一种人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽A2M3及其应用

本发明涉及生物，尤其涉及一种人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3及其应用。

背景技术：

1、金黄色葡萄球菌( staphylococcus aureus)是临床重要的革兰氏阳性致病菌，主要以人类共生的形式出现，能够定植在人和动物的皮肤表面和黏膜。大部分金黄色葡萄球菌的感染与留置医疗器械的定植有关，从而引发一系列的免疫反应。仅在美国，因金黄色葡萄球菌感染住院的出院诊断约为300，000次。金黄色葡萄球菌也是食源性病原菌之一，食用被金黄色葡萄球菌感染的食物会引发胃肠道疾病，严重的还会导致脑膜炎，肠出血等致命的后果。金黄色葡萄球菌具有产生多种毒素的能力，能够直接与宿主相互作用对其生物膜造成损害导致细胞死亡，如葡萄球菌肠毒素（sea、seb、sec、sed、see、seg、she和sei）、中毒性休克综合征毒素-1（tsst-1）和杀白细胞素。这些毒素耐热，即使通过热处理杀死细菌也能存活，它们还能抵抗其他环境条件，如低ph值、干燥和冷冻等。针对金黄色葡萄球菌的感染，目前主要的治疗方法是使用抗生素对其进行处理，但容易引起微生物抗药性，存在一定的局限性。因此，亟需寻找一个抑菌效果显著且安全无耐药性的新型方法。

2、抗菌肽(amps)是一类广泛存在于自然界生物体中的小肽类物质，它是机体先天性免系统的重要组成部分。它具有水溶性好、对高等动物毒性低、无耐药性等特点，被认为是抗生素的潜在替代品，在医药行业和食品添加剂等领域有良好的应用前景。鼻腔是葡萄球菌主要的聚集地，如金黄色葡萄球菌和溶血葡萄球菌。但在正常情况下能与机体达到一个平衡的状态，其主要原因是机体能够分泌具有防御功能的因子，如溶菌酶，乳铁蛋白和分泌性白细胞蛋白酶抑制剂（slpi）等抗菌的多肽。宿主防御是鼻分泌物的一个突出功能。事实上，鼻腔粘膜通过阳离子多肽的产生可以直接对细菌的攻击做出反应，选择性破坏细菌细胞壁和膜。这可能也是当鼻内感染病原菌时机体保持健康正常的原因之一。

3、因此，提供一种能有效抑制金黄色葡萄球菌感染，同时能保持良好稳定性的抗菌肽是本领域亟待解决的技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3及其应用，通过从鼻液中分离鉴定出抗菌肽a2m3对金黄色葡萄球菌抑菌活性的研究，降低金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药性，减少抗生素的使用。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：提供一种人鼻液中抗菌肽a2m3。其氨基酸序列为sgfiplkptvk，如seqidno：1所示。

3、我们首先通过对人鼻液进行质谱鉴定，并得到和鉴定出1859个肽序列，然后利用swiss-model服务器对肽结构进行预测，发现了对金黄色葡萄球菌具有很强抗菌作用的抗菌肽序列sgfiplkptvk，命名为a2m3。

4、抗菌肽a2m3的分子量为1186.454da，所带电荷为+2，总疏水性比为36％。

5、抗菌肽a2m3可以从以下方面对细菌造成破坏：一方面，抗菌肽a2m3具有的正电荷可与细菌细胞膜发生作用，吸附在细菌细胞膜表面，破坏细胞膜导致细菌死亡；另一方面，破坏细胞膜的同时改变细菌细胞膜的通透性，并抑制细胞膜生成，导致细菌死亡；再一方面，与细菌基因组dna相结合，抑制细菌dna的合成，从而导致细菌死亡。

6、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：提供一种人鼻液中的抗菌肽a2m3在制备抗菌药物中的应用，该抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

7、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：提供一种抗菌药物，其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

8、在本发明一较佳实施例中，所述抗菌药物的有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

9、在本发明一较佳实施例中，所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

10、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之四是：提供一种食品防腐剂，其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

11、在本发明一较佳实施例中，食品防腐剂的有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

12、在本发明一较佳实施例中，食品防腐剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

13、本发明解决其技术问题所采用的技术方案之五是：提供一种饲料添加剂，其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

14、在本发明一较佳实施例中，饲料添加剂的有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

15、在本发明一较佳实施例中，饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

16、本发明的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成，例如固相合成，并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化，例如高效液相色谱法。

17、实施本发明，具有如下有益效果：

18、本发明以人鼻液为研究对象，通过质谱鉴定并筛选，发现一个全新氨基酸序列的多肽a2m3。研究多肽a2m3对金黄色葡萄球菌的抑菌活性；并对它的抑菌机制进行研究。实验结果表明，该肽对金黄色葡萄球菌具有强烈的抑制作用。它的抑菌机理是首先吸附在细菌表面，造成细菌细胞膜的损伤，然后穿过细胞膜与细菌基因组dna相结合，抑制细菌dna的合成，从而导致细菌死亡。本发明抗菌肽a2m3可用于制备预防或抑制金黄色葡萄球菌感染的药物、饲料添加剂或食品防腐剂。

技术特征：

1. 一种人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，其氨基酸序列如seq id no：1所示。

2.如权利要求1所述的人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

3. 一种抗菌药物，其特征在于：其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

4. 如权利要求3所述的抗菌药物，其特征在于：其有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

5.如权利要求3或4任一项所述的一种抗菌药物，其特征在于：所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

6. 一种食品防腐剂，其特征在于：其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

7. 如权利要求6所述的食品防腐剂，其特征在于：其有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

8. 一种饲料添加剂，其特征在于：其有效成分包括人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

9. 如权利要求8所述的饲料添加剂，其特征在于：其有效成分为人鼻液α-2-巨球蛋白抗菌肽a2m3，所述抗菌肽a2m3的氨基酸序列为seq id no：1。

10.如权利要求8或9任一项所述的一种饲料添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭金黄色葡萄球菌。

技术总结
本发明公开了一种人鼻液α‑2‑巨球蛋白抗菌肽A2M3及其应用，抗菌肽A2M3氨基酸序列为SGFIPLKPTVK，抗菌肽A2M3的分子量为1186.45Da。本发明抗菌肽A2M3对金黄色葡萄球菌能够产生了较强的抑制作用，可以用于制备治疗或预防由金黄色葡萄球菌引起疾病的药物、饲料添加剂，也可用于制备食品防腐剂。

技术研发人员：杨燊,范学楠,林蓉,裘德·尤文图斯·阿维娅,金日天,翁武银
受保护的技术使用者：集美大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15