumo。

5.一种含有权利要求4中所述表达载体的菌株。

6.根据权利要求5所述的菌株，其特征在于，所述菌株为bl21(de3)。

7.权利要求1或2所述的立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶在禾本科作物纹枯病防治中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述禾本科作物为玉米。

9.一种用于防治禾本科作物纹枯病的产品，其特征在于，所述产品中含有权利要求1或2中所述的立枯丝核菌gh64家族糖苷水解酶。

10.根据权利要求9所述的产品，其特征在于，所述产品为水剂、可湿性粉剂、粉剂、颗粒剂中的任一种。

技术总结
本发明公开了一种立枯丝核菌GH64家族糖苷水解酶及其应用，属于基因工程技术领域。该酶ID为5093，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用上述基因构建重组菌株，进行原核表达，发现糖苷水解酶5093具有诱导抗病性的能力，该酶在禾本科作物纹枯病防治中发挥重要作用，为开发新型生物农药奠定了基础。

技术研发人员：刘佳悦,李志勇,郝志敏,曾凡力,董金皋,董志平,毛亚楠,刘玉卫
受保护的技术使用者：河北省农林科学院谷子研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11