一种干酪乳杆菌增殖促进剂及其应用

本发明涉及微生物培养领域，尤其涉及一种干酪乳杆菌增殖促进剂及其应用。

背景技术：

1、辣木(moringa oleiferalam.)原产于印度，并广泛分布于亚洲和非洲的热带和亚热带地区。辣木叶富含蛋白质、钙、铁、维生素a等营养物质。辣木叶具有多种生物活性，包括抗氧化、降血压、抗炎、抗衰老和调节肠道功能等。有研究指出，长期服用辣木叶可提高人体免疫力，具有一定的疾病预防作用。

2、乳杆菌作为常见益生菌，广泛存在于人体胃肠道中，具有增强肠道上皮功能、免疫调节、抗癌、抗炎等方面发挥重要作用。乳杆菌属微生物的数量与人体健康密切相关。乳杆菌属微生物数量因宿主遗传、年龄或疾病状态等存在差异；同时，也受饮食、乳酸的分泌以及胆盐的耐受性的影响。在体外，乳杆菌的生长受到碳源、氮源、其他生长因子等影响。乳杆菌属被广泛用于益生菌发酵食品工业中，且对人体健康有益。因此，提高细菌活力以及筛选乳杆菌增殖作用的功能因子尤为重要。

3、干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus casei)作为革兰氏阳性、不产芽孢的兼性异型的乳杆菌属微生物，是国内外研究和应用较多的益生菌之一，其因益生特性而闻名，常用于食品发酵或辅助发酵以改善食品特性。研究证实，干酪乳酪杆菌发酵果蔬汁可产生多种有益作用，如提高果蔬抗氧化能力和活性成分、增强生理功效以及改善风味等，可有效改善和提高产品品质。

4、近年来，寻找天然的益生元已成为食品科学领域的热点。辣木叶富含多种活性物质。有研究报道，辣木叶多酚对曲霉菌、杆菌和枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用；辣木叶提取物和复合益生菌联用可显著增强蛋鸭抗氧化性能、改善脂质代谢和提高免疫球蛋白分泌量。但到目前为止，鲜见辣木叶提取物对乳杆菌属微生物生长影响的系统研究报道。

技术实现思路

1、本发明目的在于提供辣木叶水提醇溶物在制备干酪乳杆菌增殖促进剂中的应用，本发明发现辣木叶水提醇溶物可促进干酪乳杆菌的增殖，促进干酪乳杆菌生物膜的形成并增加生物膜的黏附性、表面疏水性以及酸碱电荷；同时促进胞外蛋白含量分泌，增加还原糖和总糖的含量；还能提高干酪乳杆菌的抗冻能力、耐nacl能力以及β-半乳糖苷酶的活性，进而可以提高菌群的环境适应能力，有利于在肠道的定植，改善肠道菌群紊乱，用于发酵产品还能提高底物发酵效率。

2、为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：一种干酪乳杆菌增殖促进剂，所述增殖促进剂为辣木叶水提醇溶物。

3、作为优选，所述辣木叶水提醇溶物的制备过程如下：

4、辣木叶水提取物：将辣木叶粉按照料液比1：8-10加入煮沸的去离子水中，混合均匀后煮沸数分钟，采用纱布过滤，将滤液离心后收集上清液，真空冷冻干燥，得到辣木叶水提物干粉；

5、辣木叶水提醇溶物：称取辣木叶水提物干粉，按料液比1：8-12加入灭菌水，缓慢加入无水乙醇，快速搅拌混合物，使乙醇浓度达到65-75％，于2-6℃放置20-30h后，提取物明显分层，过滤得到上清液，上清液浓缩去除乙醇后得到浅绿色浸膏状物质，即为辣木叶水提醇溶物。

6、本发明还提供所述增殖促进剂在促进干酪乳杆菌增殖中的应用。用于体外促进干酪乳杆菌生长以实现乳杆菌粉的工业化生产；同时还可将辣木叶水提醇溶物制成相应的功能保健食品或药物，以有效预防和/或治疗肠道菌群紊乱。

7、作为优选，所述辣木叶水提醇溶物在培养基或者在发酵底物中的添加量为0.05-0.5％。作为进一步优选，添加量为0.05-0.1％，在此范围内，促进增长率更高。

8、本发明发现所述辣木叶水提醇溶物不仅能提高干酪乳杆菌的增殖，促进干酪乳杆菌生物膜的形成并增加生物膜的黏附性、表面疏水性以及酸碱电荷；同时促进胞外蛋白含量分泌，增加还原糖和总糖的含量；还能提高干酪乳杆菌的抗冻能力、耐nacl能力以及β-半乳糖苷酶的活性。

9、本发明还提供含有所述干酪乳杆菌增殖促进剂的培养基，用于培养干酪乳杆菌。

10、本发明利用植物mrm广泛靶向代谢组学技术检测辣木叶水提醇溶物的主要物质构成，并从生物膜特性、胞外蛋白、总糖和还原糖含量、耐冻和耐盐能力等方面评价其促生作用特点。辣木叶水提物和辣木叶水提醇沉物对乳杆菌的生长主要表现为较低的促进作用或抑制作用，辣木叶水提醇溶物在低浓度下刺激干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus casei,lca)的生长，促进率达16％以上。辣木叶水提醇溶物富含黄酮类、氨基酸类和核苷酸类等物质，可促进lca生物膜的形成并增加生物膜的黏附性、表面疏水性以及酸碱电荷；同时促进胞外蛋白含量分泌，增加还原糖和总糖的含量；还显著提高了lca的抗冻能力以及β-半乳糖苷酶的活性；此外，辣木叶水提醇溶物还提高了lca的耐nacl能力，筛选出具有促进作用的辣木叶水提醇溶物+干酪乳酪杆菌“益生组合”。

11、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明提供的辣木叶水提醇溶物可促进肠道益生菌干酪乳杆菌的增殖，增加其丰度，因此不仅可将其制成乳杆菌增殖促进剂，用于体外促进干酪乳杆菌生长以实现乳杆菌粉的工业化生产；同时还可将辣木叶水提醇溶物制成相应的功能保健食品或药物，以有效预防和/或治疗肠道菌群紊乱。

技术特征：

1.一种干酪乳杆菌增殖促进剂，其特征在于，所述增殖促进剂为辣木叶水提醇溶物。

2.根据权利要求1所述的干酪乳杆菌增殖促进剂，其特征在于，所述辣木叶水提醇溶物的制备过程如下：

3.根据权利要求1或2任一所述的增殖促进剂在促进干酪乳杆菌增殖中的应用。

4.根据权利要求3所述的增殖促进剂在促进干酪乳杆菌增殖中的应用，其特征在于，所述辣木叶水提醇溶物在培养基或者在发酵底物中的添加量为0.05-0.5％。

5.根据权利要求4所述的增殖促进剂在促进干酪乳杆菌增殖中的应用，其特征在于，所述辣木叶水提醇溶物能提高干酪乳杆菌的增殖，促进干酪乳杆菌生物膜的形成并增加生物膜的黏附性、表面疏水性以及酸碱电荷；同时促进胞外蛋白含量分泌，增加还原糖和总糖的含量；还能提高干酪乳杆菌的抗冻能力、耐nacl能力以及β-半乳糖苷酶的活性。

6.一种含有权利要求1或2所述的干酪乳杆菌增殖促进剂的培养基。

技术总结
本发明公开了一种干酪乳杆菌增殖促进剂及其应用，所述增殖促进剂为辣木叶水提醇溶物。本发明提供的辣木叶水提醇溶物可促进肠道益生菌干酪乳杆菌的增殖，增加其丰度，促进干酪乳杆菌生物膜的形成并增加生物膜的黏附性、表面疏水性以及酸碱电荷；同时促进胞外蛋白含量分泌，增加还原糖和总糖的含量；还能提高干酪乳杆菌的抗冻能力和耐NaCl能力。因此不仅可将其制成乳杆菌增殖促进剂，用于体外促进干酪乳杆菌生长以实现乳杆菌粉的工业化生产；同时还可将辣木叶水提醇溶物制成相应的功能保健食品或药物。

技术研发人员：高晓余,田洋,盛军,罗开莲,赵艳
受保护的技术使用者：云南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17