红早酥梨PbMYB1L基因在植物耐低温遗传改良中的应用

本发明涉及基因工程，具体涉及到红早酥梨pbmyb1l基因在植物耐低温遗传改良中的应用。

背景技术：

1、梨是当今世界广泛栽种的果树经济作物，因为其独特的营养风味和口感受到广大人民群众的喜爱。据统计，梨是世界和我国的主要栽培树种之一，但其极易受外界环境条件的影响，如温度，水分，光照以及土壤与地势条件等。因此，选育抗逆性强、综合性状优良的新品种已经成为梨产业发展最关键的因素。

2、在实际的栽培生产时常常会受到低温、干旱和涝害等非生物胁迫的危害。低温是限制果树生长发育的主要环境因子之一，而梨树也不例外，低温对梨树的影响主要集中在花期。梨树花粉发芽的温度要求在10℃以上，最适温度为18～25℃。花期天气晴朗，气温较高，授粉受精良好，可望丰产；花期连续阴雨或温度变化过大，会导致授粉受精不良，落花落果严重，必然导致减产。因此，选育耐低温的梨栽培品种已然迫在眉睫，其可有效地减少低温对梨产业造成的危害。

技术实现思路

1、针对现有技术中的上述不足，本发明提供了红早酥梨pbmyb1l基因在植物耐低温遗传改良中的应用，该pbmyb1l基因具有提高植物耐冷性的功能，为植物抗逆分子设计育种提供新的基因资源，能有效提高植物对于非生物逆境的抗性，有效解决了低温所导致的梨产业减产的问题。

2、为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供红早酥梨pbmyb1l基因在植物耐低温遗传改良中的应用。

3、进一步，该pbmyb1l基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。

4、进一步，该pbmyb1l基因编码的蛋白质的氨基酸序列如seq id no.2所示。

5、进一步，pbmyb1l基因在提高植物低温胁迫耐受性中的应用。

6、本发明还提供了一种利用pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，包括以下步骤：

7、s1、提取pbmyb1l基因，构建植物过表达载体，转化感受态细胞，得重组菌株；

8、s2、用步骤s1所得重组菌株转化植物并筛选，得转pbmyb1l基因植物。

9、进一步，采用农杆菌介导的遗传转化方法将pbmyb1l基因导入植物中。

10、进一步，步骤s1中，植物过表达载体所使用的载体为pcambia1301。

11、进一步，步骤s1中，采用冻融法转化感受态细胞。

12、进一步，步骤s1中，所使用的感受态细胞为农杆菌gv3101。

13、进一步，步骤s2中，采用浸花法转化拟南芥。

14、进一步，步骤s2中，所述植物为拟南芥。

15、本发明具有以下有益效果：

16、1、本发明所克隆的pbmyb1l基因具有提高植物耐冷性的功能，转pbmyb1l基因拟南芥植株耐冷性明显提高。该基因的发现，为植物抗逆分子设计育种提供新的基因资源，能有效提高植物对于非生物逆境的抗性。

17、2、通过探索低温胁迫对梨种质资源的影响，并从形态指标以及测定生理生化指标来评定多种耐低温性程度，从而选出耐低温性程度更高的梨品种，为研究梨耐低温分子机理等提供理论依据。

18、3、通过分析在低温处理前后pbmyb1l转基因株系的表型及相关生理指标，可以得出结论：相对于非转pbmyb1l基因株系，pbmyb1l转基因株系具有明显的优势，例如主根长度较长、叶绿素含量较高，而超氧阴离子含量、过氧化氢含量以及丙二醛含量较低。野生型株系则与之相反，表明pbmyb1l基因是一个潜在的耐低温育种基因，可用于植物耐低温遗传改良。

技术特征：

1.红早酥梨pbmyb1l基因在植物耐低温遗传改良中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pbmyb1l基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pbmyb1l基因编码的蛋白质的氨基酸序列如seq id no.2所示。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述pbmyb1l基因在提高植物低温胁迫耐受性中的应用。

5.一种利用权利要求1所述的红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的利用红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，采用农杆菌介导的遗传转化方法将pbmyb1l基因导入植物中。

7.如权利要求5所述的利用红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，步骤s1中，所述植物过表达载体所使用的载体为pcambia1301。

8.如权利要求5所述的利用红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，步骤s1中，采用冻融法转化感受态细胞，所述感受态细胞为农杆菌gv3101。

9.如权利要求5所述的利用红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，步骤s2中，采用浸花法转化植物。

10.如权利要求5所述的利用红早酥梨pbmyb1l基因提高植物低温胁迫耐受性的方法，其特征在于，步骤s2中，所述植物为拟南芥。

技术总结
本发明公开了红早酥梨PbMYB1L基因在植物耐低温遗传改良中的应用，涉及基因工程技术领域，该PbMYB1L基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明构建植物过表达载体，通过农杆菌介导的遗传转化将PbMYB1L基因导入植物中，获得转基因植物。本发明利用PbMYB1L基因，提高植物耐冷性，从而筛选出耐低温性程度更高的梨品种，为植物抗逆分子设计育种提供了新的基因资源，提高了植物对于非生物逆境的抗性，有效解决了低温所导致的梨产业减产的问题。

技术研发人员：张勇,周璇,尧婉甜,雷迪雅,汤浩茹
受保护的技术使用者：四川农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/25