一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法

本发明涉及天然药物化学领域，具体为一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法。

背景技术：

1、在自然界中有很多成分具有抗衰老的效果，其中芍药苷具有很大的抗氧化和抗衰老的功效；芍药苷是一种从芍药植物中提取出来的天然化合物，有抗炎、抗氧化、抗肿瘤的作用；关于芍药苷的提取分离纯化技术，目前一般采用传统回流提取工艺，但这种方法在提取芍药苷时存在溶剂消耗量大、有效成分损失大的缺点。

2、如申请公布号为cn102443028a公布了一种从白芍中提取芍药苷的方法，其特征在于：包含以下含量原料：芍药500kg、75％丙酮水溶液450l、乙酸乙酯6l、甲醇2l；本发明通过使用75％的丙酮水溶液作为芍药中有机成分的溶剂，能够有效的溶解芍药中的芍药苷，将乙酸乙酯作为萃取液，提高了芍药苷的提取效率，将甲醇和乙醇作为芍药苷的纯化，减少了浪费，可以得到纯度较高的芍药苷，同时甲醇、乙醇、乙酸乙酯均为工业生产中常见溶剂，不易对环境造成负担。

3、但上述的工艺较为复杂，需经过多个提取操作步骤，包括不限于加热、搅拌、冷却、分离、蒸发，工艺复杂性较高，因此在用于大规模生产时需要经过专业的操作人员，不利于推广使用。

技术实现思路

1、(一)解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，提高了芍药苷的提取分离纯化效率，简化了提取步骤，获得更高纯度的芍药苷，通过抗衰老试验验证了芍药苷的抗衰老活性。

3、(二)技术方案

4、为实现上述目的，本发明提供了一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法：包括以下含量原料：

5、白芍药材3g、白芍提取液75ml、90％乙醇30ml、纯净水2l；

6、其中白芍提取液中离子液体为咪唑类离子液体，具体为1-丙基-3-甲基咪唑磷酸二氢离子液体、90％乙醇按重量10:1加入10ml丙酮混合配比得到，离子液体浓度为0.1mol/l。

7、说明：由于芍药苷在乙醇中的溶解度最高，可以使用95％乙醇作为提取溶剂，提高芍药苷的溶解和提取效率；咪唑类离子液体属于芳香杂环类化合物，可以和白芍提取物形成化学键的相互作用，溶解白芍中的抗氧化有效成分；

8、优选的，所述白芍提取液按实际含量计，包括1-丙基-3-甲基咪唑磷酸二氢离子液体200ml、90％乙醇20ml、丙酮10ml。

9、优选的，所述白芍提取液白芍提取液由以下步骤制备得到：

10、a1：准备所需的离子液体200ml、90％乙醇20ml；

11、a2：将乙醇溶液置于烧杯中，缓慢倒入离子液体，并进行搅拌；

12、a3：完成后置于搅拌器中，设置参数转速为900r/min、运转时间5min，完成后待溶液沉淀分层取上清液备用。

13、优选的，所述步骤a1中所需离子液体浓度均为0.1mol/l。

14、优选的，所述一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述离子液体的碳链长度为c8。

15、说明：离子液体浓度过低时，分子间吸引力较弱，溶剂提取不完全，当离子液体浓度过高时，提取液的粘度大幅增加，使得白芍粉末在提取液中分散不均匀，白芍粉末不能充分得到提取，所以将离子液体最佳摩尔浓度设为0.1mol/l；硝酸根、磷酸根、卤素以及谷氨酸盐对白芍提取物具有较强的提取能力，在实际操作过程中发现1-庚基-3甲基咪唑谷氨酸盐对白芍中主要单体芍药苷的提取效果最为突出，所以将碳链长度固定为c8。

16、优选的，所述芍药苷提取分离纯化包含以下重量原料：白芍药材3g、白芍提取液75ml、90％乙醇30ml、纯净水2l。

17、优选的，所述芍药苷的提取分离纯化方法包括以下步骤：

18、s1：根据所选的原料配方，确定比例为白芍药材：白芍提取液＝1:25；

19、s2：准备3g白芍药材，使用纯净水将其冲洗干净并晾干等待备用；

20、s3：将白芍药材投入粉碎机中进行粉碎，粉碎时间为30min，完成后过筛，颗粒大的药材粉末重复该步骤直至完全过筛后，收集细粉末等待后续使用；

21、s4：将粉末倒入到45ml白芍提取液中不断搅拌至完全溶解，放入超声波清洗仪中进行提取，设置超声参数功率为200w，时间为20min；

22、s5：超声波提取完成后，将溶液置于低速离心机中，设置离心参数转速为1500r/min，时间5min，取上清液备用，即为提取液；

23、s6：将纯化的芍药苷用于抗衰老实验，通过涂抹皮肤，设置对照组和实验组，检测皮肤角质层水分含量的变化率、皮肤皱纹变化率和体内自由基清除率评估芍药苷的抗衰老活性。

24、说明：通过微波-超声提取工艺，加快芍药苷的析出，提高了提取效率；通过不断改进微波的频率、时间、温度确定芍药苷析出的最佳工艺条件，提高了产品的质量和纯度。

25、优选的，所述一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：步骤s5采用超声微波联合离子液体辅助提取技术。

26、(三)有益效果

27、本发明提供了一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，具备以下有益效果：

28、(1)该芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，通过使用95％乙醇作为提取溶剂，能够最大程度的溶解芍药药材中的有效成分芍药苷；通过微波-超声提取工艺，加快芍药苷的析出，提高了提取效率；通过不断改进微波的频率、时间、温度确定芍药苷析出的最佳工艺条件，提高了产品的质量和纯度。

29、(2)该芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，通过对芍药苷抗衰老活性的试验并研究，了解芍药苷在抗氧化性方面的效果，可以在一定程度上对研究细胞衰老问题提供理论数据；通过对工艺路线的不断改进，确定芍药苷的最大程度析出，在规模化生产中可以保证产量以及经济效益，实现资源的合理利用，符合了可持续发展的理念。

技术特征：

1.一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：包括以下含量原料：

2.根据权利要求1所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述白芍提取液按实际含量计，包括1-丙基-3-甲基咪唑磷酸二氢离子液体200ml、90％乙醇20ml、10ml丙酮。

3.根据权利要求2所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述白芍提取液由以下步骤制备得到：

4.根据权利要求3所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述步骤a1中所需1-丙基-3-甲基咪唑磷酸二氢离子液体浓度均为0.1mol/l。

5.根据权利要求3所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述离子液体的碳链长度为c8。

6.根据权利要求1所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：包含以下重量原料：白芍药材3g、白芍提取液75ml、90％乙醇30ml、纯净水2l。

7.根据权利要求1所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述芍药苷的提取分离纯化方法包括以下步骤：

8.根据权利要求6所述的一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，其特征在于：所述步骤s5采用超声微波联合离子液体辅助提取技术。

技术总结
本发明涉及生物学领域，具体公开了一种芍药苷的提取分离纯化及其抗衰老活性研究的方法，包括白芍药材3g、白芍提取液75ml、90％乙醇30ml、纯净水2L。所述白芍提取液包含以下原料：1‑丙基‑3‑甲基咪唑磷酸二氢离子液体200ml、90％乙醇20ml。通过采用上述技术方案，本发明使用离子液体作为提取溶剂，增强了芍药细胞的溶解性和渗透性，从而提高效率，将90％乙醇作为辅助剂，有效去除了杂质进一步纯化芍药苷；上述配方制作简单易取，设置多项参考例，配比严谨，所得工艺路线提高了芍药苷的提取率和纯化程度，通过抗衰老活性研究，证明芍药苷具有一定的抗衰老活性，为其在抗衰老领域的应用提供了科学依据。

技术研发人员：彭效明,葛仪凤,杨颖,居瑞军,杨思敏,管洁,严晓强,彭思语,赵邑镇
受保护的技术使用者：北京石油化工学院
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7