USP-7在制备用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的产品中的应用

本发明属于分子诊断领域，具体涉及usp-7在制备用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的产品中的应用。

背景技术：

1、糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，dcm)是糖尿病的主要心血管并发症。现有研究表明，心肌细胞线粒体失稳态以及心肌能量代谢障碍是dcm发生发展的关键致病因素。现有研究证实，dcm患者心肌细胞内脂滴聚集、线粒体形态完整性受损以及动力学失衡(表现为线粒体分裂增加、融合减少)、心肌能量代谢障碍，从而导致心肌肥厚以及纤维化等典型病理特征。dcm进展缓慢，往往当心脏表现出某种程度的功能障碍时才能得到诊断，是糖尿病患者死亡的重要原因之一。因此，及时诊断出dcm于临床诊疗意义重大。近年来许多研究聚集于血清生物标志物，为dcm的早期诊断提供了依据。

2、中国专利申请202310432328.x公开了mir-194-3p在制备治疗糖尿病心肌病的药物中的应用，mir-194-3p过表达可以明显改善糖尿病小鼠的左室舒张功能和小鼠心肌纤维化，显著降低纤维化面积，逆转糖尿病心肌纤维化。

3、中国专利申请202180054733.1公开了识别具有增加的可能性进展到因糖尿病导致的终末器官损伤的对象的方法，其包含：比较来自所述对象的生物样本中lncrna的量与参考值，以及如果样本中所述lncrna的量相对于所述参考值增加，则识别所述对象具有增加的可能性进展到因糖尿病导致的终末器官损伤。

4、目前本领域需要更多的用于dcm诊断或风险评估的生物标志物。

技术实现思路

1、usp-7，又称疱疹病毒相关蛋白酶(herpes virus-associated ubiquitin-specific protease，hausp)，是去泛素酶最大亚家族-泛素特异性蛋白酶(ubiquitin-specific proteases，usps)家族的一员。usp-7是一个128kda的蛋白质，位于染色体16p13.2上。其蛋白主要由n端肿瘤坏死因子(n-terminal tumor necrosis factorreceptor-associated factor，traf)样结构域(残基53-206)、催化核心结构域(残基208-560)、c端hausp泛素样结构域(残基564-1084)三部分组成。催化核心结构域负责识别并结合泛素，行使催化蛋白质底物去泛素化的功能，是usp-7功能执行的核心结构域。

2、目前尚未有研究公开usp-7在糖尿病性心脏病诊断或风险评估中的应用。

3、为了实现上述技术目的，本发明提出了以下技术方案：

4、在一个方面，本发明提供了usp-7在制备用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的产品中的应用。

5、在一些实施方式中，所述糖尿病性心脏病包括，但不限于冠心病(coronaryartery disease，cad)、糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy，dc)或心脏自主神经病变(cardiac autonomic neuropathy，can)。

6、在一些优选的实施方式，所述糖尿病性心脏病为糖尿病性心肌病。

7、在一些实施方式中，所述产品包括，但不限于检测试剂、试剂盒或检测系统。

8、在一些实施方式中，所述检测试剂为针对所述usp-7具有特异性的物质。

9、在一些实施方式中，所述检测试剂选自以下至少一种或其组合：

10、特异性结合usp-7蛋白的抗体或其抗原结合片段，优选单克隆抗体；特异性识别usp-7基因或其转录本的探针、基因芯片、引物等；

11、针对usp-7的化学分析设备，例如质谱、液质联用、测序仪；和/或

12、用于在基因水平和/或蛋白质水平上检测所述usp-7的物质，如用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质：免疫组织化学法，如免疫荧光分析、化学发光法、反向酶联免疫吸附、免疫胶体金法；western印迹法；northern印迹法；pcr或生物芯片法。

13、在一些实施方式中，所述试剂盒或检测系统包含所述诊断试剂。

14、在另一个方面，本发明提供了一种用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的产品，所述产品包括：

15、用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的检测试剂；

16、可选地，用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的其他检测试剂。

17、在一些实施方式中，所述糖尿病性心脏病包括，但不限于冠心病、糖尿病性心肌病或心脏自主神经病变，优选糖尿病性心肌病。

18、在一些实施方式中，所述检测试剂选自以下至少一种或其组合：

19、特异性结合usp-7蛋白的抗体或其抗原结合片段，优选单克隆抗体；特异性识别usp-7基因或其转录本的探针、基因芯片、引物等；

20、针对usp-7的化学分析设备，例如质谱、液质联用、测序仪；和/或

21、用于在基因水平和/或蛋白质水平上检测所述usp-7的物质，如用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质：免疫组织化学法，如免疫荧光分析、化学发光法、反向酶联免疫吸附、免疫胶体金法；western印迹法；northern印迹法；pcr或生物芯片法。

22、在一些实施方式中，所述其他检测试剂包括：

23、针对现有的糖尿病性心脏病诊断或风险评估的标志物的检测试剂，例如针对脂联素、胰岛素样生长因子结合蛋白-7、循环激活素a、白介素-1β等的检测试剂。

24、在又一个方面，本发明提供了一种用于糖尿病性心脏病诊断或风险评估的检测系统，所述检测系统包括检测装置、计算装置和输出装置。

25、在一些实施方式中，所述检测装置包括进样器和检测器，所述进样器用于采集来自受试者的样品，所述检测器用于检测usp7蛋白、usp7基因或其转录本的表达水平。

26、在一些实施方式中，所述计算装置包括存储器和处理器，所述述存储器中存储有计算机程序，所述处理器被配置为执行所述存储器中存储的计算机程序，以实现如下判别：

27、若所述样品中usp7蛋白、usp7基因或其转录本的表达水平相对于正常对照值提高，则判定受试者罹患糖尿病性心脏病或存在罹患糖尿病性心脏病的风险。

28、在一些实施方式中，所述计算装置包括电脑主机、中央处理器和网络服务器中的至少一种。

29、在一些实施方式中，所述输出装置用于输出所述检测装置的检测结果和/或所述计算装置的判别结果。

30、在一些实施方式中，所述输出装置包括显示器、打印机和音频输出装置中的至少一种。

31、在一些实施方式中，所述糖尿病性心脏病包括，但不限于冠心病、糖尿病性心肌病或心脏自主神经病变，优选糖尿病性心肌病。

32、在又一个方面，本发明提供了一种筛选预防和/或治疗糖尿病性心脏病的药物的方法，所述方法包括：

33、检测药物对受试者样本中的usp-7的影响；

34、若施用所述药物后，受试者样本中的usp-7蛋白、usp-7基因或其转录本的水平降低，则所述药物对糖尿病性心脏病具有预防和/或治疗效果。

35、在一些实施方式中，所述糖尿病性心脏病包括，但不限于冠心病、糖尿病性心肌病或心脏自主神经病变，优选糖尿病性心肌病。

36、在又一个方面，本发明提供了usp-7抑制剂在制备预防和/或治疗糖尿病性心脏病的药物中的应用。

37、在一些实施方式中，所述糖尿病性心脏病包括，但不限于冠心病、糖尿病性心肌病或心脏自主神经病变。

38、在一些实施方式中，所述usp-7抑制剂包括，但不限于p22077，usp7-in-1，gne-6776，ft-671，ft-827，gne-3086或p5091。

39、在一些优选的实施方式中，所述usp-7抑制剂为p5091。

40、本发明首次发现了usp-7表达量上调和糖尿病性心肌病之间的相关性，并进一步明确了usp-7去泛素化调节pgc1β-pparα，介导心肌细胞线粒体动力学失衡以及能量代谢障碍，促进糖尿病性心肌病的发生，为临床诊断糖尿病性心肌病提供了标志物。本发明还提供了usp-7抑制剂在预防和/或治疗糖尿病性心肌病提供了理论依据，在临床治疗上具有重要意义。