一种芽孢杆菌复合菌剂及其应用

本发明属于生物防治，具体涉及一种芽孢杆菌复合菌剂及其应用。

背景技术：

1、玉米茎基腐病是一种全生育周期侵染病害，禾谷镰孢菌(fusarium graminearum)是玉米茎基腐病的主要致病菌，该致病菌侵染时期长，多数杀菌剂作为种子包衣处理持效期达不到病害防治周期，导致防治效果不理想。在发病时单一或者多种病菌复合侵染造成病害防治难度加大。随着机械化的普及，玉米通常采用秸秆还田的农事操作，造成病原菌在土壤中积累，使该病害危害逐年加重。而缺乏抗性品种，玉米连作、无有效防治药剂等因素均促进着该病害的流行。

2、目前，玉米茎基腐病大多采用化学防治，但化学防治的持效期短、易产生抗药性、危害生态环境安全。因此寻找一种新的防治手段是当下迫切的需求，生物防治不同于化学防治，其最大的优点是对人畜安全、对环境友好。并且生防菌株因其在根际定殖后能够自行传播与维持，起到长期抑制土传病害的作用，能减少非再生资源的投入。因此，利用生防微生物的绿色防治方式越来越受到人们的关注，具有广阔的发展前景。与此同时，植物病害生防菌具有转化环境的优点，符合当前玉米病害防治的发展方向。

3、发明人团队前期筛选获得了一株副地衣芽孢杆菌(bacillusparalicheniformis)zygt1811和一株萎缩芽孢杆菌(bacillus atrophaeus)zy1825，分别公共于申请号为202011446421.9和202310941366.8的中国专利。该副地衣芽孢杆菌zygt1811对禾谷镰孢菌有抑制效果。然而，单一生防菌剂的应用效果不稳定或持续时间较短，防治效果有待进一步提高。虽然萎缩芽孢杆菌zy1825可用于防治由镰孢菌引起的的甘蓝枯萎病，但是对禾谷镰孢菌是否具有抑制作用是未知的。

技术实现思路

1、本发明的目的在于研究不同功能微生物之间潜在的协同效应，探索施用复合微生物制剂控制植物病害以克服单一菌剂缺陷。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种芽孢杆菌组合物，所述芽孢杆菌选自萎缩芽孢杆菌(bacillus atrophaeus)zy1825和副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)zygt1811，所述萎缩芽孢杆菌zy1825的保藏编号为cctcc no:m 2021736，所述副地衣芽孢杆菌zygt1811为保藏编号cctcc no：m 2020759。

4、第二方面，本发明提供含有所述芽孢杆菌组合物的复合菌剂，所述复合菌剂为菌液制剂。

5、进一步的，所述复合菌剂中，所述复合菌剂由副地衣芽孢杆菌zygt1811菌液和萎缩芽孢杆菌zy1825菌液按照2-3:1的体积比混合而成。

6、第三方面，本发明提供所述复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：

7、将所述萎缩芽孢杆菌zy1825与副地衣芽孢杆菌zygt1811分别接入液体培养基培养20-24h得到种子液，分别将两种菌株种子液按1％接种量接种至液体培养基中震荡培养，获得萎缩芽孢杆菌zy1825菌液和副地衣芽孢杆菌zygt1811菌液；

8、将所述副地衣芽孢杆菌zygt1811菌液和萎缩芽孢杆菌zy1825菌液按照2-3:1的体积比混合。

9、作为所述复合菌剂的制备方法的进一步优选，所述萎缩芽孢杆菌zy1825的液体培养基组成为：马铃薯190-210g、蔗糖14-16g、酵母浸粉11-13g、硫酸镁4-6g、水1000ml；

10、所述副地衣芽孢杆菌zygt1811的液体培养基组成为：蛋白胨9-11g、酵母膏4-6g、氯化钠9-11g、水1000ml。

11、作为所述复合菌剂的制备方法的进一步优选，所述培养的条件为30-32℃、200-220r/min，时间24-72h。

12、第四方面，本发明提供所述萎缩芽孢杆菌zy1825在防治玉米茎基腐病中的应用。

13、进一步的，所述玉米茎基腐病的病原菌为禾谷镰孢菌(fusarium graminearum)。

14、更进一步的，所述应用的方式包括利用所述复合菌剂对玉米种子做包衣处理。

15、第五方面，本发明提供一种防治玉米茎基腐病的种衣剂，有效成分为所述的复合菌剂。

16、与现有技术相比，本发明具有下述的有益效果：

17、本发明首次发现萎缩芽孢杆菌zy1825能抑制抑制玉米茎基腐病的病原菌禾谷镰孢菌的生长，且与副地衣芽孢杆菌zygt1811复配能够协同增效，当副地衣芽孢杆菌zygt1811与萎缩芽孢杆菌zy1825的菌液以2：1的体积比复配时，对禾谷镰孢菌的抑菌率达到61.35％，研究为玉米茎基腐病的生物防治奠定基础。

技术特征：

1.一种芽孢杆菌组合物，其特征在于，所述芽孢杆菌选自萎缩芽孢杆菌(bacillusatrophaeus)zy1825和副地衣芽孢杆菌(bacillus paralicheniformis)zygt1811，所述萎缩芽孢杆菌zy1825的保藏编号为cctcc no:m 2021736，所述副地衣芽孢杆菌zygt1811为保藏编号cctcc no：m 2020759。

2.含有权利要求1所述芽孢杆菌组合物的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂为菌液制剂。

3.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂中，所述复合菌剂由副地衣芽孢杆菌zygt1811菌液和萎缩芽孢杆菌zy1825菌液按照2-3:1的体积比混合而成。

4.权利要求3所述复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述萎缩芽孢杆菌zy1825的液体培养基组成为：马铃薯190-210g、蔗糖14-16g、酵母浸粉11-13g、硫酸镁4-6g、水1000ml；

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述震荡培养培养的条件为30-32℃、200-220r/min，时间24-72h。

7.权利要求2所述复合菌剂在防治玉米茎基腐病中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述玉米茎基腐病的病原菌包括禾谷镰孢菌(fusarium graminearum)。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用的方式包括利用所述复合菌剂对玉米种子做包衣处理。

10.一种防治玉米茎基腐病的种衣剂，其特征在于，有效成分为权利要求2所述的复合菌剂。

技术总结
本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种芽孢杆菌复合菌剂及其应用。所述芽孢杆菌选自萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)ZY1825和副地衣芽孢杆菌(Bacillus paralicheniformis)ZYGT1811，所述萎缩芽孢杆菌ZY1825的保藏编号为CCTCC NO:M 2021736，所述副地衣芽孢杆菌ZYGT1811为保藏编号CCTCC NO：M 2020759。所述萎缩芽孢杆菌ZY1825与所述副地衣芽孢杆菌ZYGT1811对禾谷镰孢菌均有抑制活性，且二者复配能够协同增效，平板抑菌率达到61.35％，所述芽孢杆菌组合物可作为种衣剂有效成分用来防治玉米茎基腐病，具有持效期长、防治效果好、对环境安全的特点。

技术研发人员：刘永刚,任兴平,张海英,梁玉婷,王艺璇
受保护的技术使用者：甘肃省农业科学院植物保护研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15