GIPR抗体及其与GLP-1的融合蛋白质，以及其药物组合物和应用的制作方法

本文提供了能与gipr特异性结合的抗体及其与glp-1的融合蛋白质，以及其药物组合物。本文还提供了gipr抗体及其与glp-1的融合蛋白质用于治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、二型糖尿病、或肥胖症的一种或多种症状方法。

背景技术：

0、发明背景

1、肠抑胃肽(gastric inhibitory polypeptide,gip)是人体在进食后，由肠道k细胞分泌的一种多肽荷尔蒙，其形式包括42肽和30肽两种。gip通过激活胰腺β细胞表面的肠抑胃肽受体(gastric inhibitory polypeptide receptor，gipr)参与刺激胰岛素分泌的生理过程(tseng等，1996，j.clin.invest.98:2440-2445；ravn等，2013，j.biol.chem.288:19760-72)。因此gip的经典生物学功能与glp-1类似，所以二者被统称为肠激肽。但是，gipr除了胰脏外具有广泛的分布，包括了骨骼、心脏、胃、肠道和脂肪组织等(peter等，2013，j.biol.chem.288:19760-72)。多样化的分布表明了gip/gipr通路在血糖调节之外还有更多的生物学作用。实验证据显示gip/gipr信号通路至少与这些组织中的脂肪代谢密切相关(yip和wolfe，2000，life sci.66:91–103)。实验数据还显示肥胖症或者糖尿病患者的血液循环gip浓度会升高(creutzfeldt等，1978，diabetologia14:15–24；flatt等，1984，j.endocrinol.101:249–256；salera等，1982，j.clin.endocrinol.metab.55:329–336；等，2003，j.clin.endocrinol.metab.88:2706–2713)。使用gipr抑制剂阻断gipr信号后，可以观察到高脂饲料诱导肥胖小鼠的体重大幅下降、胰岛素抵抗症状减轻，甚至逆转由高脂饲料引起的二型糖尿病(peter等，2013，j.biol.chem.288:19760-72)。

2、长效胰高血糖素样肽-1类似物(glucagon like peptide-1analogue，glp-1analogue)是新一代，也是目前疗效最佳的二型糖尿病药物(tomlinson等，2015，expertopin.investig.drugs 25:1744-7658；gallwitz，2015，eur.endocr.11:21–25)。长效glp-1类药物也正在临床试验上尝试用于非酒精性脂肪性肝病(nafld)的治疗。研究结果显示其对nafld患者的肝组织形态改善、谷丙转氨酶/谷草转氨酶比例下调、肝脂肪含量降低均具有显著作用(samson等，2013，j.diabetes complications 27:401–6；portillo-sanchez和cusi，2016，clin.diabetes endocrinol.2:9)。

3、如果能够把glp-1类药物和gipr抑制剂两者配合使用，包括二者联用，或者融合在一起使用，那就可能达到同时改善胰岛素抵抗和脂肪过度积累(即肥胖症)的效果。这样，在降低血糖的同时，还干涉脂肪代谢，即glp-1部分改善糖代谢，降低食欲，降糖减重；gipr抗体部分降低脂肪的进一步蓄积，改善肝脏的功能。gipr抗体部分的减脂效果和glp-1部分减重的效果叠加，通过双重作用来治疗非酒精性脂肪性肝病/非酒精性脂肪性肝炎。本文提供一种融合蛋白质药物，将有利于治疗那些同时患有非酒精性脂肪性肝病/非酒精性脂肪性肝炎、二型糖尿病、及肥胖症中一种或多种疾病的患者。

技术实现思路

1、本文提供了能与gipr特异性结合的抗体，该抗体是gipr的拮抗剂。

2、本文还提供了一个能与gipr特异性结合的抗体，其抗体包含一个、两个、三个、四个、五个、或六个氨基酸序列，其中每个氨基酸序列独立地选自于以下所列的氨基酸序列：

3、a.轻链cdr1氨基酸序列：seq id no:1、seq id no:4、seq id no:7、seq id no:10、seq id no:13、及seq id no:15；

4、b.轻链cdr2氨基酸序列：seq id no:2、seq id no:5、seq id no:8、seq id no:11、及seq id no:16；

5、c.轻链cdr3氨基酸序列：seq id no:3、seq id no:6、seq id no:9、seq id no:12、seq id no:14、及seq id no:17；

6、d.重链cdr1氨基酸序列：seq id no:18、seq id no:23、及seq id no:26；

7、e.重链cdr2氨基酸序列：seq id no:19、seq id no:21、seq id no:24、seq idno:27、及seq id no:29；及

8、f.重链cdr3氨基酸序列：seq id no:20、seq id no:22、seq id no:25、seq idno:28、及seq id no:30。

9、本文进一步提供了一个glp-1融合蛋白质，其包含一个能与gipr特异性结合的抗体，和一个，二个，三个，四个，五个，六个，七个，或八个glp-1片段；其中每个glp-1片段通过一个肽接头序列(linker)将glp-1片段的羧基端与gipr抗体轻链或重链的氨基端连接或者将glp-1片段的氨基端与gipr抗体轻链或重链的羧基端连接。

10、本文提供了一个glp-1融合蛋白质，其包含一个gipr抗体和二个glp-1片段；其中每个glp-1片段通过一个肽接头序列(linker)将glp-1片段的羧基端与gipr抗体轻链的氨基端连接：n'-glp-1-linker-r-c'；或者将glp-1片段的羧基端和gipr抗体重链的氨基端连接：n'-glp-1-linker-r-c'；其中:n'代表融合蛋白质多肽链的氨基端,c'代表融合蛋白质多肽链的羧基端,glp-1代表glp-1片段，r为gipr抗体的轻链或者重链的氨基酸序列,及linker代表肽接头序列。

11、本文提供了一个多核苷酸，其编码本文中所述的一个gipr抗体。

12、本文提供了一个多核苷酸，其编码本文中所述的一个gipr抗体与glp-1融合蛋白质。

13、本文提供了一个载体，其包含编码本文中所述的一个gipr抗体的多核苷酸。

14、本文提供了一个载体，其包含编码本文中所述的一个gipr抗体与glp-1融合蛋白质的多核苷酸。

15、本文提供了一个宿主细胞，其包含本文中所述的一个载体。

16、本文提供了一个药用组合物，其包含本文所述的一个gipr抗体和一个药用可接受载体。

17、本文提供了一个药用组合物，其包含本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质和一个药用可接受载体。本文提供了本文所述的一个gipr抗体在制备用于治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病的药物中的用途。

18、本文提供了本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质在制备用于治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病的药物中的用途。

19、本文提供了本文所述的一个gipr抗体在制备用于治疗、预防或改善二型糖尿病的药物中的用途。

20、本文提供了本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质在制备用于治疗、预防或改善二型糖尿病的药物中的用途。

21、本文提供了本文所述的一个gipr抗体在制备用于减肥或者治疗、预防或改善肥胖症以及肥胖症相关病症的药物中的用途。

22、本文提供了本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质在制备用于减肥或者治疗、预防或改善肥胖症以及肥胖症相关病症的药物中的用途。

23、本文提供了本文所述的一个gipr抗体在制备用于同时治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病，肥胖症或者二型糖尿病二种及二种以上病症的药物中的用途。

24、本文提供了本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质在制备用于同时治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病，肥胖症或者二型糖尿病二种及二种以上病症的药物中的用途。

25、本文提供了治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体。

26、本文提供了治疗、预防或改善非酒精性脂肪性肝炎类疾病的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质。

27、本文提供了治疗、预防或改善二型糖尿病的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体。

28、本文提供了治疗、预防或改善二型糖尿病的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质。

29、本文提供了治疗、预防或改善肥胖症的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体。

30、本文提供了治疗、预防或改善肥胖症的一种或多种症状方法，其包括给予受试者治疗有效量的本文所述的一个gipr抗体与glp-1的融合蛋白质。