1.一种疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,采用细胞筛选方法,分别对待筛选佐剂的细胞毒性、发挥作用的信号通路进行筛选和报告,得到具有引起固有免疫反应的疫苗佐剂。
2.根据权利要求1所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述细胞筛选方法包括对待筛选佐剂进行细胞毒性实验进行初步筛选,再通过作为宿主细胞对所述待筛选佐剂的发挥作用的通路进行二次筛选得到所述疫苗佐剂;最后,再通过小鼠体内免疫实验进行免疫功能验证。
3.根据权利要求2所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述细胞毒性实验包括通过酶标仪检测细胞存活率;和/或,所述小鼠体内免疫实验包括小鼠特异性igg的效价的测试以及黑色素瘤抑制实验。
4.根据权利要求3所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述细胞毒性实验中,将毒性筛选细胞加入至含有所述待筛选佐剂的培养基中进行培养,再进行细胞裂解,然后通过细胞活率检测来判断所述待筛选佐剂的细胞毒性,得到初步筛选佐剂。
5.根据权利要求4所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述的细胞活率检测采用荧光素酶系统的细胞活力检测试剂;通过细胞裂解,释放atp激发试剂中的荧光信号,根据发光强度与atp量成正比关系,对活细胞数目进行定量检测。
6.根据权利要求2所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,将所述初步筛选佐剂在宿主细胞中进行验证所述宿主细胞能否稳定表达完整的nf-κb和/或ird信号通路。
7.根据权利要求6所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述初步筛选佐剂对nf-κb和/或ird信号通路的诱导情况的验证方法通过检测酶活性的方法进行验证;所述检测酶活性的方法包括将所述宿主细胞中加入所述初步筛选佐剂,进行孵育后得到上清液;采用比色酶分析法,利用所述宿主细胞中的胚胎碱性磷酸酶(seap)或荧光素酶活性进行对比判断,在所述上清液中加入quanti-blue溶液或quanti-luc溶液,并于阳性对照组进行对比,和/或,所述阳性对照组为脂多糖(lps)阳性对照组。
8.根据权利要求2-7任一项所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述毒性筛选细胞为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;所述宿主细胞为表达nf-κb和/或ird信号通路的thp1-dual细胞。
9.根据权利要求1-7任一项所述的疫苗佐剂的筛选方法,其特征在于,所述待筛选佐剂为纳米金属氧化物。
10.一种疫苗佐剂,采用如权利要求1-9任一项所述的筛选方法筛选得到,包括四氧化三铁纳米佐剂。