抗体分子、核酸、制药用途及炎性疾病治疗方法与流程

本发明属于细胞免疫学，具体涉及抗体分子、核酸、制药用途及炎性疾病治疗方法。

背景技术：

1、il-17细胞因子家族由6个成员组成，分别为il-17a、il-17b、il-17c、il-17d、il-17e、il-17f，最突出的成员是il-17a和il-17f，它们形成功能性同二聚体或异二聚体，并且在同一染色体上批次相邻，具有很大的重叠促炎作用。il-17受体家族为多聚体蛋白质，家族内包含五种分子，il-17ra、il-17rb、il-17rc、il-17rd和il-17re。il-17a可以刺激一系列促炎性细胞因子的分泌，例如il-6，肿瘤坏死因子-α(tnf-α)，il-1β，以及白细胞动员的细胞因子，如催化因子配体1(cxcl1)和配体8(cxcl8)。il-17a的效应子功能被认为在抵抗细胞外和细胞内病原体的宿主反应中起关键作用，并且与许多自身免疫性炎性疾病的发病机制有关。

2、单域抗体(single-domain antibody，sdab)，通常也称为纳米抗体(nanobody，nb)，是指天然缺失轻链、仅含重链，具有抗原结合能力的最小抗体片段，单域抗体的分子量为15kda，单域抗体的结构由4个主要负责蛋白质架构和折叠的框架区和3个负责与抗原相互作用高度异变的抗原结合环或互补决定区组成。单域抗体虽然结构简单，体积较小，但其拥有较高的亲和力，它可以识别细胞表面上某些较小或较为隐蔽的抗原。单域抗体较小尺寸还是基因治疗载体表达的一个优势，因为其减小了转导基因的大小，可增加病毒基因治疗载体的滴度。单域抗体保存时间长，具有良好的稳定性，能够抵抗化学变性和热变性。单域抗体的经济生产成本低。单域抗体因其特有的特性逐渐称为疾病治疗和诊断过程中的替代品。

3、现有技术(il17a/f nanobody sonelokimab in patients with plaquepsoriasis:a multicentre,randomised,placebo-controlled,phase 2b study,kim apapp,mark a weinberg,alun morris,clinical trial,2021；397(10284):1564-1575.)中公开了一种新型的三价纳米抗体sonelokimab，是由对人白细胞介素-17a、il-17f和人血清白蛋白特异的单价骆驼科纳米抗体组成。在该项实验过程中，评估了上述的纳米抗体对斑块性银屑病患者的治疗作用及安全性等性能，并在实验过程中采用secukinumab作为阳性对照，实验结果表明，与安慰剂组相比，施用四种剂量的sonelokimab能够有效的治疗银屑病患者，并且具有较好的安全性和耐受性。

4、现有技术中对于抗il-17a单域抗体的研究较少，本领域仍然需要开发一种新的能够与il-17a高亲和力结合，稳定性更强，阻断效果好的抗il-17a单域抗体。

5、本发明系发明人针对自主开发的抗il-17a抗体所提出的专利申请。

6、除本发明请求保护的抗体外，发明人同时开发出另外8个抗体，基于专利法单一性的相关规定，对9个不同抗体分别请求保护。

7、发明人还根据这9个抗体开发了12个串联抗体，基于专利法单一性的相关规定，对12个不同的串联抗体分别请求保护。

8、发明人还根据这12个串联抗体，开发了基因修饰干细胞技术，基于专利法单一性的相关规定，对3个不同的基因修饰干细胞以及3项不同的应用分别请求保护。

9、为便于理解本发明技术方案，可选地参阅本项目其他系列申请文本。

技术实现思路

1、本发明的术语和声明：

2、1、如本文所用，术语“氨基酸”：包含天然氨基酸、合成氨基酸、以及以类似于天然氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸在本文中可以由其通常已知的三字母符号或由iupac-iub生物化学命名法委员会(biochemicalnomenclature commission)所推荐的单字母符号来提及。

3、2、如本文所用，术语“抗体”：指特异性结合和识别抗原的包括免疫球蛋白基因的构架区的多肽或其片段。术语抗体的使用意指包含全抗体和其抗原结合片段。术语抗体包含单特异性抗体、双特异性抗体和多特异性抗体，只要其表现所期望的生物活性或功能即可。本发明中，抗体是指具有il-17a结合活性的，包括seq id no:1所述的cdr1区、seq idno:2所述的cdr2区和seq id no:3所述的cdr3区的多肽，还包括具有与本发明抗体相同功能包含上述cdr区的多肽的变异形式。所述的变异形式包括：一个或多个氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在c末端和/或末端添加一个或多个氨基酸。

4、3、如本文所用，术语“单克隆抗体”：指从实质上均质抗体的群体获得的抗体，即构成所述群体的个别抗体除了可以少量存在的可能天然存在的突变之外是相同的。单克隆抗体针对单一抗原位点具高度特异性。此外，相比于通常包含针对不同决定子(表位)的不同抗体的常规(多克隆)抗体制剂，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定子。修饰语“单克隆”指示如从实质上均质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生抗体。

5、4、如本文所用，术语“单域抗体(vhh)”、“单域抗体”(single domain antibody,sdab，或纳米抗体nanobody)具有相同的含义，指克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体，它是具有完整功能的最小的抗原结合片段。通常先获得天然缺失轻链和重链恒定区1(ch1)的抗体后，再克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体(vhh)。“本发明单域抗体”、“本发明的抗il-17a单域抗体”可互换使用，均指特异性识别和结合于il-17a的单域抗体。

6、5、如本文所用，术语“同源性”或“同一性”是指两个肽或两个核酸分子之间的序列相似性。同源性可以通过比较每个序列中的位置来确定，为了进行比较的目的，这些位置可能会被对齐。当比较序列中的一个位置被相同的碱基或氨基酸占据时，则分子在该位置是同源的。

7、6、如本文所用，术语“表位”指抗体的互补位所结合的抗原上的任何抗原决定簇。抗原决定簇通常包含分子的化学活性表面基团，例如氨基酸或糖侧链，并且通常具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特征。例如，表位通常以独特的空间构象包括至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个连续或非连续的氨基酸，其可以是“线性”表位或“构象”表位。

8、7、如本文所用，术语“氨基酸序列”是指氨基酸相互连接形成肽链(或多肽)的顺序，氨基酸序列只能按照一个方向读取。

9、8、如本文所用，术语“核酸分子”可以是dna形式或rna形式。dna形式包括cdna、基因组dna或人工合成的dna。dna可以是单链的或是双链的。dna可以是编码链或非编码链。本发明中的核苷酸分子全长序列或其片段通常可以用pcr扩增法或人工合成的方法获得。

10、9、如本文所用，术语“核苷酸序列”是指dna或rna中碱基的排列顺序，即在dna中为a、t、g、c的排列顺序，或者在mrna中a、u、g、c的排列顺序，也包括rrna、trna、mrna中碱基的排列顺序。

11、10、如本文所用，术语“框架区”即骨架区，在免疫球蛋白的h和l链的近n端约有110个氨基酸序列的变化很大，其他部分的氨基酸序列相对恒定，据此可将轻链和重链区分为可变区(v)和恒定区(c)。可变区内包含超变区hvr或称互补决定区cdr与fr骨架区。

12、11、如本文所用，术语“人源化”抗体是指抗体的可变区(vh或vhh)的fr区部分，恒定区部分(即ch和cl区)或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。

13、12、如本文所用，术语“fc区”是指免疫球蛋白的c端区域，该区域是由重链恒定结构域中仅ch2和ch3组成的功能性结构单元。fc没有结合抗原的能力，然而其具有半衰期延长的性质，并且具有恒定的氨基酸序列。

14、13、如本文所用，术语“可变”表示抗体中可变区的某些部分在序列上有所不同，它形成了各种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。然而，可变性并不均匀地分布在整个抗体可变区中。它集中于轻链和重链可变区中称为互补决定区或超变区中的三个片段中。本文中，“可变区”与“互补决定区”可互换使用。

15、14、本文所用的术语“高变区”、“超变区”、“互补决定区”、“hvr”或“cdr”，是指在抗体可变结构域区域中序列上高变和/或形成结构上限定的环(“高变环”)的区域。通常，天然四链抗体包含六个hvr或cdr：三个存在于vh中(h1、h2、h3)，三个存在于vl中(l1、l2、l3)。基于chothia定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l26-l32(l1)、l50-l52(l2)、l91-l96(l3)、h26-h32(h1)、h52-h56(h2)和h96-h101(h3)处(chothia等人，j.mol.biol.196:901-917(1987))。基于kabat定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l24-l34(l1)、l50-l56(l2)、l89-l97(l3)、h31-h35(h1)、h50-h65(h2)和h95-h102(h3)处(kabat等人，sequences of proteinsofimmunological interest,the fifth edtion,public health service,nationalinstitutes of health,bethesda,md(1991))。基于imgt定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l27-l32(l1)、l50-l51(l2)、l89-l97(l3)、h26-h33(h1)、h51-h56(h2)和h93-h102(h3)处(honjo,t.和alt,f.w.(1995)immunoglobulin genes.academic press pp.3-443)。本领域人员公知，在本领域中可以通过多种方法来定义抗体的cdr，例如基于序列可变性的kabat定义规则、基于结构环区域位置的chothia定义规则和基于cdr移植的抗体人源化设计的参考工具(参见j molbiol.273:927-48,1997)。本领域技术人员应当理解的是，除非另有规定，否则术语给定抗体或其区(例如可变区)的“cdr”及“互补决定区”应理解为涵盖如通过本发明描述的上述已知方案中的任何一种界定的互补决定区。虽然本公开请求保护的范围是基于imgt定义规则所示出的序列，但是根据其他cdr定义规则所对应的氨基酸序列也应当落在本发明的保护范围中。

16、15、本文所用的术语“包括(comprises)”或“包含(comprising)”是指“包括但不限于”。该术语旨在是开放式的，以指定任何所述特征、要素、整数、步骤或组件的存在，但不排除一个或多个其他特征、要素，整数、步骤、组件或其组的存在或添加。因此，术语“包含”包括更具限制性的术语“由……组成”和“基本上由……组成”。在一个实施方式中，在整个申请中特别是在权利要求书中使用的术语“包含”可以被术语“由……组成”代替。本文所用氨基酸三字母代码和单字母代码如本领域技术人员知晓，或j biol.chem,243,p3558(1968)中所述。

17、16、本文所用的术语“任选”、“任一”、“任意”或“任一项”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选包含1个抗体重链可变区”意味着特定序列的抗体重链可变区可以但不必须存在。

18、17、本文所用的术语“约”表示其后的数值的±20％的范围。在一些实施方式中，术语“约”表示其后的数值的±10％的范围。在一些实施方式中，术语“约”表示其后的数值的±5％的范围。

19、18、本文所用的术语“和/或”应理解为意指可选项中的任一项或可选项中的任意两项或更多项的组合。

20、19、本文所用的术语“il-17a”或“白介素-17a”，是指一种细胞因子，属于白细胞介素17家族，由t细胞和其他类型的免疫细胞产生，并在免疫系统中发挥重要作用。il-17a主要由th17细胞产生，其他细胞包括cd8+t细胞、γδt细胞、nk细胞及中性粒细胞、肥大细胞和巨噬细胞也表达il-17a。它主要作用于免疫细胞，如巨噬细胞、中性粒细胞和内皮细胞，诱导炎症反应。在一些实例中，该术语包括变体、同源物、直系同源物和旁系同源物。例如，对人il-17a特异的抗体可以在某些情况下与另一物种例如猴的il-17a蛋白交叉反应。在其他实施方式中，对人il-17a蛋白特异的抗体可以完全地对人il-17a蛋白特异而不与其他物种或其他类型的蛋白交叉反应，或者可以与一些其他物种而非所有其他物种的il-17a蛋白交叉反应。

21、20、本文所用的术语“抗il-17a(单域或纳米)抗体”或“il-17a(单域或纳米)抗体”，是指特异性结合il-17a，并且部分或完全地中和、抑制或削弱il-17a活性、和/或使il-17a失活、阻止il-17a应答或由il-17a介导的下游通路或其他il-17a介导的功能的抗体。

22、21、本文所用的术语“抗体”，是指包含由二硫键(s s)相互连接的重链(h)和轻链(l)的糖蛋白。每条重链由重链可变区(本文中缩写为vh)和重链恒定区(本文中缩写为ch)组成。重链恒定区由3个结构域ch1、ch2和ch3组成。每条轻链由轻链可变区(本文中缩写为vl)和轻链恒定区(本文中缩写为vh)组成。轻链恒定区由一个结构域cl组成。轻链分为两类分别为kappa型轻链和lambda型轻链(例如本发明中轻链恒定区cκ/λ表示轻链恒定区为kappa型轻链或者lambda型轻链)。vh区和vl区可以进一步再划分为超变区(也称互补决定区(cdr))，其间插有较保守的构架区或框架区(fr)。每个vh和vl由三个cdr和4个fr组成，从氨基端到羧基端以如下顺序排列：fr1，cdr1，fr2，cdr2，fr3，cdr3，fr4。抗体包含单特异性抗体、双特异性抗体和多特异性抗体，只要其表现所期望的生物活性或功能即可。

23、22、本文所用的术语“活性”、“功能活性”或“生物活性”，或术语“生物性质”或“生物特征”此处可互换使用，包括但不限于表位/抗原亲和力和特异性、在体内或体外中和或拮抗il-17a活性的能力、ic50、抗体的体内稳定性和抗体的免疫原性质。本领域公知的抗体的其它可鉴定的生物学性质或特征包括，例如，交叉反应性(即通常与靶定肽的非人同源物，或与其它蛋白质或组织的交叉反应性)，和保持哺乳动物细胞中蛋白质高表达水平的能力。使用本领域公知的技术观察、测定或评估前面提及的性质或特征，所述技术包括但不局限于elisa、facs或biacore等离子体共振分析、不受限制的体外或体内中和测定、受体结合、细胞因子或生长因子的产生和/或分泌、信号转导和不同来源(包括人类、灵长类或任何其它来源)的组织切片的免疫组织化学。

24、23、本文所用的术语“亲和力”或“结合亲和力”指反映结合对子的成员之间相互作用的固有结合亲和力。分子x对其配偶物y的亲和力可以通常由平衡解离常数(kd)代表，平衡解离常数是解离速率常数和结合速率常数(分别是koff和kon)的比值。亲和力可以由本领域已知的常见方法测量。用于测量亲和力的一个具体方法是本文中的fortebio动力学结合测定法。

25、24、本文所用的术语“高亲和性”或“高亲和力”，对于igg抗体而言，是指对于抗原的kd为1.0×10-6m或更低，优选5.0×10-8m或更低，更优选1.0×10-8m或更低、5.0×10-9m或更低，更优选1.0×10-9m或更低。对于其他抗体亚型，“高亲和性”结合可能会变化。例如，igm亚型的“高亲和性”结合是指kd为10-6m或更低，优选10-7m或更低，更优选10-8m或更低。

26、25、术语“抗体药物偶联物”是指生物活性化合物片段与抗体或其抗原结合片段部分连接得到的物质。生物活性化合物片段与靶向部分可以通过连接子相连。所述连接子在特定环境(例如胞内低ph值环境)中或特定作用(例如溶酶体蛋白酶的作用)下能够断裂，从而使生物活性化合物片段与靶向部分或抗体或其抗原结合片段分离。所述连接子包含可裂解或不可裂解的单元，例如肽或二硫键。生物活性化合物片段与靶向部分或抗体或其抗原结合片段直接通过共价键相连，所述共价键在特定环境或作用下能够断裂，从而使生物活性化合物片段与抗体或其抗原结合片段部分分离。

27、26、本文所用的术语“核酸”或“多核苷酸”是指脱氧核糖核酸(dna)或核糖核酸(rna)及其呈单链或双链形式的聚合物。除非明确地限制，否则术语包括具有与参照核酸相似的结合性质并且以与天然存在的核苷酸相似的方式被代谢的含有已知的天然核苷酸的类似物的核酸(参见，属于kariko等人的美国专利no.8278036，其公开了尿苷被假尿苷替代的mrna分子，合成所述mrna分子的方法以及用于在体内递送治疗性蛋白的方法)。除非另有所指，否则特定核酸序列还隐含地包括其保守修饰的变体(例如，简并密码子取代)、等位基因、直系同源物、snp和互补序列以及明确指出的序列。具体地，简并密码子取代可通过生成其中一个或多个选择的(或全部)密码子的第三位被混合碱基和/或脱氧肌苷残基取代的序列来实现(batzer,nucleic acid res.19:5081(1991)；ohtsuka,j.biol.chem.260:2605-2608(1985)；rossolini,mol.cell.probes 8:91 98(1994))。

28、27、本文所用的术语“载体”是指任何重组多核苷酸构建体，该构建体可用于转化的目的(即将异源dna引入到宿主细胞中)。一种类型的载体为“质粒”，是指环状双链dna环，可将额外dna区段连接至该环中。另一类型的载体为病毒载体，其中可将额外dna区段连接至病毒基因组中。某些载体能够在被引入到的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌载体及游离型哺乳动物载体)。在引入到宿主细胞中后，其他载体(例如，非游离型哺乳动物载体)整合至宿主细胞的基因组中，且因此与宿主基因组一起复制。此外，某些载体能够导引被操作性连接的基因的表达。本文将此类载体称为“表达载体”。

29、28、本文所用的术语“表达载体”是指能够在转化、转染或转导至宿主细胞中时复制及表达目的基因的核酸分子。表达载体包含一或多个表型选择标记及复制起点，以确保维护载体及以在需要的情况下于宿主内提供扩增。

30、29、本文所用的术语“药物组合物”通常是指这样的制剂，其以允许活性成分的生物学活性有效的形式存在，并且不包含对将施用所述组合物的对象具有不可接受的毒性的另外的成分。所述组合物是无菌的。

31、30、术语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围内适合用于与人和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激性、变应性应答或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。

32、31、本文所用的术语“受试者”包括任何人或非人动物。术语“非人动物”包括所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，诸如非人灵长类动物、绵羊、狗、猫、马、牛、鸡、两栖动物、爬行动物等。

33、32、本文所用的术语“治疗有效量”、“治疗有效剂量”和“有效量”，是指本发明的抗il-17a抗体或其抗原结合片段当单独或与其它治疗药物组合给予细胞、组织或受试者时，有效预防或改善一种或多种疾病或病况的症状或该疾病或病况的发展的量。治疗有效剂量还指足以导致症状改善的抗体或其抗原结合片段的量，例如治疗、治愈、预防或改善相关医学病况或者提高这类病况的治疗、治愈、预防或改善的速度的量。当对个体施用单独给予的活性成分时，治疗有效剂量仅是指该成分。当组合施用时，治疗有效剂量是指引起治疗效果的活性成分的综合量，不论是组合、依次给予还是同时给予。治疗剂的有效量将导致诊断标准或参数提高至少10％；通常至少20％；优选至少约30％；更优选至少40％，最优选至少50％。

34、33、本文所用的术语“ec50”是指半最大效应浓度(concentration for 50％ofmaximal effect)，即能引起50％最大效应的浓度。

35、34、本文所用的术语“癌症”或“肿瘤”，是指描述哺乳动物中特征通常为细胞生长不受调控的生理疾患。此定义中包括良性和恶性癌症以及休眠肿瘤或微转移。

36、35、本文所用的术语“自身免疫性疾病”或“自免疫性疾病”，是指由于某些原因造成免疫系统对自身成分的免疫耐受减低、降低和/或破坏，致使自身抗体和/或致敏淋巴细胞损伤自身器官组织而引起的疾病，具体表现为相应组织器官的功能障碍。

37、本发明的技术方案如下：

38、第一方面，本发明提供了一种抗体，所述的抗体包括hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列；所述的hcdr1的氨基酸如seq id no:1所示、所述的hcdr2的氨基酸序列如seq idno:2所示、所述的hcdr3的氨基酸序列如seq id no:3所示；和/或与seq id no:1、seq idno:2和seq id no:3分别至少具有80％的序列相似性的氨基酸序列。

39、优选地，所述抗体的氨基酸序列包含：在seq id no:1-3所示的氨基酸序列上进行取代、缺失、添加和/或修饰中的至少一种方式所得到的氨基酸序列。

40、进一步优选地，所述抗体的氨基酸序列包含：与seq id no:1-3所示的氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸差异的氨基酸序列。

41、seq id no:1为：esllrlya。

42、seq id no:2为：httsdtt。

43、seq id no:3为：hvtsmrdsqny。

44、具体地，一个或多个氨基酸的取代可以是一个或多个氨基酸的保守性取代。这种保守性取代优选地是以下组(a)到(e)中的一个氨基酸被同组中的另一个氨基酸残基取代的取代：(a)小的脂肪族、非极性或弱极性残基：ala、ser、thr、pro和gly；(b)极性、带负电的残基及其(不带电的)酰胺：asp、asn、glu和gln；(c)极性、带正电的残基：his、arg和lys；(d)大的脂肪族、非极性残基：met、leu、he、val和cys；以及(e)芳香族残基：phe、tyr和trp。

45、进一步地，保守性取代如下：ala到gly或到ser；arg到lys；asn到gln或到his；asp到glu；cys到ser；gln到asn；glu到asp；gly到ala或到pro；his到asn或到gln；ile到leu或到val；leu到ile或到val；lys到arg、到gln或到glu；met到leu、到tyr或到ile；phe到met、到leu或到tyr；ser到thr；thr到ser；trp到tyr；tyr到trp；和/或phe到val、到ile或到leu。

46、根据本发明的一些实施方式，所述功能活性变体为与(1)所述的抗il-17a单域抗体具有相同或相近的亲和力或功能的单域抗体变体(突变体)，例如可以特异性结合il-17a并阻断il-17a与其受体结合的变体(突变体)。

47、第二方面，本发明提供了一种抗体，所述的抗体的氨基酸序列包含框架区fr；所述的框架区fr包括：seq id no:4所示的fr1、seq id no:5所示的fr2、seq id no:8所示的fr6、seq id no:7所示的fr4；和/或；与seq id no:4-7所示的氨基酸序列具有至少80％序列一致性的氨基酸序列。

48、优选地，所述抗体的氨基酸序列包含：通过在seq id no:4-7所示的氨基酸序列上进行取代、缺失、添加和/或修饰中的至少一种方式所得到的氨基酸序列。

49、优选地，所述抗体的氨基酸序列包含：与seq id no:4-7所示的氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37或38个氨基酸差异的氨基酸序列。

50、seq id no:4为：dvqlvesggglvqpggslrlscaas。

51、seq id no:5为：mgwyrqlpgqerewvai。

52、seq id no:6为：

53、nyrdsvkgrftlsrdvatntiylqmtslkpedtavyyc。

54、seq id no:7为：wgqgtqvtvss。

55、第三方面，本发明提供了一种抗体，所述的抗体的氨基酸序列包含：上述第一方面所述的抗体的氨基酸序列和上述第二方面所述的抗体的氨基酸序列。

56、第四方面，本发明提供了一种抗体，所述抗体的氨基酸序列包含：fr1-hcdr1-fr2-hcdr2-fr3-hcdr3-fr4；

57、所述的hdr1、hdr2、hdr3的氨基酸序列如seq id no:1-3所示或与seq id no:1-3所述的氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个的氨基酸差异的氨基酸序列的功能活性变体；

58、所述的fr1、fr2、fr3、fr4的氨基酸序列如seq id no:4-7所示或与seq id no:4-7所示的氨基酸序列相比具有至少80％序列相似性的氨基酸序列的功能活性变体。

59、优选地，所述hcdr1的氨基酸序列如seq id no:1所示，所述hcdr2的氨基酸序列如seq id no:2所示，所述hcdr3的氨基酸序列如seq id no:3所示。

60、优选地，所述fr1的氨基酸序列如seq id no:4所示，所述fr2的氨基酸序列如seqid no:5所示，所述fr3的氨基酸序列如seq id no:6所示，所述fr4的氨基酸序列如seq idno:7所示。

61、优选地，所述的抗体的氨基酸序列如seq id no:8所示。

62、seq id no:8为：

63、dvqlvesggglvqpggslrlscaasesllrlyamgwyrqlpgqerewvaihttsdttnyrdsvkgrftlsrdvatntiylqmtslkpedtavyychvtsmrdsqnywgqgtqvtvss。

64、进一步优选地，所述的抗体为单域抗体。

65、再进一步地，所述的抗体为抗il-17a抗体。

66、优选地，所述的抗体包含部分或全部选自人源、鼠源、灵长目动物源或骆驼科动物源的抗体重链框架区或其变体；

67、优选地，包含部分或全部选自骆驼科动物源的抗体重链框架区或其变体；

68、更优选地，包含部分或全部选自羊驼源的抗体重链框架区或其变体。

69、第五方面，本发明提供了一种多克隆抗体，所述的多克隆抗体包含上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体。

70、第六方面，本发明提供了一种抗体制剂，所述的抗体制剂包含上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体和药学上可接受的载体。

71、第七方面，本发明提供了一种重组蛋白，包含上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体。

72、优选地，所述的重组蛋白还包含协助其表达和/或分泌，或延长其在体内半衰期的生物活性蛋白或其功能片段；

73、进一步优选地，所述生物活性蛋白或其功能片段选自his标签、gst标签、mbp标签、flag标签和sumo标签、免疫球蛋白fc结构域、血清白蛋白、白蛋白结合多肽、前白蛋白、羧基末端肽、弹性蛋白样多肽中的至少一种。

74、再进一步地，所述生物活性蛋白或其功能片段为人免疫球蛋白fc结构域，优选为人igg的fc结构域，例如人igg1的fc结构域、igg2的fc结构域、igg3的fc结构域、igg4的fc结构域，更优选为人igg1的fc结构域。

75、根据本发明的一些实施方式，所述的人igg1 fc的氨基酸序列如seq id no:10所示。

76、seq id no:10:

77、dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk。

78、具体地，编码seq id no:10的核苷酸序列如seq id no:11所示。

79、seq id no:11：

80、gacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcacgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaa。

81、根据本发明的一些实施方式，可在本文中所提供抗体的fc区中引入一个或多个氨基酸修饰，以此产生fc区变体。fc区变体可包含在一或多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如置换、缺失和插入)的人fc区序列(例如人igg1、igg2、igg3或igg4 fc区)。

82、第八方面，本发明提供了一种试剂盒，所述的试剂盒包括：

83、(1)上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂或所述的重组蛋白；和；

84、(2)装载所述抗体制剂的容器。

85、优选地，所述的试剂盒还可以包括容器、缓冲液、识别il-17a蛋白的抗体、检测底物等。

86、第九方面，本发明提供了一种抗体药物偶联物，所述的抗体药物偶联物包括：

87、(1)上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂或所述的重组蛋白；和；

88、(2)与(1)结合的偶联部分。

89、根据本发明的一些实施方式，所述偶联部分包括可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素和/或酶。

90、第十方面，本发明提供了一种核酸分子，所述的核酸分子编码上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体或所述的重组蛋白。

91、根据本发明的一些实施方式，所述的核酸可为rna、dna或cdna。

92、根据本发明的一些实施方式，本发明的核酸也可呈载体形式，可存在于载体中和/或可为载体的一部分，该载体例如质粒、粘端质粒或yac。载体可为表达载体，该表达载体通常包含至少一种本发明的核酸，其可操作地连接至一个或多个适合的表达调控元件(例如启动子、增强子、终止子等)。

93、具体地，所述的编码seq id no:8所示的氨基酸序列的核酸分子的序列如seq idno:9所示。

94、seq id no:9为：

95、gatgtgcagctggtggagtctgggggaggcttggtgcagcctggggggtctctgagactctcctgtgcagcctctgaaagcctcctcaggttgtatgccatgggctggtaccgccaacttccagggcaggagcgcgagtgggtcgcaatacacactactagtgacaccactaattatagagactccgtgaagggccgattcacgctctccagagacgtcgccacgaacacgatttatctccaaatgaccagcctcaaacctgaagacacggccgtctattattgtcatgttacttccatgagagattcacaaaactactggggccaggggacccaggtcaccgtctcctcg。

96、第十一方面，本发明提供了一种生物学表达载体，所述的生物学表达载体包含所述的核酸分子。

97、根据本发明的一些实施方式，所述的生物学表达载体可以为真核表达载体或原核表达载体，优选真核表达载体。

98、优选地，所述真核表达载体选自酵母表达载体、昆虫表达载体或哺乳动物表达载体；

99、更优选地，所述哺乳动物表达载体选自逆转录病毒表达载体、慢病毒表达载体、腺病毒表达载体、腺相关病毒表达载体。

100、第十二方面，本发明提供了一种宿主细胞，所述的宿主细胞的基因组整合有所述的核酸分子；或；包含所述的生物学表达载体。

101、优选地，所述的宿主细胞为细菌细胞、真菌细胞或哺乳动物细胞。

102、进一步地，所述的细菌细胞包括革兰氏阴性细菌菌株及革兰氏阳性细菌菌株的细胞。

103、再进一步地，所述的革兰氏阴性细菌菌株包括大肠杆菌菌株、假单胞菌菌株和变性杆菌菌株。

104、再进一步地，所述的革兰氏阳性细菌菌株包括链霉菌菌株、芽孢杆菌菌株和葡萄球菌菌株。

105、进一步地，所述的真菌细胞包括木霉属、脉孢菌属及曲菌属物种的细胞。

106、进一步地，所述的哺乳动物细胞包括hek293细胞、hela细胞、cho细胞和cos细胞。

107、再进一步地，所述的哺乳动物细胞为hek293细胞。

108、第十三方面，本发明提供了上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂、所述的重组蛋白、所述的试剂盒、所述的抗体药物偶联物、所述的核酸分子、所述的生物学表达载体或所述的宿主细胞的用途，所述的用途选自以下至少一种：

109、(1)制备检测试剂或试剂盒；

110、(2)制备预防和/或治疗自身免疫性疾病的药物；

111、(3)制备预防和/或治疗癌症的药物。

112、具体地，所述自身免疫性疾病包括银屑病、系统性红斑狼疮、恶性类风湿关节炎、类风湿关节炎、成人斯蒂尔病、巴塞杜病、硬皮病、桥本病、过敏性血管炎、幼年特发性关节炎、颞动脉炎、重症肌无力、类风湿性血管炎、自身免疫性视神经病、风湿性多肌痛、多发性肌炎、多发性硬化症、纤维肌痛、系统性硬皮病、皮肌炎、急进性肾小球肾炎、白塞氏病、进行性系统性硬化症、干燥综合征、寻常型白斑病、恶性贫血、血管炎、大血管血管炎、大疱性类天疱疮、艾迪生病、卡斯尔曼病、巨细胞动脉炎、特发性艾迪生病、银屑病关节炎、多灶性运动神经病、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、结节性动脉周围炎、肌萎缩侧索硬化、特发性无精子症、妊娠疱疹、主动脉炎综合征、自身免疫性溶血性贫血、嗜酸性筋膜炎、类天疱疮、脊椎关节炎、白斑病、原发性胆汁性肝硬化、混合性结缔组织病、慢性萎缩性胃炎、抗磷脂抗体综合征、过敏性肉芽肿性血管炎、good-pasture综合征、cogan综合征、anca相关性血管炎、线性iga大疱性皮肤病、rs3pe综合征、慢性盘状红斑狼疮、igg4相关疾病、格林巴利综合征、自身免疫性肝炎、获得性大疱性表皮松解症、非酒精性脂肪性肝炎、狼疮性肾炎、i型糖尿病、巨幼红细胞性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症、特发性血小板减少性紫癜、自身免疫性肾上腺皮质功能减退症、原发性甲状腺功能减退症、缓慢进展型i型糖尿病、局灶性硬皮病、天疱疮、斑秃、视神经脊髓炎、结节病、原田病、习惯性流产、炎症性肠病、乳糜泻、强直性脊柱炎、严重哮喘、慢性荨麻疹移植免疫、家族性地中海热、嗜酸性粒细胞慢性鼻窦炎、扩张型心肌病、系统性肥大细胞增多症或包涵体肌炎。

113、具体地，所述的癌症包括口腔癌、淋巴瘤、呼吸系统癌、前列腺癌、白血病、视网膜母细胞瘤、绒毛膜癌、腹膜癌、眼癌、泌尿系统癌症、骨癌、子宫内膜癌、子宫癌、膀胱癌、甲状腺癌、食道癌、喉癌、头颈癌、急性成淋巴细胞性白血病、黑色素瘤、毛细胞白血病、神经母细胞瘤、唾液腺癌、消化系统癌症、骨髓瘤、胃癌、肝癌、皮肤癌、肺癌、直肠癌、卵巢癌、肾癌、胰腺癌、肝癌、肉瘤、胶质母细胞瘤、基底细胞癌、胆管癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管癌、结直肠癌、结缔组织癌、横纹肌肉瘤、鳞状细胞癌、睾丸癌、b细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性成髓细胞性白血病。

114、第十四方面，本发明提供了一种药物组合物，所述的药物组合物包含：上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂、所述的重组蛋白、所述的抗体药物偶联物、所述的核酸分子、所述的生物学表达载体或所述的宿主细胞。

115、具体地，所述的药学上可接受的辅料选自溶剂、稀释剂、崩解剂、沉淀抑制剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、助悬剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、抗氧化剂中的至少一种。

116、第十五方面，本发明提供了一种用于非诊断目的的体外检测样品中il-17a的方法，所述的方法包括以下步骤：

117、(1)将上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂、所述的重组蛋白、所述的抗体药物偶联物与检测样品结合；

118、(2)检测抗原-抗体复合物，并进行结果判读。

119、第十六方面，本发明提供了一种预防和/或治疗自身免疫性疾病的方法，所述的方法包括：向受试者施用治疗有效量的上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂、所述的重组蛋白、所述的抗体药物偶联物、所述的核酸分子、所述的生物学表达载体、所述的宿主细胞或所述的药物组合物。

120、第十七方面，本发明提供了一种预防和/或治疗癌症的方法，所述的方法包括：

121、向受试者施用治疗有效量的上述第一方面至第四方面任一方面所述的抗体、所述的多克隆抗体、所述的抗体制剂、所述的重组蛋白、所述的抗体药物偶联物、所述的核酸分子、所述的生物学表达载体、所述的宿主细胞或所述的药物组合物。

122、本发明的有益效果包括：

123、本发明的单域抗体1-c11与传统的单克隆抗体相比，其亲和力更高，单域抗体1-c11的ec50值为29.99，阳性抗体(ixekizumab)的ec50＝10.06，单域抗体1-c11与human il-17a蛋白有较好的结合活性。

124、il-17a单域抗体1-c11具有较好的阻断效果，能够阻断human il-17a蛋白激活293f-il-17ra-il-17rc-act1-nfκb-luc。

125、单域抗体1-c11的稳定性较强，tm＝64.25，tagg＝81.13。