乳酸菌原位富集珠及其制备方法与流程

本发明涉及生物，具体涉及一种乳酸菌原位富集珠及其制备方法。

背景技术：

1、乳酸菌广泛存在于土壤、瓜、果、蔬菜、乳及畜禽肠道的益生菌，它能改善食物风味、促进动物生长，抑菌，提高免疫力，调节机体肠道微生态平衡，提高食物利用率，降低胆固醇等作用，乳酸菌在食品及医药行业应用较为广泛，商品化的乳酸菌制品在市场备受欢迎。

2、传统乳酸菌的应用大都是混菌发酵，混菌发酵很难保证产品稳定性，乳酸菌的性能也难以被发掘，这就要求我们必须对乳酸菌进行收集纯化才能应更好的应用于生产中。而大多数环境中微生物极其丰富，除了含有乳酸菌外还含有各种芽孢杆菌、酵母菌、霉菌、放线菌等，且乳酸菌含量相对较低，直接分离纯化很难得到乳酸菌。

3、cn114774508a公开了一种磁珠富集金黄色葡萄球菌的方法，其合成的聚氧乙烯二胺介导的头孢吡肟功能化磁性纳米粒子复合物是通过头孢吡肟与金黄色葡萄球菌表面丰富的青霉素结合蛋白相互作用，形成共价键。相比于基于氢键或静电相互作用力的识别元件功能化磁性纳米粒子，其采用的聚氧乙烯二胺介导的头孢吡肟功能化磁性纳米粒子复合物与细菌相互作用力更稳定，适用于复杂样品中金黄色葡萄球菌的富集分离；但是其难以与乳酸菌形成共价键，难以用于富集乳酸菌。

4、cn 114854624 a公开了一种低丰度土壤土著乳酸菌的高效筛选方法，其通过对土壤样品进行3次富集然后在筛选平板进行分离纯化，该方法有一定的可行性，但操作相对繁琐，且环境不同成功率也会降低，同时其获得的菌数量较少。

5、cn 115505533 a公开了一种土壤分离培育乳酸菌制作方法，其通过在采样点投入玉米面、大米等原料制备的培养基进行培育益生菌，该方法对大多数益生菌均进行了富集，后续的乳酸菌的筛选工作量大。

6、因此，如何从含乳酸菌的环境中分离纯化乳酸菌成为了本领域技术人员亟待解决的技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种乳酸菌原位富集珠及其制备方法，该富集珠对乳酸菌有较强的吸引力，同时对芽孢杆菌、放线菌、酵母菌及霉菌的生长繁殖具有一定抑制作用，从而方便乳酸菌富集。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

3、一种乳酸菌原位富集珠，包括以下重量份的组分：100～300份芥菜汁、10～80份番茄汁、0.5～8份复合酸、0.2～2份吐温-80、0.3～3份丙酸钙、2～6份凝固剂。

4、作为本发明的优选实施方案，包括以下重量份的组分：100～200份芥菜汁、10～50份番茄汁、0.5～5份复合酸、1～2份吐温-80、0.3～1份丙酸钙、4～6份凝固剂。

5、作为本发明的优选实施方案，包括以下重量份的组分：200份芥菜汁、50份番茄汁、5份复合酸、1份吐温-80、1份丙酸钙、4份凝固剂。

6、作为本发明的优选实施方案，所述复合酸包括苯乳酸和富马酸；所述苯乳酸、富马酸的质量比为1：(3～8)。

7、作为本发明的优选实施方案，所述复合酸包括苯乳酸和富马酸；所述苯乳酸、富马酸的质量比为1：(5～8)。

8、作为本发明的优选实施方案，所述芥菜汁的制备方法，包括以下步骤：将芥菜清洗、破壁、过筛，再加入水，在80～100℃下搅拌20～40min，过滤，滤液即为芥菜汁；

9、所述芥菜与水的重量比为(50～100)：(120～240)。

10、作为本发明的优选实施方案，所述番茄汁的制备方法，包括以下步骤：将番茄清洗，加水，用榨汁机进行挤压榨汁，过滤，得到番茄汁；

11、所述番茄与水的重量比(20～50)：(100～200)。

12、作为本发明的优选实施方案，所述凝固剂为结冷胶。

13、作为本发明的优选实施方案，还包括0.03～0.5重量份氯化镁。

14、本发明还提供了一种乳酸菌原位富集珠的制备方法，包括以下步骤：

15、将芥菜汁、番茄汁混合均匀，再加入吐温-80、丙酸钙、凝固剂、复合酸混合均匀，升温至80～90℃，加入氯化镁，搅拌均匀，加热至沸腾并搅拌，冷却至45～60℃，装入模具中，灭菌，冷却，得到乳酸菌原位富集珠。

16、本发明的有益效果在于：(1)本发明的富集珠稳定性好，适用性强，使用方便，能够抑制杂菌生长繁殖、促进乳酸菌生长，从而方便乳酸菌富集；(2)通过本发明的富集珠进行乳酸菌的富集，该富集珠对乳酸菌有较强的吸引力，同时对芽孢杆菌、放线菌、酵母菌及霉菌的生长繁殖具有一定抑制作用，从而可以大大简化乳酸菌分离纯化工作，该方法操作简单，分离乳酸菌效率高且成本低具有较强的推广价值；(3)所述的富集珠在使用时，只需将其放在富集地点3～7天即可，其中富集地点可以是土壤、空气以及污泥等；(4)在所述的富集珠中，芥菜汁含有丰富的蛋白质、维生素及乳酸菌生长所必须的各种矿物质元素如k、ga、mn、zn等，此外还含有芥菜黄酮具有抑制杂菌生长及抗氧化的作用；其中，番茄汁除了含有丰富的营养物质外能够促进乳酸菌生长以外，还含有番茄红素具有较强的抗氧化作用，能有效维持乳酸菌富集珠稳定性，所述的芥菜汁与番茄汁在富集乳酸菌方面具有协同增效作用，同时能够有效的提高乳酸菌的占比，抑制杂菌的生长繁殖，且联合使用较单一使用分离得到的乳酸菌种类更多，菌体量也更大，富集效果更佳。

技术特征：

1.一种乳酸菌原位富集珠，其特征在于，包括以下重量份的组分：100～300份芥菜汁、10～80份番茄汁、0.5～8份复合酸、0.2～2份吐温-80、0.3～3份丙酸钙、2～6份凝固剂。

2.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，包括以下重量份的组分：100～200份芥菜汁、10～50份番茄汁、0.5～5份复合酸、1～2份吐温-80、0.3～1份丙酸钙、4～6份凝固剂。

3.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，包括以下重量份的组分：200份芥菜汁、50份番茄汁、5份复合酸、1份吐温-80、1份丙酸钙、4份凝固剂。

4.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，所述复合酸包括苯乳酸和富马酸；所述苯乳酸、富马酸的质量比为1：(3～8)。

5.根据权利要求4所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，所述复合酸包括苯乳酸和富马酸；所述苯乳酸、富马酸的质量比为1：(5～8)。

6.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，所述芥菜汁的制备方法，包括以下步骤：将芥菜清洗、破壁、过筛，再加入水，在80～100℃下搅拌20～40min，过滤，滤液即为芥菜汁；

7.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，所述番茄汁的制备方法，包括以下步骤：将番茄清洗，加水，用榨汁机进行挤压榨汁，过滤，得到番茄汁；

8.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，所述凝固剂为结冷胶。

9.根据权利要求1所述的乳酸菌原位富集珠，其特征在于，还包括0.03～0.5重量份氯化镁。

10.权利要求1～9任一所述的乳酸菌原位富集珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

技术总结
本发明公开了一种乳酸菌原位富集珠及其制备方法，属于生物技术领域，所述的乳酸菌原位富集珠，包括以下重量份的组分：100～300份芥菜汁、10～80份番茄汁、0.5～8份复合酸、0.2～2份吐温‑80、0.3～3份丙酸钙、2～6份凝固剂。本发明的富集珠稳定性好，适用性强，使用方便，能够抑制杂菌生长繁殖、促进乳酸菌生长，从而方便乳酸菌富集；通过本发明的富集珠进行乳酸菌的富集，该富集珠对乳酸菌有较强的吸引力，同时对芽孢杆菌、放线菌、酵母菌及霉菌的生长繁殖具有一定抑制作用，从而可以大大简化乳酸菌分离纯化工作，该方法操作简单，分离乳酸菌效率高且成本低具有较强的推广价值。

技术研发人员：邢宏博,宋敏,宋汉良,蔡汉聪,郑玉娇,李红胜,黄明媛,杨杏萍
受保护的技术使用者：广州播恩维生素有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15