一种AKR1C1免疫组织化学抗体及其应用

本发明涉及一种akr1c1免疫组织化学抗体及其应用，属于生物医药。

背景技术：

1、免疫组织化学是利用抗原与抗体间的特异性结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原或抗体进行定位、定性或定量检测的技术。免疫组织化学技术具有特异性强、敏感性高、定位准确、形态与功能相结合等特点，有利于病理学领域的深入研究，在现代病理诊断中起重要作用。

2、病理科日常工作使用的免疫组织化学抗体品种达数百种，对人类疾病的诊断和治疗发挥着重要的作用。随着人类对疾病认识的不断提高，病理科应用的抗体种类也逐渐增加。在近十年人类基因组计划完成和蛋白质谱计划推进的过程中，越来越多抗体的潜在价值等待被发掘，等待不断扩展和添加到病理科抗体应用的目录中。

3、免疫组织化学中所使用的抗体，又称为一抗(primary antibody)，根据其制备方式可分为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体因其特异性高广受免疫组化使用者的青睐，在病理科使用的抗体中占绝大多数。

4、免疫组织化学抗体的应用价值包括多个方面：首先，免疫组织化学抗体能够辅助诊断和鉴别诊断，为病理诊断和鉴别诊断提供客观证据。对于感染性疾病，通过免疫组织化学技术识别特定的细菌、病毒等微生物，提高感染性疾病病理诊断的准确性。对于肿瘤性疾病，免疫组织化学也通过多种途径来提供客观的诊断依据辅助病理诊断工作：如肿瘤良恶性判断；肿瘤细胞来源/分化方向；帮助病理医生判断原发性还是转移性；鉴别诊断肿瘤类型；肿瘤分级；肿瘤微小转移灶的发现和确定等。其次，为疾病治疗提供客观的指导方案，即伴随诊断：分子靶向药物肿瘤靶标的测定；肿瘤化学性药物治疗反应的预测；肿瘤预后的判断等。正是由于免疫组织化学在临床上广谱的应用价值，因此，抗体的应用研究方兴未艾。

5、中国专利cn 114874318 a公开了一种ng-2免疫组织化学抗体，主要应用于与ng-2相关的正常细胞与肿瘤细胞的识别，以及食管鳞状细胞癌和食管基底样鳞状细胞癌的鉴别诊断；中国专利cn116217721a公开了一种c14orf78免疫组织化学抗体及其制备方法与应用，所述的c14orf78免疫组织化学抗体主要应用于与c14orf78相关的正常细胞与肿瘤细胞的识别，以及甲状腺肿瘤、肝脏肿瘤和肾脏肿瘤的鉴别诊断。

6、但是目前还没有关于akr1c1基因和蛋白相关的免疫组化抗体的研究和报道。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是：akr1c1免疫组织化学抗体如何制备和如何应用的技术问题。

2、为了解决上述技术问题，本发明采取了以下技术方案：

3、本发明的第一方面，提供一种akr1c1免疫组织化学抗体，所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：2所示；轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：4所示；或者，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：6所示；轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：8所示。

4、本发明的第二方面，提供了一种akr1c1免疫组织化学抗体的重链可变区和轻链可变区的编码基因，所述重链可变区的编码基因序列如seq id no：1所示，所述轻链可变区的编码基因序列如seq id no：3所示；或者，所述重链可变区的编码基因序列如seq id no：5所示，所述轻链可变区的编码基因序列如seq id no：7所示。

5、本发明的第三方面，提供了一种akr1c1免疫组织化学抗体在制备鉴别与akr1c1相关的正常细胞和肿瘤细胞的试剂盒中的应用，所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：2所示，轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：4所示；或者，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：6所示；轻链可变区的氨基酸序列如seqid no：8所示。

6、本发明的第四方面，提供了一种akr1c1免疫组织化学抗体在制备鉴别乳腺癌亚型的诊断试剂盒中的应用，所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：2所示，轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：4所示；或者，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：6所示；轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：8所示。

7、优选地，所述乳腺癌亚型包括乳腺大汗腺癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺非特殊浸润性癌、乳腺黏液癌、乳腺实性乳头状癌、乳腺微乳头状癌、乳腺小叶癌、神经内分泌癌、鳞状细胞癌、纤维腺瘤和分叶状肿瘤中的任意一种。

8、本发明的第五方面，提供了一种akr1c1免疫组织化学抗体在制备鉴别组织肿瘤亚型的诊断试剂盒中的应用，所述组织肿瘤亚型包括脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、胃肠间质瘤和横纹肌肉瘤中的任意一种；所述抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：2所示，轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：4所示；或者，重链可变区的氨基酸序列如seq id no：6所示；轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：8所示。

9、本发明从发现的候选分子库中，制备一种akr1c1免疫组织化学抗体，其能够特异性识别大汗腺和乳腺的大汗腺癌，能够鉴别乳腺大汗腺和浸润性导管癌以及其他少见类型的乳腺癌，正常大汗腺组织阳性率98％，正常乳腺导管和腺泡为阴性，乳腺大汗腺癌阳性率90％，且多为弥漫强阳性，乳腺其他浸润导管癌阳性率约15％，往往为局灶阳性，特殊类型乳腺癌，如乳腺黏液癌、实性乳头状癌、微乳头状癌、小叶癌为阴性；此外，本发明的akr1c1免疫组织化学抗体还可以鉴别脂肪肉瘤和平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤以及胃肠间质瘤。因此，本发明的akr1c1免疫组织化学抗体是一种极具潜力的各种亚型乳腺癌和组织肿瘤亚型的鉴别诊断指标，并具有进一步探索作为其他器官、系统、组织和细胞水平潜在的鉴别、预测和靶标的价值。

10、本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：

11、(1)本发明的akr1c1免疫组织化学抗体，为在组织和细胞上进行免疫组织/细胞化学染色的抗体，用于将akr1c1相关的正常细胞和肿瘤细胞显示出来，达到组织和细胞分型以及肿瘤组织鉴别诊断的目的；此为，基于本发明提供的方案，还可以为探索akr1c1进一步作为其他器官、系统、组织和细胞水平潜在的鉴别、预测和靶标的应用提供方向；

12、(2)本发明的akr1c1免疫组织化学抗体，能够特异性识别大汗腺和乳腺的大汗腺癌，能够鉴别乳腺大汗腺和浸润性导管癌以及其他少见类型的乳腺癌，正常大汗腺组织阳性率98％，正常乳腺导管和腺泡为阴性，乳腺大汗腺癌阳性率90％；此外，本发明的akr1c1免疫组织化学抗体还可以鉴别脂肪肉瘤和平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤以及胃肠间质瘤；极具应用潜力。

13、(3)乳腺肿瘤类型丰富，包括浸润性导管癌、浸润性小叶癌、大汗腺癌、化生性癌、实性乳头状癌、黏液癌、神经内分泌癌、鳞状细胞癌，以及纤维腺瘤、分叶状肿瘤等，通过免疫组化检测可以得到akr1c1在乳腺各亚型表达的翔实数据，最终有效地将akr1c1用于乳腺大汗腺癌的识别以及各亚型的鉴别中。