一种核酸纯化分离方法及设备与流程

本发明涉及核酸纯化分离的，特别是涉及一种核酸纯化分离方法及设备。

背景技术：

1、各种形式的核酸应用于多种领域，例如，在重组核酸技术领域中，需要将核酸以探针、基因组核酸或质粒核酸的形式使用。

2、此外，在诊断学领域中，核酸以多种形式应用于多种目的，例如，在检测和诊断人类病原体时，常常使用核酸探针，同样，核酸也用于检测遗传性病症，并且还用于检测食品污染物，此外，出于从绘制基因图谱到克隆或重组表达的多种目的，也常常用核酸对所需核酸进行定位、识别和分离。

3、发明专利cn101103109a涉及的用于分离和纯化核酸的方法，包括以下步骤：(1)向生物材料中加入裂解溶液以制备包含核酸的样品溶液，以及，向样品溶液加入水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液，从而制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液；(2)使包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触，从而将核酸吸附在固相上；(3)使洗涤液与固相接触，从而在核酸被吸附在固相上的状态下洗涤固相；以及(4)使固相与回收液接触，从而使核酸从固相解吸；其中，在步骤(1)中，水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液至少分成两次加入，但是该方法在实际操作过程中，每次溶液添加后需要经过摇动、搅拌、抽吸和排出等动作，而试验员进行摇动、搅拌、抽吸和排出等动作时，其效果难以保证。

4、发明专利cn112195176a涉及的从生物材料中分离核酸纯化固体的方法，步骤：(1)，将含有裸露核酸的液体与沉淀剂混合；在室温下，离心，将上清液倒入新离心管中；(2)向新离心管中加入异丙醇，混匀，在室温下，静置，离心，有白色沉淀生成，弃去白色沉淀以外的其它；洗涤，得到rna固体，或rna与dna的混合固体，保存；本发明用匀浆解离剂匀浆生物材料，不需要加热就可以简单获得含有裸露核酸的液体，用于提取rna固体和dna固体；其中，液体与沉淀剂的混合需要离心和搅拌等动作以保证反应充分，而这些动作需要使用不同的设备进行完成，在进行样品转移时浪费时间，且转移过程中也会影响试验结果。

5、同时在对溶液进行添加时，需要根据样品溶液的量来确定水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加量，因此每次添加溶液的体积需要进行定量以避免添加过多或过少，而普通的吸管难以准确定量添加，并且在进行摇动、搅拌、抽吸和排出等动作时，溶液中的溶质容易粘在试管的内壁，进而使试管内的反应不充分。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提供一种操作便捷且高效的核酸纯化分离方法及设备。

2、本发明的一种核酸纯化分离方法，所述核酸纯化分离方法包括以下步骤：

3、s1：向生物材料中加入裂解溶液，以制备包含核酸的样品溶液；

4、s2：将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上，添加水溶性有机溶剂，使核酸纯化分离设备对样品溶液试管中的溶液进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作，制备出样品溶液；

5、s3：使所述包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触，从而将核酸吸附在所述固相上；

6、s4：使洗涤液与所述固相接触，从而在核酸被吸附在所述固相上的状态下，洗涤所述固相；

7、s5：使所述固相与回收液接触，从而使核酸从所述固相解吸；

8、在步骤s2中旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作按照如下步骤进行：

9、s201：将包含核酸的样品溶液试管插入到核酸纯化分离设备中的自转组件上，在核酸纯化分离设备中压力传感器的辅助下测量出样品溶液试管中样品溶液的体积；

10、s202：依据压力传感器的检测数值，核酸纯化分离设备中注射组件将相对应体积的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液注射到样品溶液试管中；

11、s203：注射完成后，核酸纯化分离设备中的摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使样品溶液试管进行摇动和自转，核酸纯化分离设备中的自转组件和吸排组件配合使溶液进行搅拌；

12、s204：在步骤s203中样品溶液试管进行摇动的过程中，核酸纯化分离设备中的电磁铁和吸排组件配合对样品溶液试管中的溶液进行完全的抽吸和排出，并且通过压力传感器检测数值的变化，核酸纯化分离设备自行调整电磁铁的吸力大小，进而调节吸排组件的抽吸量。

13、一种核酸纯化分离设备利用所述的一种核酸纯化分离方法制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液，包括底座、摇动组件、自转组件、吸排组件和注射组件，所述摇动组件固定设置于底座的上端，所述底座顶端设置有竖板，所述竖板靠近摇动组件的一端设置有电磁铁，所述底座顶端还设置有圆环，所述圆环内侧壁设置有环形齿带，所述圆环的外侧设置有控制器；

14、所述摇动组件包括转盘，所述转盘固定设置于电机的输出端，所述电机固定设置于底座的顶端；

15、所述自转组件包括转筒，所述转筒转动设置于转盘上，所述转筒顶端设置有试管，所述转筒底端固定设置有齿轮；

16、所述吸排组件包括吸筒，所述吸筒内设置有圆杆，所述圆杆远离吸筒的一端固定设置有铁磁块，所述圆杆位于吸筒内的一端固定设置有移动盘，所述圆杆外端设置有压力弹簧，所述压力弹簧与移动盘之间设置有压力传感器；

17、所述注射组件包括蠕动泵，所述蠕动泵位于自转组件的上方。

18、优选的，所述摇动组件上设置有多组自转组件，所述摇动组件上还设置有多组吸排组件，每组所述吸排组件对应一组自转组件，所述摇动组件位于圆环内部，所述齿轮与环形齿带进行啮合传动，所述转盘的底端与圆环的顶端不接触，所述齿轮与电机不接触。

19、优选的，所述转筒顶端设置有凹槽，所述试管位于凹槽内，所述凹槽底端设置有固定底垫，所述凹槽内壁上设置有橡胶卡环，所述试管的底端卡在固定底垫中，所述试管穿过橡胶卡环。

20、优选的，所述吸筒固定设置在转盘顶端，所述移动盘的外端设置有密封垫，所述吸筒远离铁磁块的顶端固定设置有管道，所述压力弹簧位于吸筒内，所述管道与吸筒连通，所述管道顶端设置有一次性吸管。

21、优选的，所述一次性吸管的一端插入到管道内，所述一次性吸管的另一端插入到试管内，所述一次性吸管插入到试管的一端与试管内壁不接触，所述一次性吸管插入到试管的末端设置为斜面，所述一次性吸管插入到试管的一端设置为倾斜状态，所述一次性吸管远离管道的一侧设置有铁磁片，所述一次性吸管靠近试管一侧的顶部弯折处具有弹性，所述铁磁片密封在一次性吸管的管壁内。

22、优选的，所述蠕动泵固定设置于安装架远离转盘中心的一侧，所述安装架固定设置于安装板靠近转盘的一侧，所述安装板固定设置于底座的顶端，所述安装架顶端设置有储液罐，所述储液罐的底端设置有软管，所述软管穿过蠕动泵，所述软管的底端设置有喷头，所述喷头位于试管上方。

23、优选的，所述转盘的顶端中心固定设置有稳定杆，所述稳定杆与稳定盘转动连接，所述稳定盘固定设置于安装架靠近转盘中心的一侧。

24、优选的，所述底座的顶端设置有环形槽，所述环形槽内设置有玻璃罩，所述玻璃罩的顶端外部固定设置有把手，所述玻璃罩位于摇动组件、自转组件、吸排组件和注射组件的外端。

25、本发明的有益效果：

26、1、本发明通过将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上进行有机溶剂的添加，通过核酸纯化分离设备的辅助使有机溶剂添加后进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作，使有机溶剂和包含核酸的样品溶液混合更加充分，并且通过机器代替人力进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作，降低了时间和人力成本，提高了设备使用的便捷性。

27、2、本发明通过设置环形齿带、电磁铁、摇动组件、自转组件和吸排组件，摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使试管进行摇动和自转，自转组件和吸排组件配合使试管中的溶液进行搅拌，电磁铁和吸排组件配合对试管中的溶液进行抽吸和排出，使每次水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加后进行摇动、搅拌、抽吸和排出的操作。

28、3、本发明通过设置压力传感器和控制器，压力传感器通过检测液面压力的大小，计算出试管中初始样品溶液体积，进而使控制器确定该试管水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液每次的添加量，保证了试管中溶液的添加更加精确，并且随着试管中溶液的添加，控制器增大电磁铁的吸力，保证试管中溶液的抽吸和排出效果，提高了设备试验的准确性。