含氮稠杂环类化合物晶型及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐，该盐的晶型及其制备方法和应用。

背景技术：

1、富马酸盐，中文名：9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐，英文名：9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(isopropoxyca rbonyl)-1-methyl]ethyl]amino]phenoxyphosphinyl]methoxy]propanebase]adenine fu marate，结构式如式①所示：

2、

3、9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐①是一种核苷类逆转录酶抑制剂，是替诺福韦(pmpa)的前药。pmpa结构类似天然核苷单磷酸，在体内迅速转化为活性代谢产物pmpa二磷酸(pmpapp)；pmpapp与天然5′三磷酸脱氧腺苷竞争，掺入到病毒dna链中，但由于pmpapp缺乏3′oh基团，无法再进行5′，3′磷酸二酯键偶联，从而导致dna链延长受阻，最终阻断病毒的复制。研究证明pmpa具有抗人免疫缺陷病毒(hiv)和乙型肝炎病毒(hbv)活性。

4、但pmpa含有磷酸基团，在生理ph条件下通常带负电荷而极性太强不易通过生物膜，导致该类药物口服生物利用度差、组织分布系数低，并且具有一定的肾毒性。因此在开发该类药物时，需要运用前药原理将磷酸基团的负电荷掩蔽，消除该类药物的不足。吉利德公司开发的pmpa的双酯前药，富马酸pmpa二吡伏酯(tenofovirdisoproxilfumarate,tdf)分别于2001年被美国食品药品管理局(fda)批准用于治疗hiv感染。

5、tdf在一定程度上显著改善了pmpa的药代动力学属性，但它在体内还是很快被血浆中广泛存在的非特异性酯酶水解，尤其是在肠黏膜上皮细胞碳酸酯酶作用下迅速水解释放出pmpa。血浆中高浓度pmpa由于其膜透过性差而被迅速排出体外，难以在感染部位保持足够的浓度；此外，pmpa是肾近端小管上皮细胞有机阴离子转运体(hoat)的底物，血浆中高浓度pmpa易在肾近端小管上皮细胞中累积，造成一定的肾毒性风险。

6、而新一代的单磷酰胺单酯类前药克服了上述tdf的缺点，在血浆中很稳定，不易被酯酶水解；但被吸收进入细胞内；立即在丝氨酸蛋白酶(cathepsin a)以及体内特异性酰胺酶的作用下转化为pmpa，因此有更好的组织透过性及淋巴组织和细胞靶向性。吉利德公司开发的单磷酰胺单酯类前药gs7340(参考专利wo2013052094a2)已经顺利进入ⅲ期临床试验，结果显示gs7340与30倍剂量的tdf相比，还具有更强的抗病毒能力和更好的安全性。

7、9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐①和gs7340一样，在细胞内都会释放出活性成分pmpa。其辅助基团设计巧妙，结构上和gs7340只有一个甲基的区别，辅助基团在细胞内的脱落机制和方式与gs7340基本相同。可以预见，式①由于吸收和分布上优势，将比tdf等前药更为有效地发挥其活性成分pmpa的药效，作为最有潜力的新一代pmpa前药造福于广大患者。

8、本领域技术人员知道，药物的多晶型已经成为药物研究过程和药品成品质量控制及检测过程中必不可少的重要组成部分。对药物多晶型的研究有助于新药化合物生物活性的选择，有助于提高生物利用度，增进临床疗效，有助于药物给药途径的选择与设计，以及药物制剂工艺参数的确定，从而提高药品生产质量。同一药物晶型不同，生物利用度可能差异显著。同一种药物，晶型的生物活性有区别。获得一种生物活性更高，更适合医药应用的替诺福韦前药晶型是医药领域一直期待解决的技术问题。

技术实现思路

1、发明人提供了9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐及其制备方法和应用，通过深入研究富马酸盐的不同的聚集状态，得到了六种式①化合物富马酸盐的多晶型物，本发明旨在提供一种式①化合物富马酸盐新的适合药物开发的晶型及其制备方法。

2、本发明制备得到的式①化合物富马酸晶型ⅱ制备方法简单，晶型纯度高，化学状态稳定，将比tdf等前药更为有效地发挥其活性成分pmpa的药效，并在高温高湿条件下稳定，非常适合药用开发。

3、本发明的目的在于提供了式①化合物9-[(r)-2-[[(s)-[[[1-(异丙氧基羰基)-1-甲基]乙基]氨基]苯氧基氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富马酸盐。

4、

5、在本发明优选的方案中，晶型包括晶型ⅰ、晶型ⅱ、晶型ⅲ、晶型ⅳ、晶型ⅴ和晶型ⅵ。

6、其中，式①化合物富马酸盐晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.5±0.2°处具有衍射峰，或者在6.7±0.2°处具有衍射峰，或者在20.1±0.2°处具有衍射峰，或者在20.6±0.2°处具有衍射峰，或者在22.4±0.2°处具有衍射峰，或者在22.9±0.2°处具有衍射峰，或者在27.0±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

7、优选地，晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°和20.6±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为22.4±0.2°、22.9±0.2°、和27.0±0.2°处具有衍射峰，更优选还包含在2θ为10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°、31.5±0.2°和36.2±0.2°处具有衍射峰；

8、优选的，晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为为4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中两条，更优选包含三条；任选的，进一步还可以包含20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°中的至少一条，优选包含其中2条、3条、4条或5条；例如，

9、4.5±0.2°、6.7±0.2°；

10、6.7±0.2°、20.1±0.2°；

11、4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°；

12、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°；

13、4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°；

14、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°；

15、4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°；

16、优选的，晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°、31.5±0.2°或36.2±0.2°处中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；例如，

17、10.2±0.2°、11.2±0.2°；

18、11.2±0.2°、12.2±0.2°；

19、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°；

20、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°；

21、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°；

22、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°；

23、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°、31.5±0.2°；

24、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°、31.5±0.2°、36.2±0.2°；

25、优选的，晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱任选包含位于2θ为4.5±0.2°、6.7±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°、28.9±0.2°、31.5±0.2°或36.2±0.2°中的一处或多处衍射峰，

26、优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；例如，所述a的x-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：

27、4.5±0.2°、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°；

28、6.7±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°；

29、4.5±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°；

30、6.7±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°；

31、4.5±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°；

32、6.7±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°；

33、20.1±0.2°、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°；

34、20.6±0.2°、22.4±0.2°、22.9±0.2°、27.0±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、13.4±0.2°、18.6±0.2°、24.7±0.2°；

35、进一步优选地，晶型ⅰ的x-射线粉末衍射图谱基本如图1所示，其核磁共振氢谱如图1a所示。

36、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅰ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

37、式①化合物富马酸盐晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.2±0.2°处具有衍射峰，或者在10.0±0.2°处具有衍射峰，或者在14.9±0.2°处具有衍射峰，或者在19.8±0.2°处具有衍射峰，或者在24.7±0.2°处具有衍射峰，或者在29.7±0.2°处具有衍射峰，或者在34.8±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

38、优选地，晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°和19.8±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为24.7±0.2°、29.7±0.2°和34.8±0.2°处有特征峰，更优选还包含在2θ为7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°和33.3±0.2°处有衍射峰，

39、优选的，晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为为5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中两条，更优选包含三条；任选的，进一步还可以包含19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°中的至少一条，优选包含其中2条、3条、4条或5条；例如，

40、5.2±0.2°、10.0±0.2°；

41、10.0±0.2°、14.9±0.2°；

42、5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°；

43、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°；

44、5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°；

45、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°；

46、5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°；

47、优选的，晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°或33.3±0.2°处中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；例如，

48、29.7±0.2°、34.8±0.2°；

49、34.8±0.2°、7.1±0.2°；

50、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°；

51、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°；

52、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°；

53、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°、33.3±0.2°；

54、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°、33.3±0.2°；

55、优选的，晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱任选包含位于2θ为5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°或33.3±0.2°中的一处或多处衍射峰，

56、优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；例如，所述晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：

57、5.2±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°；

58、10.0±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°；

59、5.2±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°；

60、14.9±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°；

61、5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°；

62、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°；

63、5.2±0.2°、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°；

64、10.0±0.2°、14.9±0.2°、19.8±0.2°、24.7±0.2°、29.7±0.2°、34.8±0.2°、7.1±0.2°、17.9±0.2°、22.1±0.2°、24.0±0.2°；

65、进一步优选地，晶型ⅱ的x-射线粉末衍射图谱基本如图2所示，其核磁共振氢谱如图2a所示，其dsc图谱基本如图2b所示，其tga图谱如图2c所示；更进一步优选地，所述晶型ⅱ的dsc图谱在109～115℃范围内有一特征峰。

66、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅱ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

67、式①化合物富马酸盐晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.9±0.2°处具有衍射峰，或者在6.8±0.2°处具有衍射峰，或者在9.6±0.2°处具有衍射峰，或者在19.6±0.2°处具有衍射峰，或者在21.2±0.2°处具有衍射峰，或者在24.1±0.2°处具有衍射峰，或者在29.0±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

68、优选地，晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°和19.6±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为21.2±0.2°、24.1±0.2°和29.0±0.2°处有特征峰，更优选还包含在2θ为10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°和33.9±0.2°处有衍射峰，

69、优选的，晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为为4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中两条，更优选包含三条；任选的，进一步还可以包含19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°中的至少一条，优选包含其中2条、3条、4条或5条；例如，

70、4.9±0.2°、6.8±0.2°；

71、6.8±0.2°、9.6±0.2°；

72、4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°；

73、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°；

74、4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°；

75、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°；

76、4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°；

77、优选的，晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°或33.9±0.2°处中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；例如，

78、10.5±0.2°、11.5±0.2°；

79、11.5±0.2°、12.6±0.2°；

80、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°；

81、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°；

82、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°；

83、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°、33.9±0.2°；

84、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°、33.9±0.2°；

85、优选的，晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱任选包含位于2θ为4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°、18.5±0.2°或33.9±0.2°中的一处或多处衍射峰，

86、优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；例如，所述a的x-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：

87、4.9±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°；

88、9.6±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°；

89、6.8±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°；

90、9.6±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°；

91、4.9±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°；

92、6.8±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°；

93、4.9±0.2°、6.8±0.2°、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°；

94、9.6±0.2°、19.6±0.2°、21.2±0.2°、24.1±0.2°、29.0±0.2°、10.5±0.2°、11.5±0.2°、12.6±0.2°、15.0±0.2°、17.5±0.2°；

95、进一步优选地，晶型ⅲ的x-射线粉末衍射图谱基本如图3所示，其核磁共振氢谱如图3a所示，其dsc图谱基本如图3b所示，其tga图谱如图3c所示；更进一步优选地，所述晶型ⅲ的dsc图谱在107～115℃范围内有一特征峰；或者，晶型ⅲ的tga图在105～165℃具有3～5％的失重。

96、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅲ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

97、在本发明优选的方案中，晶型ⅲ为富马酸盐甲基叔丁基醚溶剂合物，残留溶剂结果显示含有约4.8％甲基叔丁基醚。

98、在本发明优选的方案中，晶型ⅲ中甲基叔丁基醚与富马酸盐的摩尔比约为1:3。

99、式①化合物富马酸盐晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.2±0.2°处具有衍射峰，或者在7.9±0.2°处具有衍射峰，或者在10.4±0.2°处具有衍射峰，或者在12.9±0.2°处具有衍射峰，或者在23.2±0.2°处具有衍射峰，或者在28.5±0.2°处具有衍射峰，或者在28.8±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

100、优选地，晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°和12.9±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为23.2±0.2°、28.5±0.2°和28.8±0.2°处有特征峰，更优选还包含在2θ为8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°、25.9±0.2°和29.5±0.2°处有衍射峰，

101、优选的，晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为为5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中两条，更优选包含三条；任选的，进一步还可以包含12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°中的至少一条，优选包含其中2条、3条、4条或5条；例如，

102、5.2±0.2°、7.9±0.2°；

103、7.9±0.2°、10.4±0.2°；

104、5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°；

105、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°；

106、5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°；

107、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°；

108、5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°；

109、优选的，晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°、25.9±0.2°或29.5±0.2°处中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；例如，

110、8.6±0.2°、12.2±0.2°；

111、12.2±0.2°、13.7±0.2°；

112、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°；

113、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°；

114、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°；

115、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°、25.9±0.2°；

116、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°、25.9±0.2°、29.5±0.2°；

117、优选的，晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱任选包含位于2θ为5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°、20.2±0.2°、21.2±0.2°、25.9±0.2°或29.5±0.2°中的一处或多处衍射峰，

118、优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；例如，所述a的x-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：

119、5.2±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°；

120、7.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°；

121、5.2±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°；

122、7.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°、12.2±0.2°；

123、5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°；

124、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°、12.2±0.2°；

125、5.2±0.2°、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°；

126、7.9±0.2°、10.4±0.2°、12.9±0.2°、23.2±0.2°、28.5±0.2°、28.8±0.2°、8.6±0.2°、12.2±0.2°、13.7±0.2°、18.1±0.2°；

127、进一步优选地，晶型ⅳ的x-射线粉末衍射图谱基本如图4所示，其核磁共振氢谱如图4a所示，其dsc图谱基本如图4b所示，其tga图谱如图4c所示；更进一步优选地，所述晶型ⅲ的dsc图谱在109～117℃范围内有一特征峰。

128、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅳ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

129、式①化合物富马酸盐晶型ⅴ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.1±0.2°处具有衍射峰，或者在7.0±0.2°处具有衍射峰，或者在10.3±0.2°处具有衍射峰，或者在10.9±0.2°处具有衍射峰，或者在18.2±0.2°处具有衍射峰，或者在20.6±0.2°处具有衍射峰，或者在25.9±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

130、优选地，晶型ⅴ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为5.1±0.2°、7.0±0.2°、10.3±0.2°和10.9±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为18.2±0.2°、20.6±0.2°和25.9±0.2°处有特征峰，更优选还包含在2θ为9.6±0.2°、12.0±0.2°、13.2±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、17.5±0.2°、19.4±0.2°和21.3±0.2°处有衍射峰；进一步优选地，其x-射线粉末衍射图谱基本如图5所示，其核磁共振氢谱如图5a所示。

131、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅴ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

132、式①化合物富马酸盐晶型ⅵ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.9±0.2°处具有衍射峰，或者在10.5±0.2°处具有衍射峰，或者在12.2±0.2°处具有衍射峰，或者在14.7±0.2°处具有衍射峰，或者在19.7±0.2°处具有衍射峰，或者在24.7±0.2°处具有衍射峰，或者在29.7±0.2°处具有衍射峰，优选包含上述衍射衍射峰中的任意2～5处，或者3～5处，或者3～6处，或者3～7处，更优选包含其中任意4处、6处或7处。

133、优选地，晶型ⅵ的x-射线粉末衍射图谱在2θ为4.9±0.2°、10.5±0.2°、12.2±0.2°和14.7±0.2°处具有衍射峰，优选还包含在2θ为19.7±0.2°、24.7±0.2°和29.7±0.2°处有特征峰，更优选还包含在2θ为9.7±0.2°、11.3±0.2°、14.2±0.2°、15.7±0.2°、18.1±0.2°、18.7±0.2°、21.8±0.2°和22.7±0.2°处有衍射峰；进一步优选地，其x-射线粉末衍射图谱基本如图6所示，其核磁共振氢谱如图6a所示。

134、在本发明优选的方案中，通过核磁共振氢谱显示，晶型ⅵ中游离碱与富马酸盐的摩尔比约为1:1。

135、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型i的制备方法，包括如下步骤：

136、1)将式①化合物富马酸盐分散或溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成混悬液；

137、2)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

138、其中：

139、步骤1)中所属有机溶剂选自异丙醇，正丙醇，四氢呋喃，丙酮和2-丁酮中的一种或几种；优选异丙醇、四氢呋喃和丙酮中的一种或几种。

140、步骤1)中所述温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

141、步骤2)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

142、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型i的另一制备方法，包括如下步骤：

143、1)将式①化合物游离碱溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成溶清液；

144、2)加入一定比例的富马酸成盐；

145、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

146、其中：

147、步骤1)有机溶剂选自甲酸乙酯，甲酸正丙脂，丙酮，四氢呋喃和乙酸乙酯中的一种或几种；优选丙酮和甲酸乙酯中的一种或两种。

148、步骤1)的温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

149、步骤2)所述富马酸的用量为游离碱摩尔量的1倍～3倍，优选1.2倍～1.5倍；

150、步骤3)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

151、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅱ的制备方法，包括如下步骤：

152、1)将式①化合物富马酸盐分散或溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成混悬液；

153、2)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

154、其中：

155、步骤1)所述有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸正丙脂和乙酸异丙酯中的一种或几种；优选乙酸乙酯。

156、步骤1)所述的温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

157、步骤2)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

158、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅱ的另一种制备方法，包括如下步骤：

159、1)将式①化合物游离碱溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成溶清液；

160、2)加入一定比例的富马酸成盐；

161、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

162、其中：

163、步骤1)所述的有机溶剂选自2-丁酮、丙酮、异丙醇、正丙醇中的一种或几种；优选2-丁酮和异丙醇中的一种或两种。

164、步骤1)的温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

165、步骤2)所述富马酸的用量为游离碱摩尔量的1倍～3倍，优选1.2倍～1.5倍；

166、步骤3)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

167、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅱ的另一种制备方法，包括如下步骤：

168、1)将式①化合物富马酸盐溶解在有机溶剂或有机溶剂与水组成的混合溶剂中，形成溶清液；

169、2)缓慢降温至析出固体；

170、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

171、其中：

172、步骤1)有机溶剂选自乙醇、甲醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇和水中的一种或几种；优选乙醇、水中的一种或两种。

173、步骤1)的温度条件为30～100℃，优选60～90℃；

174、步骤2)中缓慢降温的时间为3～24h，优选5～12h：

175、步骤3)中搅拌时间为1～5天，优选1～2天。

176、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅲ的制备方法，包括如下步骤：

177、1)将式①化合物富马酸盐分散或溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成混悬液；

178、2)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

179、其中：

180、步骤1)中所属有机溶剂选甲基叔丁基醚、乙二醇甲醚和乙二醇乙醚中的一种或几种；优选甲基叔丁基醚；

181、步骤1)中所述温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

182、步骤2)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

183、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅲ的另一制备方法，包括如下步骤：

184、1)将式①化合物富马酸盐溶解在有机溶剂或有机溶剂与水组成的混合溶剂中，形成溶清液；

185、2)缓慢降温至析出固体；

186、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

187、其中：

188、步骤1)有机溶剂选自甲基叔丁基醚、异丙醚、异丙醇和乙二醇乙醚中的一种或几种；优选甲基叔丁基醚、异丙醇和异丙醚中的一种或几种；

189、步骤1)的温度条件为30～100℃，优选60～90℃；

190、步骤2)中缓慢降温的时间为3～24h，优选5～12h：

191、步骤3)中搅拌时间为1～5天，优选1～2天。

192、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅳ的制备方法，包括如下步骤：

193、1)将式①化合物富马酸盐分散或溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成混悬液；

194、2)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

195、其中：

196、步骤1)中所属有机溶剂选自乙腈、正庚烷中的一种或几种；

197、步骤1)中所述温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

198、步骤2)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

199、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅳ的另一制备方法，包括如下步骤：

200、1)将式①化合物游离碱溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成溶清液；

201、2)加入一定比例的富马酸成盐；

202、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

203、其中：

204、步骤1)所述的有机溶剂选自乙腈、正庚烷中的一种或几种；

205、步骤1)的温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

206、步骤2)所述富马酸的用量为游离碱摩尔量的1倍～3倍，优选1.2倍～1.5倍；

207、步骤3)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

208、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅴ的制备方法，包括如下步骤：

209、1)将式①化合物富马酸盐分散或溶解在有机溶剂或有机溶剂组成的混合溶剂中，形成混悬液；

210、2)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

211、其中：

212、步骤1)中所属有机溶剂选自异丙醚、乙二醇甲醚中的一种或几种，优选异丙醚；

213、步骤1)中所述温度条件为0～80℃，优选10～50℃；

214、步骤2)中搅拌时间为1～7天，优选2～5天。

215、在本发明优选的方案中，式①化合物富马酸盐晶型ⅵ的制备方法，包括如下步骤：

216、1)将式①化合物富马酸盐溶解在水或有机溶剂与水组成的混合溶剂中，形成溶清液；

217、2)缓慢降温至析出固体；

218、3)继续搅拌过滤干燥获得目标产物；

219、其中：

220、步骤1)有机溶剂选自甲醇、乙醇和水中的一种或几种，优选水；

221、步骤1)的温度条件为30～100℃，优选60～90℃；

222、步骤2)中缓慢降温的时间为3～24h，优选5～12h：

223、步骤3)中搅拌时间为1～5天，优选1～2天。

224、另一方面，本发明还提供一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的式①化合物富马酸盐晶型以及一种或多种药学上可接受的载体的可药用的载体、稀释剂或赋形剂。

225、药学上可接受的载体指的是一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。其中相容性在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互混合，但不明显降低活性成分的药效；药学上可接受的载体包括纤维素及其衍生物如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、纤维素乙酸酯等，固体润滑剂如硬脂酸、硬脂酸镁等，植物油如豆油、蓖麻油、花生油、橄榄油等，多元醇如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等，乳化剂如吐温系列，润湿剂如十二烷基磺酸钠，明胶，滑石，着色剂，调味剂，稳定剂等。

226、所述的药物组合物，其可以是片剂或者是胶囊。

227、另一方面，本发明还提供一种式①化合物富马酸盐晶型或其可药用的组合物在吸收和分布上优势，将比tdf等前药更为有效地发挥其活性成分pmpa的药效。

228、本发明另一方面还涉及如式①所示化合物富马酸盐晶型或前述的药物组合物在制备治疗病毒感染性疾病的药物中的用途，优选在制备治疗乙型肝炎或乙肝病毒引起的疾病的药物中的用途。

229、本发明所述的式①化合物富马酸盐晶型，具有良好的溶解度和稳定性，这可提升其生物利用度，有利于其药物加工和在药物组合物中的使用，且本发明的制备方法简便易行，适合工业化生产。

230、本发明所述的式①化合物富马酸盐晶型ⅱ,具有优异的溶解性和稳定性，流动性好，药效显著，生物利用度高，纯度高等特点，并且基本不吸湿。而且工艺简单，重复性强，适合于工业化生产。