一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法

本发明属于功能性油脂，具体涉及到一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法。

背景技术：

1、植物甾醇是一种天然存在的有益油脂伴随物，具有抗氧化活性、降低血清胆固醇等特点。但植物甾醇不溶于水且脂溶性较差，生物利用率低，酯化后的植物甾醇吸收利用率比游离型植物甾醇约提高了5倍。植物甾醇酯可以显著预防小鼠的高血脂症和动脉硬化，可以通过调节磷脂类和胆汁酸类的小分子代谢物含量来改善非酒精性脂肪肝(nafld)的发生。

2、甘油二酯(dag)是由甘油与两分子脂肪酸酯化后得到的产物，也是天然食用油在体内代谢得到的中间产物。根据酰基供体脂肪酸和甘油羟基的结合位置不同，甘油二酯可以分为1，3-甘油二酯和1，2-甘油二酯两种。甘油二酯也是天然油脂中的微量成分，但通常含量不足5％，其相对含量根据油的不同来源而有所差别。近年来已经有大量研究表明甘油二酯具有减肥，降血脂等多种功能。而且在日本，它已经通过劳动省安全性和有效性审查，被划定为特定的保健食品。在美国，甘油二酯已经通过了食品安全审查，被美国食品与药品管理局(fad)列入公认安全食品。

技术实现思路

1、本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

2、鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。

3、因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法。

4、为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其包括如下步骤：

5、酶的固定化：将脂肪酶固定在载体上进行吸附，干燥后得到固定化脂肪酶；

6、原料处理：将反应底物和固定化脂肪酶进行水分活度的调整；

7、功能油脂的合成：将固定化脂肪酶加入反应底物中进行反应；

8、产物分离：在反应结束后，离心分离脂肪酶并且进行回收，分离收集上清液制得功能油脂。

9、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：固定化脂肪酶在功能油脂的合成中重复利用10次后保留80％以上的活性。

10、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：功能油脂的合成中，所述反应底物包括植物甾醇、动物油脂、植物油脂非极性溶剂中的一种或几种。

11、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：酶的固定化中，脂肪酶溶解液体中，在置于载体中后进行吸附，抽滤去除溶剂后，干燥得到固定化脂肪酶。

12、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：酶的固定化中，脂肪酶溶解液体制得的脂肪酶溶液的质量浓度为30～40g/l。

13、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：原料处理中，反应底物以及固定化酶的水分活度调整为0.4～0.6。

14、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：功能油脂的合成中，有机原料中包括甾醇、植物油和非极性溶剂，所述甾醇和植物油的物质的量比为0.8～1:2～6。

15、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：功能油脂的合成中，添加一定量的抗氧化剂。

16、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：反应底物中的非极性溶剂包括异辛烷、正己烷、正庚烷、环己烷中的一种或几种。

17、作为本发明所述酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法的一种优选方案，其中：产物分离中，回收为在上清液中进行减压旋蒸去除溶剂。

18、本发明有益效果：

19、本发明对脂肪酶进行固定化，更好的保留酶活性并提高酶的使用次数，解决甾醇酯工业化生产过程中脂肪酶成本高、利用率低的问题。通过一步反应同时合成甾醇酯和甘油二酯两种有益物质，产物不需要纯化可直接作为功能油脂。

技术特征：

1.一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述固定化脂肪酶在功能油脂的合成中重复利用10次后保留80％以上的活性。

3.根据权利要求1所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述功能油脂的合成中，所述反应底物包括植物甾醇、动物油脂、植物油脂非极性溶剂中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述酶的固定化中，所述脂肪酶溶解液体中，在置于载体中后进行吸附，抽滤去除溶剂后，干燥得到固定化脂肪酶。

5.根据权利要求1或4所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述酶的固定化中，所述脂肪酶溶解液体制得的脂肪酶溶液的质量浓度为30～40g/l。

6.根据权利要求1所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述原料处理中，所述反应底物以及固定化酶的水分活度调整为0.4～0.6。

7.根据权利要求1所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述功能油脂的合成中，所述甾醇和油的物质的量比为0.8～1:2～6。

8.根据权利要求1、3、7中任一所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述功能油脂的合成中，添加一定量的抗氧化剂。

9.根据权利要求1、3中任一所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述反应底物中的非极性溶剂包括异辛烷、正己烷、正庚烷、环己烷中的一种或几种。

10.根据权利要求1中所述的酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其特征在于：所述产物分离中，回收为在上清液中进行减压旋蒸去除溶剂。

技术总结
本发明公开了一种酶法合成甾醇酯和甘油二酯的方法，其包括如下步骤：酶的固定化、原料处理、功能油脂的合成、产物分离。本发明对脂肪酶进行固定化，更好的保留酶活性并提高酶的使用次数，解决甾醇酯工业化生产过程中脂肪酶成本高、利用率低的问题。通过一步反应同时合成甾醇酯和甘油二酯两种有益物质，产物不需要纯化可直接作为功能油脂。

技术研发人员：王小三,时旺旭,李厚悦,付艺婕,朱云,王子欣,黄雅祺
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15