本发明涉及一种能够提高乙醇脱氢酶活力(adh)和超氧化歧化酶(sod)活性、加快乙醇代谢、降低血液中乙醇浓度、并对急性醉酒引起的肝损伤有一定预防作用的凝结魏茨曼氏菌iob502菌株、菌剂及其制备方法和进一步应用,以解决上述现有技术存在的问题。
背景技术:
1、酒精滥用已成为日益严重公共健康问题,研究发现多种疾病与酒精滥用有关,给全社会造成巨大的经济负担。近年来,随着经济水平的不断提高,人们的生活节奏越来越快,生活和工作交际应酬越来越多,酒精消耗量增加,人体饮酒后,酒精通过胃肠道吸收,再通过肝脏代谢。肝脏是酒精代谢的主要场所,长期或过量饮酒会导致血压升高,消化不良,酒精性心肌病、胃肠道慢性炎症等疾病。长期饮酒,还会导致脂肪性肝硬化,损害神经系统,引起大脑功能失调,神经衰弱,精神涣散,记忆力下降,严重酒精中毒者,中枢神经系统发生深度抑制而昏迷,甚至死亡。
2、目前,市面上现有的解酒护肝产品大多数是化学合成药物、护肝类中药、蛋白肽类的药物,存在见效慢、治疗效果差,副作用明显或作用机理不明确等问题。然而,大量的动物实验和临床试验结果表明,一些益生菌已被报道可用于预防和治疗酒精性肝病,且简单、有效、无副作用,为利用益生菌预防和治疗酒精性肝病提供了新思路。
3、凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)是一种革兰氏阳性菌,兼性厌氧,非致病性,可以形成芽孢和产生乳酸,具有耐高温、耐酸、耐胆汁等工业特性。已广泛应用于医药、食品、化工等行业。已有研究报道凝结魏茨曼氏菌可通过调节微生物群组成、宿主免疫和代谢,对急性腹泻、肠易激综合征、抗生素相关腹泻、便秘和结肠炎等肠道疾病有治疗作用。
4、目前一些关于凝结魏茨曼氏菌在解酒护肝方面的应用研究主要涉及以下几个方面:cn 114107121a公开了一种凝结芽孢杆菌及其在酒精性肝病的治疗中的应用,主要是凝结芽孢杆菌fcys01通过降低酒精肝小鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的表达,肝脏组织中促炎因子、甘油三酯的表达,减少脂质积累,提高酒精肝小鼠肝脏组织中抗炎因子、肠道连接蛋白的表达,修复肠道屏障,从而来预防和治疗由酒精诱发的酒精性肝病,但不能从源头上促进酒精的代谢;cn116731896a公开了一株可降解乙醇的凝结芽孢杆菌及其应用,主要通过将原始菌株活化、培养及发酵后经过紫外线、亚硝酸胍、常压室温等离子体诱变后得到的三种不同的诱变后的菌株,再将不同方法诱变后的菌株融合、发酵,通过传统方法诱变融合增加其降解酒精的能力,以使得酒精被人体吸收之前被adh、aldh降解,降低人体吸收酒精的量,但是上述经过过诱变的菌株安全性有待要论。
5、进一步地,上述专利公开的用于解酒护肝的凝结魏茨曼氏菌制备方法,是通过将原始菌株活化、培养及发酵、离心后制备成菌粉,此制备方法存在菌种含量低、发酵效果差、干燥后菌种活性差等缺陷,且容易将益生菌在发酵过程中产生的有机酸等有益物质损失,造成资源浪费;或者发酵后进行诱变、融合、发酵制备而成,该制备工艺操作繁琐,诱变融合效率低,过程不易控制。此外,大多是通过提高凝结魏茨曼氏菌在肠道壁的定殖率,促进酒精降解。
6、鉴于此,亟需一种能够高效代谢乙醇、活性更好的菌种以及一种高效的菌剂制备方法。
技术实现思路
1、本发明目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种能够提高乙醇脱氢酶活力(adh)和超氧化歧化酶(sod)活性、加快乙醇代谢、降低血液中乙醇浓度、并对急性醉酒引起的肝损伤有一定预防作用的凝结魏茨曼氏菌iob502菌株、菌剂及其制备方法和进一步应用,以解决上述现有技术存在的问题。
2、第一方面,本发明提供1一种凝结魏茨曼氏菌,其特征在于,所述凝结魏茨曼氏菌为凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502,已保藏于cgmcc,保藏编号为cgmccno.16025。
3、本发明使用的凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502是自主筛选自天津市居民家中天然发酵大豆酱,此菌株已经进行了菌株保藏和理化指标的检测,已于2020年1月8日在中国食品发酵工业研究院有限公司进行了细菌鉴定检测,菌落为黄色,圆形,表面湿润,不透明,边缘整齐的菌落,已于2018年6月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称cgmcc,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,其保藏编号为cgmcc no.16025。
4、第二方面,本发明提供一种包含凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502的分段发酵菌剂。
5、第三方面,本发明提供一种凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502的分段发酵菌剂的制备方法,具体步骤为:
6、(1)菌株活化:将菌株按体积比1:20~25接种于活化培养基中,36±2℃,密闭培养22±2h得到种子液;
7、(2)第一段发酵:按照体积比1:50~60的接种量将活化好的种子液接种到灭菌后的发酵培养基中,发酵罐搅拌转速100r/min,36±2℃,密闭培养30±2h,即得到发酵液。
8、(3)第二段发酵:按照料液比1:1.75接种量,将获得的第一段发酵液接种到灭菌后的固态发酵培养基中,36±2℃,密闭培养36±2h。
9、(4)菌粉及制剂:将发酵后菌及代谢产物进行冷冻干燥,即可获得高活性凝结魏茨曼氏菌iob502制剂。
10、优选地,步骤(3)中所述的第二段固态发酵培养基为:槐花粉和大豆粉混合,121℃灭菌25min后冷却备用。
11、优选地,步骤(1)中菌株按体积比1:25接种于活化培养基中,步骤(2)中按照体积比1:60的接种量将活化好的种子液接种到灭菌后的发酵液中。
12、第四方面,本发明提供一种凝结魏茨曼氏菌iob502在制备用于解酒相关药物或保健品中的应用。
13、第五方面,本发明提供一种凝结魏茨曼氏菌iob502在制备治疗酒精关联的肝损伤相关药物或保健品中的应用。
14、第六方面,本发明提供一种凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502分段发酵菌剂在制备用于解酒相关药物或保健品中的应用。
15、第七方面,本发明提供一种凝结魏茨曼氏菌( weizmannia coagulans)iob502分段发酵菌剂在制备治疗酒精关联的肝损伤相关药物或保健品中的应用
16、技术效果
17、本发明通过两阶段发酵法获得的凝结魏茨曼氏菌iob502菌粉及制剂,具有菌活性高和耐酸耐胆盐等特性;同时凝结魏茨曼氏菌iob502菌粉及制剂具有较高的安全性。发酵获得的凝结魏茨曼氏菌iob502制剂含有丰富的槐花黄酮苷元及异黄酮苷元组分,可增强肝脏adh活力从而加快乙醇代谢,降低血液中乙醇浓度,起到较好的解酒作用;此外,还能够提高肝脏sod活力,减轻乙醇对肝脏的损害,从而达到护肝的效果。