融合魏斯氏菌及其应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌及其应用。

背景技术：

1、2-乙酰基呋喃黄棕色液体，呈杏仁、坚果、酵香、牛奶和甜的焦糖似香气。天然品存在于咖啡、西红柿、啤酒、绿茶、葡萄干和马铃薯片的挥发性香成分中。可用作有机合成原料、医药中间体、食品用香料。

2、现有研究中，发现可通过微生物的调节，提高发酵食品挥发性物质中2-乙酰基呋喃的含量。如汤晓宏等(汤晓宏,胡文效,魏彦锋,等.葡萄酒野生酿酒酵母的筛选及其生物特性的研究[j].山东大学学报：理学版,2014,49(3):7.)从葡萄果实表皮和葡萄园土壤中分离纯化得到一株酿酒酵母pj16，其所酿葡萄酒的香气成分正己醇、1-壬醇、2-壬醇、乳酸乙酯、乙酰苯、苯并噻唑、2-乙酰基呋喃浓度远高于对照组商品酵母所酿葡萄酒。曾德勇(曾德勇.酱香型白酒生产中功能微生物的优化组合及其应用研究[d].贵州大学.)通过优化功能细菌(解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌)与酵母菌(酿酒酵母、毕赤酵母)以及曲霉(黑曲霉、毛霉、黄曲霉)之间的比例，制备强化大曲，其酒样中正丙醇、乙酸、乳酸乙酯、2,3,5,6-四甲基吡嗪、己酸酯类羟乙基、2-乙酰呋喃等挥发性物质有了明显的提高。

3、融合魏斯氏菌是一种广泛存在于发酵食品、肉类、牛奶、蔬菜和土壤的乳酸菌，常用于食品行业中以改善食品的性质。但现有研究中未发现有能产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌。

技术实现思路

1、针对现有研究中未发现能产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌，本发明从酒曲中分离筛选得到一株能产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌新菌株，其不仅可应用于发酵食品行业，还可应用于生物来源的香精香料、医疗行业，促进行业发展。

2、本发明首先提供能产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌(weissella confusa)，其保藏编号为：cgmcc no.26364。

3、保藏时间为2022年12月30日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。名称为：融合魏斯氏菌lzlj2-4(weissella confusa)。

4、其中，上述融合魏斯氏菌lzlj2-4的16s rdna序列如seq id no:1所示：

5、gggataatgcggacctgctatacatgcagtcgaacgctttgtggttcaactgatttgaagagcttagctcagatatgacgatggacattgcaaagagtggcgaacgggtgagtaacacgtgggaaacctacctcttagcaggggataacatttggaaacagatgctaataccgtataacaatgacaaccgcatggttgttatttaaaagatggttctgctatcactaagagatggtcccgcggtgcattagctagttggtaaggtaatggcttaccaaggcgatgatgcatagccgagttgagagactgatcggccacaatgggactgagacacggcccatactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccacaatgggcgaaagcctgatggagcaacgccgcgtgtgtgatgaagggtttcggctcgtaaaacactgttgtaagagaagaatgacattgagagtaactgttcaatgtgtgacggtatcttaccagaaaggaacggctaaatacgtgccagcagccgcggtaatacgtatgttccaagcgttatccggatttattgggcgtaaagcgagcgcagacggttatttaagtctgaagtgaaagccctcagctcaactgaggaattgctttggaaactggatgacttgagtgcagtagaggaaagtggaactccatgtgtagcggtgaaatgcgtagatatatggaagaacaccagtggcgaaggcggctttctggactgtaactgacgttgaggctcgaaagtgtgggtagcaaacaggattagataccctggtagtccacaccgtaaacgatgagtgctaggtgtttgagggtttccgcccttaagtgccgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacgaccgcaaggttgaaactcaaaggaattgacggggacccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcccttgacaactccagagatggagcgttcccttcggggacaaggtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttattactagttgccagcattcagttgggcactctagtgagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggcgtatacaacgagttgccaacccgcgagggtgagctaatctcttaaagtacgtctcagttcggattgtaggctgcaactcgcctacatgaagtcggaatcgctagtaatcgcggatcagcacgccgcggtgaatacgttcccgggtcttgtacacaccgcccgtcacaccatgagagtttgtaacacccaaagccggtggggtaaccttcgggagccagccgtctaatggaggtcacaaatcgg。

6、本发明还提供了一种微生物菌剂，其以所述的融合魏斯氏菌为活性成分。

7、本发明还提供上述融合魏斯氏菌在产2-乙酰基呋喃方面的应用。

8、本发明还提供上述融合魏斯氏菌在白酒酿造领域的应用。

9、本发明还提供上述融合魏斯氏菌在利用2-乙酰基呋喃制备有机合成原料、医药中间体、香精香料、发酵食品上的应用。

10、具体地，所述应用中，融合魏斯氏菌发酵产2-乙酰基呋喃的方法包括以下步骤：融合魏斯氏菌接种于mrs液体培养基培养活化后，接种至发酵培养基发酵中，发酵培养即可。

11、其中，所述mrs液体培养基成分为：葡萄糖20g/l，蛋白胨10g/l，酵母粉4g/l，牛肉浸粉5g/l，吐温80 1g/l，柠檬酸三铵2g/l，醋酸钠5g/l，硫酸镁0.2g/l，硫酸锰0.05g/l，磷酸氢二钾1g/l。

12、其中，所述液体培养基培养条件为30℃-37℃静置培养20h-24h。

13、其中，所述融合魏斯氏菌的接种至发酵培养基的接种量为2v/v％。

14、其中，所述发酵培养条件为：30℃-37℃静置培养24h-48h。

15、其中，所述发酵培养基的组成为葡萄糖16g/l，胰蛋白胨10g/l，酵母粉2.5g/l，牛肉膏5g/l，牛脑3.85g/l，牛心4.9g/l，吐温80 0.5g/l，柠檬酸铵1g/l，氯化钠2.5g/l，无水乙酸钠2.5g/l，硫酸镁0.05g/l，硫酸锰0.025g/l，磷酸氢二钠1.25g/l，磷酸氢二钾1g/l。

16、采用上述发酵工艺，融合魏斯氏菌所产2-乙酰基呋喃含量为0.096mg/l。

17、有益效果：本发明从市售的酒曲中分离筛选得到一株能产2-乙酰基呋喃的融合魏斯氏菌，其保藏编号为：cgmcc no.26364。命名为融合魏斯氏菌lzlj2-4。该融合魏斯氏菌，性能稳定，发酵工艺简单，不破坏原有发酵过程中微生物的平衡，且产2-乙酰基呋喃含量为0.096mg/l，能广泛应用于酒类、酱油、食醋、面包等多种发酵食品制备中。