人脑胶质母细胞瘤细胞系、肿瘤动物模型、类器官的建立方法及其应用

本申请涉及生物领域，更具体地说，涉及一种人脑胶质母细胞瘤细胞系、肿瘤动物模型、类器官的建立方法及其应用。

背景技术：

1、胶质母细胞瘤是一种脑肿瘤中的恶性肿瘤，属于成人型弥漫性胶质瘤，who分级为ⅳ级。胶质母细胞瘤具有血管增生、核多形性和坏死灶等特征，容易导致预后不良。患者的平均生存期仅为14个月，2年生存率为2％。目前常用的治疗方式为手术切除肿瘤组织，之后采用放疗和替莫唑胺联合治疗的方式，但患者都在一段时间后复发，很难完全恢复，难以延长患者的生存期。

2、成人胶质母细胞瘤的分子特征为idh1/2野生型。cns who(2021版)描述了中枢神经系统肿瘤的完整分类及整合诊断方式(组织学诊断、cns who分级和分子检测结果)。基于新的诊断标准，对于胶质母细胞瘤的诊断及治疗还需检测其他的分子特征，例如：tert启动子区、7号染色体和10号染色体、egfr等。因此，明确胶质母细胞瘤的分子特征是治疗该疾病的关键。

3、胶质母细胞瘤细胞的体外培养技术为体外建立个性化的治疗方案、药物筛选提供了新的思路。目前研究中常用的胶质母细胞瘤细胞系有u-87mg，u251及ln-229等细胞系，但在新的诊断标准下，利用已有的细胞系在药物筛选中不占优势，很难解决胶质母细胞瘤患者不能完全恢复的现状。因此，获得病人来源且已知分子特征的胶质母细胞瘤细胞系显得尤为重要。

4、因此，根据新的胶质母细胞瘤的诊断标准，获得具有明确的生物学特性且可稳定传代的胶质母细胞瘤细胞系以用于广泛的研究应用成为需要解决的技术问题。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本申请提出了一种人脑胶质母细胞瘤细胞系、肿瘤动物模型、类器官的建立方法及其应用。

2、本申请的技术方案之一是提供了一种人脑胶质母细胞瘤细胞系，其保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：c2022327。

3、本申请的技术方案二是提供了上述人脑胶质母细胞瘤细胞的子代细胞系。

4、本申请的技术方案之三是提供了上述胶质母细胞瘤细胞系的肿瘤动物模型。优选地，所述肿瘤动物模型是人脑胶质母细胞瘤细胞系接种到免疫缺陷小鼠体内而形成的。

5、本申请的技术方案之四是提供了上述胶质母细胞瘤细胞系构建的肿瘤类器官模型。

6、本申请的技术方案之五是提供了上述胶质母细胞瘤细胞系的胶质母细胞瘤类器官模型。上述胶质母细胞瘤类器官的构建方法为本领域常规使用的构建方法。所述胶质母细胞瘤类器官的构建方法可以包括以下步骤：将上述胶质母细胞瘤细胞系悬浮培养，待细胞成团后，加入基质胶(用培养基稀释)，继续悬浮培养即得胶质母细胞瘤类器官。

7、本申请的技术方案之六是提供了上述人脑胶质母细胞瘤细胞系、子代细胞系、肿瘤动物模型和类器官模型的用途。

8、本申请的人脑胶质母细胞瘤细胞系来源于基于新的诊断标准下的人脑胶质母细胞瘤组织；建立了信息完备的人脑胶质母细胞瘤稳转细胞系(包括细胞来源患者的组织病理特征，肿瘤组织的分子特征，细胞系的基因背景以及细胞系的生物学特征)，可稳定多次传代，具有成瘤性，可用于构建人脑胶质母细胞瘤类器官和肿瘤动物模型。

9、本申请的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

10、生物材料的保藏

11、本申请的人脑胶质母细胞瘤细胞系，命名为tth-03，属于人源胶质瘤，于2022年10月30日保藏在中国典型培养物保藏中心(cctcc)，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072，保藏编号为cctcc no：c2022327。

技术特征：

1.人脑胶质母细胞瘤细胞系，其特征在于，该人脑胶质母细胞瘤细胞系的保藏编号为cctcc no：c2022327。

2.人脑胶质母细胞瘤细胞系，其特征在于，该人脑胶质母细胞瘤细胞系为权利要求1所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系的子代细胞系。

3.权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系在构建肿瘤动物模型中的应用。

4.肿瘤动物模型，该肿瘤动物模型由将权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系接种到免疫缺陷小鼠体内而成。

5.权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系在构建胶质母细胞瘤类器官中的应用。

6.胶质母细胞瘤类器官，该胶质母细胞瘤类器官包括权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系。

7.权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系在制备诊断试剂中的应用。

8.权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系在体外非治疗目的的科学研究方案中的应用。

9.权利要求1或2所述的人脑胶质母细胞瘤细胞系在药物筛选中的应用。

10.权利要求4所述的肿瘤动物模型在制备诊断试剂中的应用。

11.权利要求4所述的肿瘤动物模型在体外非治疗目的的科学研究方案中的应用。

12.权利要求4所述的肿瘤动物模型在药物筛选中的应用。

13.权利要求6所述的胶质母细胞瘤类器官在制备诊断试剂中的应用。

14.权利要求6所述的胶质母细胞瘤类器官在体外非治疗目的的科学研究方案的应用。

15.权利要求6所述的胶质母细胞瘤类器官在药物筛选中的应用。

技术总结
本申请涉及生物领域，涉及一种人脑胶质母细胞瘤细胞系、肿瘤动物模型、类器官的建立方法及其应用。本申请的人脑胶质母细胞瘤细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC No：C2022327。本申请的人脑胶质母细胞瘤细胞系来源于基于新的诊断标准下的人脑胶质母细胞瘤组织；建立了信息完备的人脑胶质母细胞瘤稳转细胞系(包括细胞来源患者的组织病理特征，肿瘤组织的分子特征，细胞系的基因背景以及细胞系的生物学特征)，可稳定多次传代，具有成瘤性，可用于构建人脑胶质母细胞瘤类器官和肿瘤动物模型。

技术研发人员：季楠,郝兆年,王杰军
受保护的技术使用者：首都医科大学附属北京天坛医院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11