一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物及其应用

本发明涉及分子诊断和分子生物学，更具体的说是涉及一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物及其应用。

背景技术：

1、不明原因复发性流产是指女性与同一性伴侣连续两次及以上发生自然流产，且与染色体、解剖结构、内分泌、自身免疫异常和生殖道疾病等因素无关，其发病率约占自然流产的40％～50％，是临床上育龄女性常见的妊娠疾病之一。如果可以提前预测此次流产的发生并及时进行干预或可能减少一部分不明原因复发性流产的发生。

2、目前临床上主要通过超声指标以及血清生化标志物水平预测流产的发生，然而血清hcg与孕酮水平用来预测流产的效果不佳，有文献报道血清ca125可用来预测流产，其敏感性为90％，特异性为88％，但血清ca125的水平与多种疾病相关，其预测流产的特异性并不高。也有研究发现超声指标中胎儿心动过缓是预测流产的重要指标，其敏感性可达84.18％，然而其对不明原因复发性流产预测的灵敏性欠佳。

3、微小rna(microrna,mirna)是一类存在于动植物体内、约21-25个核苷酸内源性单链非编码rna，目前已有报道表明血清中mirna与不明原因流产有较大的相关性。因此，本发明从临床样本出发，探究免疫功能失调及血清中mirna与不明原因复发性流产的发病机制相关性，初步明确其发病机制，为临床不明原因复发性流产的治疗提供参考依据。

4、综上，如何提供一种新型的mirna用于预测不明原因复发性流产的血清标志物是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物及其应用。

2、现有技术主要通过超声指标以及血清生化标志物水平来预测流产的发生，然而由于血清hcg与孕酮水平用来预测流产的效果不佳和超声指标中胎儿心动过缓对不明原因流产预测的灵敏性欠佳，目前尚缺乏有效的预测指标，本发明提供了一种血清外mirna用于预测不明原因复发性流产的生物标志物及应用。

3、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

4、一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物，所述生物标志物为mir-142-3p，其核苷酸序列如下：

5、aagtgaatcccagctgatag，seq id no.1。

6、进一步的，mir-142-3p来自不明原因复发性流产患者未流产时的血清中。

7、相比于健康人群，不明原因复发性流产患者血清中mir-142-3p表达为上调。

8、用于检测上述生物标志物的引物对，核苷酸序列如下：

9、前引物：5‘-cgccgtgtagtgtttcctac-3’，seq id no.2；

10、后引物：5‘-cagtgcagggtccgaggt-3’，seq id no.3。

11、该血清标志物尤其适用于预测或辅助预测，诊断或辅助诊断不明原因复发性流产患者在胚胎停止发育前的不良结局。

12、上述的生物标志物在制备预测或诊断不明原因复发性流产的产品中的应用。

13、进一步的，所述产品包括基于高通量测序方法和/或基于定量pcr方法和/或基于探针杂交方法检测所述生物标志物表达水平的检测装置。

14、例如检测装置、试剂盒和设备，这类装置例如：如寡核苷酸探针或其集成、芯片基片或检测基板上的高通量mirna检测芯片、以及微流控检测芯片等。

15、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：

16、1.本发明通过不明原因复发性流产患者未流产时与继续妊娠患者早孕期血清mirnas转录组学测序，筛选出具有差异性表达的mirnas，并进行验证，证明血清中mir-142-3p作为预测不明原因复发性流产的生物分子标志物。

17、2.本发明收集的标本为未发生流产时的母体外周血，能更好的在胚胎停止发育前预测不良结局，及时的进行干预与治疗，有望减少不必要的胚胎丢失从而改善妊娠结局。

18、3.本发明发现mir-142-3p可能与流产的发生机制相关，为今后的临床治疗与干预提供了新的思路与证据支持。

技术特征：

1.一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为mir-142-3p，其核苷酸序列如下：

2.如权利要求1所述的一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物，其特征在于，mir-142-3p来自不明原因复发性流产患者未流产时的血清中。

3.用于检测权利要求1所述生物标志物的引物对，其特征在于，核苷酸序列如下：

4.权利要求1或2任一所述的生物标志物在制备预测或诊断不明原因复发性流产的产品中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，所述产品包括基于高通量测序方法和/或基于定量pcr方法和/或基于探针杂交方法检测所述生物标志物表达水平的检测装置。

技术总结
本发明公开了一种用于预测不明原因复发性流产的生物标志物及其应用。属于分子诊断和分子生物学技术领域。对比45例不明原因复发性流产患者血清检测发现，不明原因复发性流产患者血清中miR‑142‑3p的表达水平明显高于正常妊娠妇女。相比于正常妊娠妇女，不明原因复发性流产患者的外周血CD4<supgt;+</supgt;CD25<supgt;+</supgt;Treg细胞水平显著升高。本发明通过检测miR‑142‑3p的表达水平，进而对不明原因复发性流产患者做出预判断，使miR‑142‑3p可作为不明原因复发性流产临床诊断评估的重要指标。

技术研发人员：李丽
受保护的技术使用者：中国科学院大学深圳医院（光明）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15