一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用的制作方法

本发明涉及烟草生物，特别涉及一株产acc脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用。

背景技术：

1、目前，随着化肥的大量使用，土壤板结及盐渍化问题愈发严重，严重影响了植物的正常生长。植物在逆境生长环境下，根部会通过acc会产生大量的乙烯，抑制植物的正常生长。

2、为了减缓过量的乙烯对植物生长造成的不利影响，本研究通过从烟草根系内分离得到一株能够产acc脱氨酶的菌株yc3-1(serratia marcescens)，acc脱氨酶可以分解acc，减少乙烯的合成，从而促进植物的生长发育。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是提供一株产acc脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用，其可以分解acc，减少乙烯的合成，从而促进植物的生长发育。

2、本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

3、本申请的目的在于，提供一株产acc脱氨酶烟草内生促生细菌，其分类命名为粘质沙雷氏菌(serratia marcescens)，菌株号yc3-1，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.27138。

4、本申请的另一目的在于，提供一种产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在促进烟草生长发育中的应用。

5、优选地，促进烟草生长发育包括促进烟草种子萌发以及促进烟草植株生长发育，其中：

6、促进烟草种子萌发，具体为：用lb培养基活化菌株，28℃，180rpm培养，将菌液浓度调至od600＝1，挑取大小一致、饱满均匀的烟草种子，表面消毒后用菌液浸泡后置于水琼脂中，以无菌水为对照，每个处理3个重复，每个重复30粒种子，于3d后调查种子萌发势，7d后调查萌发率，14d调查植株根长；

7、促进烟草植株生长发育，具体为：用lb培养基活化菌株，28℃，180rpm培养，将菌液用无菌水调至为od600＝1的菌悬液，选择健康且长势均匀一致的烟株，以无菌水作为对照，每个处理设置15个重复，每颗烟苗灌入5ml菌悬液，第30天测定其株高、叶片数、根长、最大叶长、最大叶宽、地上部鲜重、地下部鲜重和干重。

8、优选地，发芽指数＝∑gt/dt，gt为发芽试验终期内每日发芽数，dt为发芽日数；活力指数＝gi×s，gi为发芽指数，s为规定日期内幼苗或幼根的长度。

9、本申请的另一目的在于，提供一种产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在促进油菜生长发育中的应用。

10、优选地，所述油菜生长发育具体为促进根部的生长，处理过程如下：

11、用lb液体培养基活化菌株，用以acc为唯一氮源的adf培养液洗涤两次，将洗涤好的菌液移入以acc为唯一氮源的adf培养液中，28℃，180rpm培养，将菌液浓度调至od600＝0.3，挑取大小一致、饱满均匀的油菜种子进行表面消毒，将消毒后的种子分别浸于菌悬液中浸种4h，以无菌水为对照，然后再将浸泡过的种子置于放有滤纸的培养皿中，每皿放30粒种子,每个处理设3次重复，2d后调查种子萌发率，5d后调查植株根长。

12、本申请的另一目的在于，提供一种产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在植物根际稳定定殖中的应用。

13、本申请的另一目的在于，提供一种促进植物生长的微生物菌剂或促进植物生长发育的植物生长促进剂，所述微生物菌剂或所述植物生长促进剂中包含权利要求1所述的粘质沙雷氏菌yc3-1。

14、本发明上述技术方案，具有如下有益效果：

15、(1)菌株yc3-1为烟草内生菌株，对烟草的农艺性状及生物量具有显著的提升：通过促生菌株yc3-1的处理，烟草种子的萌发、烟苗的生长都得到了显著提升。

16、(2)菌株yc3-1对于油菜的生长也具有促进作用：经过菌株yc3-1处理后5天，处理组油菜的根长比对照组根长显著提高。

17、(3)菌株yc3-1为内生菌株，因此菌株的定殖能力相对于外生菌株较强：菌株yc3-1在28d时在烟草根际土壤及根内仍具有较强的定殖能力。

技术特征：

1.一株产acc脱氨酶烟草内生促生细菌，其特征在于，其分类命名为粘质沙雷氏菌(serratia marcescens)，菌株号yc3-1，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为cgmcc no.27138。

2.根据权利要求1所述的产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在促进烟草生长发育中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，促进烟草生长发育包括促进烟草种子萌发以及促进烟草植株生长发育，其中：

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，发芽指数＝∑gt/dt，gt为发芽试验终期内每日发芽数，dt为发芽日数；活力指数＝gi×s，gi为发芽指数，s为规定日期内幼苗或幼根的长度。

5.根据权利要求1所述的产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在促进油菜生长发育中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述油菜生长发育具体为促进根部的生长，处理过程如下：

7.根据权利要求1所述的产acc脱氨酶烟草内生促生细菌在植物根际稳定定殖中的应用。

8.一种促进植物生长的微生物菌剂或促进植物生长发育的植物生长促进剂，其特征在于，所述微生物菌剂或所述植物生长促进剂中包含权利要求1所述的粘质沙雷氏菌yc3-1。

技术总结
本发明公开了一株产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌的获得及应用，该产ACC脱氨酶烟草内生促生细菌分类命名为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)，菌株号YC3‑1，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.27138。本申请的菌株YC3‑1，其可以分解ACC，减少乙烯的合成，从而促进植物的生长发育。具体的，菌株YC3‑1为烟草内生菌株，对烟草的农艺性状及生物量具有显著的提升；菌株YC3‑1对于油菜的生长也具有促进作用；菌株YC3‑1为内生菌株，因此菌株的定殖能力相对于外生菌株较强。

技术研发人员：王廷晓,段卫东,尹光庭,蒋士君,金东峰,孟颢光,罗瑞锋,王磊,李文渊,李豪,吕建国,陈少锋
受保护的技术使用者：河南中烟工业有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15