基于单域抗体基因修饰的干细胞对于多种的疾病的制药用途的制作方法

本发明属于干细胞，具体涉及基于单域抗体基因修饰的干细胞对于多种的疾病的制药用途。

背景技术：

1、干细胞是未成熟细胞，其未充分分化，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能。干细胞治疗已在糖尿病、帕金森综合征、红斑狼疮、白血病等多种疾病中进行了相应治疗尝试。诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell，ipsc）的制备技术及其应用，将干细胞治疗带入了一个全新时代。随着分子生物学技术，特别是基因编辑技术的不断发展，基因修饰在干细胞治疗中发挥着越来越重要的作用。

2、干细胞治疗作为一种再生医学技术，旨在用具有特定功能的细胞替代功能异常细胞，恢复相应细胞功能，改善机体健康状态。目前有多种干细胞用于临床， 其中，hsc移植已改善多种免疫系统和血液系统疾病的预后，如先天性免疫缺陷、多发性骨髓瘤、地中海贫血等。研究数据表明，异体hsc的植入可将r/raml（idh1/idh2突变的急性髓系白血病）患者的4年生存率提高至20%~35%。此外，msc因具有一定的免疫调节功能，被用于治疗免疫性疾病，如移植物抗宿主病等，取得了一定疗效。现有技术中已经公开了用于治疗腺苷脱氨酶缺乏性重度联合免疫缺陷病（ada-scid） 的自体hsc药物strimvelis及用于治疗阿尔茨海默病的自体msc药物astrostem。

3、间充质干细胞（mesenchymal stem cell，msc）是一种多能干细胞，是具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞像apsc多能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层。在机体正常的组织损伤修复过程中，msc是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损伤引起的特殊信号作用下，msc迁移到受损部位，在局部聚集增殖，依据不同的损伤信号沿着不同途径分化。msc易于分离扩增，体外倍增能力旺盛，即使扩增1亿倍仍能保持其多向分化能力。因此，msc是一种实用的组织修复种子细胞。

4、il-17为宿主保护粘膜感染的关键细胞因子，也是多种自身免疫和炎症性疾病的主要致病细胞因子和药物靶标。il-17家族包括六个成员：il-17a、il-17b、il-17c、il-17d、il-17e和il-17f，各成员皆通过il-17受体（il-17ra至il-17re）介导其生物学功能。其中研究最多的il-17家族成员是il-17a，其通过与il-17ra和il-17rc结合来促进其生物活性。现有技术已经公开了il-17a在人类疾病中的病理作用的研究最终导致了针对il-17a（il-17a和il-17f、il-17ra或il-23）的单克隆抗体（mab）的开发。

5、研究il-17与干细胞的作用方式的现有技术如公开号为cn105079792a的中国专利申请，其公开了il-17在提高间充质干细胞免疫抑制功能中的应用。具体地本发明提供了一种白介素-17、白介素-17的衍生物或其激动剂用于制备制剂或试剂盒的用途，用于提高间充质干细胞的免疫抑制功能；上调间充质干细胞中免疫抑制因子的表达；增强免疫抑制因子的mrna的稳定性；降低rna结合蛋白auf1的表达水平；抑制t细胞的增殖；治疗肝炎或肝损伤。

6、但现有技术中未有公开il-17相关抗体对干细胞的修饰，特别是il-17a特异性串联抗体在干细胞修饰中的作用。本领域需要对修饰干细胞的应用进行深入研究和开发。

7、本发明系在上述背景下产生，本发明系基于抗il-17a单域抗体开发项目所进行的第四代技术开发。

8、为便于审查，现对研发项目的技术背景进行简要介绍：

9、本发明人首先开发出9个单域抗体（已另案申请）；

10、本发明人在单域抗体的基础上，开发出由2个单域抗体构成的抗体组合（已另案申请）；

11、本发明人在单域抗体的基础上，开发出由抗体组合基因修饰干细胞（已另案申请）；

12、本发明人在基因修饰干细胞的基础上，开发出修饰干细胞的应用技术，本发明即为该应用技术之一。

13、以上，基于专利法单一性的相关规定，分别进行专利申请。

14、为便于理解本发明，可选地参阅本项目其他专利申请文件。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种基于il-17a特异性串联抗体所修饰干细胞的应用。

2、本发明基于免疫羊驼进行筛选，得到了多种具有il-17a特异性结合能力的纳米抗体，并选择了其中的两种进行串联，以实现干细胞基因修饰应用。

3、il-17家族共有7个成员，分别被命名为il-17a到il-17f，il-17家族氨基酸序列在c端高度相似，主要由5个在空间上保守的半胱氨酸组。表达il-17最丰富的细胞主要是胸腺依赖的淋巴细胞，包括适应性免疫中的αβt细胞，固有免疫中的γδt细胞， 恒定型自然杀伤t细胞和淋巴组织诱导样细胞（lti-like cells）。il-17家族在宿主抗微生物反应和炎症性疾病的发展过程中扮演着重要角色。il-17促进了调节其各种功能的多种细胞因子的合成和分泌。这些细胞因子包括：趋化因子（如cxcl1、cxcl8和ccl2）；促炎症因子（如il-6、tnf-α和il-1β）；促炎症因子调节因子（如nos和cox）；gm-csf和g-csf生长因子和组织重塑因子（如mmp1，mmp3和rankl）。

4、不论是由固有免疫细胞还是适应性免疫细胞分泌的il-17a和il-17f，其最显著的功能是诱导中性粒细胞向感染部位迁移，il-17a和il-17f的这种功能对微生物的清除至关重要。一些研究表明，上皮和黏膜屏障受到细菌感染过程中诱导产生的il-17a和il-17f在宿主防御中起重要作用。第一个证明il-17介导的宿主防御作用的研究是il-17r缺陷型小鼠的克雷伯氏肺炎肺部感染模型（ye p, et al. requirement of interleukin 17receptor signaling for lung cxc chemokine and granulocyte colony-stimulatingfactor expression, neutrophil recruitment, and host defense. j exp med.2001;194(4):519-527.）。研究使用il-17ra和il-17缺陷型小鼠模型或是使用il-17受体或配体的中和抗体来阻断il-17信号通路，会导致小鼠对各种细胞外或者细胞内细菌感染更加敏感，这些细菌包括沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、链球菌肺炎、结核分枝杆菌、单核细胞增多性李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和幽门螺杆菌（pappu r, et al. the interleukin-17cytokine family: critical players in host defence and inflammatorydiseases. immunology. 2011; 134 (1): 8-16.;iwakura y, et al. functionalspecialization of interleukin-17 family members. immunity. 2011; 34 (2): 149-162.;mcgeachy mj, et al. the il-17 family of cytokines in health and disease.immunity 2019; 50 (4): 892-906.）。il-17被鉴定为负责宿主防御真菌的分子之一，通过基因突变，这些分子被证明与人类对真菌的易感性有关。il-17通路的先天缺陷，包括编码il-17f或il-17ra基因的缺陷，被发现与真菌感染的易感性增加有关，尤其是慢性黏膜皮念珠菌病，这明显表明il-17通路在抗真菌免疫中起着重要作用（cypowyj, et al. immunityto infection in il-17-deficient mice and humans. european journal of  immunology42.9 (2012): 2246-2254.）。il-17已被证明可以保护小鼠免受各种真菌感染，包括由肺孢子虫、夹膜组织胞浆菌和烟曲霉菌引起的感染（gladiator a, et al. innatelymphoid cells: new players in il-17-mediated antifungal immunity. plos  pathog. 2013; 9 (12): e1003763.）。

5、il-17通过两种途径促进肿瘤的发生，一种途径是通过维持炎症环境来减少了对肿瘤的局部免疫反应（he d, et al. il-17 promotes tumor development through theinduction of tumor promoting microenvironments at tumor sites and myeloid-derived suppressor cells. j immunol. 2010; 184 (5): 2281-2288.）；另一种途径是通过激活stat3和nf-kb通路，促进抗凋亡基因的表达（grivennikov si, et al. dangerousliaisons: stat3 and nf-kappab collaboration and crosstalk in cancer. cytokine  growth factor rev. 2010; 21(1): 11-19.）il-17在炎症相关的癌症中发挥其促癌症作用主要倚仗其促血管生成的特性。il-17通过作用于基质细胞和成纤维细胞，诱导其分泌血管生成调节因子，包括vegf，这些分泌血管生成调节因子能显著地加强炎症反应和促进肿瘤血管生成。

6、il-17细胞因子家族成员，特别是il-17a，与多种自身免疫性疾病有关，包括多发性硬化（ms）、类风湿关节炎（ra）、系统性红斑狼疮（sle）、1型糖尿病（tidm）、炎症性肠病（ibd）和牛皮癣（zhu s, et al. il-17/il-17 receptor system in autoimmunedisease: mechanisms and therapeutic potential. clin sci (lond). 2012; 122(11): 487-511.）。在许多人类自身免疫性疾病中，il-17细胞因子和il-17受体表达上升。靶向il-17和il-17受体基因的转基因和敲除小鼠模型将il-17细胞因子与自身免疫性的发展联系在一起。实验性自身免疫性脑脊髓炎（eae）的研究表明，il-17a是t细胞介导的自身免疫性疾病病理学中的关键致病细胞因子（langrish, c. l. et al. il-23 drives apathogenic t cell population that induces autoimmune inflammation. j. exp.  med. 201, 233-240 (2005).；sutton, c., brereton, c., keogh, b., mills, k. h.&lavelle, e. c. a crucial role for interleukin (il)-1 in the induction of il-17-producing t cells that mediate autoimmune encephalomyelitis. j. exp. med.203, 1685-1691 (2006).）。随后的研究表明，在eae中，il-17a由th17细胞和分泌il-17a的γδt（γδt17）细胞分泌（sutton, c. e. et al. interleukin-1 and il-23 induceinnate il-17 production from gammadelta t cells, amplifying th17 responsesand autoimmunity. immunity31, 331-341 (2009).）。

7、这些研究和其他详细阐述了il-17a在人类疾病中的病理作用的研究最终导致了针对il-17a（il-17a和il-17f、il-17ra或il-23）的单克隆抗体（mab）的开发。目前全球范围内已上市多款阻断il-17的抗体药物，其中包括中和il-17a（secukinumab和ixekizumab）或il-17ra（brodalumab）的单抗药物，而国内在研的围绕il-17靶点并用于自免疫疾病治疗的抗体药物或小分子已经超过50个。尽管与化疗药物相比抗体药通常在人体具有良好的疗效和耐受性，然而在临床使用中仍然存在很多治疗相关副作用，例如：鼻咽炎、头痛、恶心和腹泻或者更严重的如感染、心脏毒性和严重的免疫反应等；另外单抗药物结构复杂、稳定性相对较差也导致其需要反复大剂量注射从而达到最佳效果。

8、一方面，本发明提供了一种干细胞在疾病中的应用。

9、所述的应用为制药用途、制备诊断产品的用途、辅助治疗方法、治疗方法辅助诊断方法和/或诊断方法；

10、所述的疾病为il-17a相关疾病；优选地，所述的疾病为炎性疾病、感染性疾病、自身免疫性疾病、神经系统疾病和/或肿瘤。

11、所述的干细胞为基于单域抗体基因修饰的干细胞，所述的干细胞包含：

12、（1）seq id no: 1-6所示的氨基酸序列或与seq id no: 1-6具有至少80%序列一致性的氨基酸序列；

13、和/或；

14、（2）编码seq id no: 1-6所示的seq id no: 1-6具有至少80%序列一致性的氨基酸序列的核苷酸序列；

15、seq id no: 1：gekldyfa；

16、seq id no: 2：vtssgsst；

17、seq id no: 3：astillcsdyisafgt；

18、seq id no: 4：gfsihiya；

19、seq id no: 5：itrggvt；

20、seq id no: 6：naggtnggy。

21、在一些理解中，所述的seq id no: 1-6表示cdr区。本领域技术人员知晓，cdr区是抗体特异性识别抗原的区域，具到主要的结合活性，因此，本领域技术人员根据本发明记载的cdr区，理论上可以设计出多种抗体进行应用。如采用纳米抗体的形式。

22、优选地，本发明提供了一种干细胞在制备药物中的用途，所述的干细胞包含、表达或分泌第一抗体和第二抗体，所述的第一抗体包含序列如seq id no: 1-3所示的hcdr1、hcdr2、hcdr3；所述的第二抗体包含序列如seq id no: 4-6所示的hcdr4、hcdr5、hcdr6。

23、作为优选，所述的干细胞包含：

24、（1）seq id no: 7-14所示的氨基酸序列或与seq id no: 7-14具有至少80%序列一致性的氨基酸序列；

25、和/或；

26、（2）编码seq id no: 7-14所示的seq id no: 7-14具有至少80%序列一致性的氨基酸序列的核苷酸序列。

27、seq id no.7：qvqlvesggglvqpggslrlscaas；

28、seq id no.8：igwfrqapgkerevvsc；

29、seq id no.9：nylssvkdrftisidnakntvylqmnslkpedtaiyyc；

30、seq id no.10：wgqgtqvtvas；

31、seq id no.11：evqlvesggglvqpggslrlscaas；

32、seq id no.12：mgwyrqapgkqrelvat；

33、seq id no.13：nnadsvkgrftisrdnakntaylqmnslkpedtavyyc；

34、seq id no.14：wgqgtqvtvss。

35、优选地，本发明所述的第一抗体还包括seq id no:7-10所示的氨基酸序列作为fr区；所述的第二抗体还包括seq id no:11-14所示的氨基酸序列作为fr区。

36、进一步优选地，所述的干细胞包含：

37、（1）seq id no: 16-17所示的氨基酸序列或与seq id no: 16-17具有至少80%序列一致性的氨基酸序列；

38、和/或；

39、（2）编码seq id no: 16-17所示的seq id no: 16-17具有至少80%序列一致性的氨基酸序列的核苷酸序列。

40、seq id no.16：

41、qvqlvesggglvqpggslrlscaasgekldyfaigwfrqapgkerevvscvtssgsstnylssvkdrftisidnakntvylqmnslkpedtaiyycastillcsdyisafgtwgqgtqvtvas。

42、seq id no.17：

43、evqlvesggglvqpggslrlscaasgfsihiyamgwyrqapgkqrelvatitrggvtnnadsvkgrftisrdnakntaylqmnslkpedtavyycnaggtnggywgqgtqvtvss。

44、本文所用的术语“高变区”、“超变区”、“互补决定区”、“hvr”或“cdr”，是指在抗体可变结构域区域中序列上高变和/或形成结构上限定的环（“高变环”）的区域。通常，天然四链抗体包含六个hvr或cdr：三个存在于vh中（h1、h2、h3），三个存在于vl中（l1、l2、l3）。基于chothia定义规则，示例性cdr（lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3）位于氨基酸残基l26-l32（l1）、l50-l52（l2）、l91-l96（l3）、h26-h32（h1）、h52-h56（h2）和h96-h101（h3）处（chothia等人，j.mol.biol. 196: 901-917 (1987))。基于kabat定义规则，示例性cdr（lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3）位于氨基酸残基l24-l34（l1）、l50-l56（l2）、l89-l97（l3）、h31-h35（h1）、h50-h65（h2）和h95-h102（h3）处（kabat等人，sequences ofproteins ofimmunological interest, the fifth edtion, public health service,national institutes of health, bethesda, md (1991) )。基于imgt定义规则，示例性cdr（lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3）位于氨基酸残基l27-l32（l1）、l50-l51（l2）、l89-l97（l3）、h26-h33（h1）、h51-h56（h2）和h93-h102（h3）处（honjo, t.和alt, f.w. (1995) immunoglobulin genes. academic press pp. 3-443)。本领域人员公知，在本领域中可以通过多种方法来定义抗体的cdr，例如基于序列可变性的kabat定义规则、基于结构环区域位置的chothia定义规则和基于cdr移植的抗体人源化设计的参考工具（参见j mol biol. 273: 927-48, 1997）。本领域技术人员应当理解的是，除非另有规定，否则术语给定抗体或其区（例如可变区）的“cdr”及“互补决定区”应理解为涵盖如通过本发明描述的上述已知方案中的任何一种界定的互补决定区。虽然本发明公开的cdr是基于imgt定义规则所示出的序列，但是根据其他cdr定义规则所对应的氨基酸序列也应当落在本发明的保护范围中。

45、本发明所述的“序列一致性”在一定程度上可以理解为序列相似度、序列同一性等，在具有一定序列一致性的一个类别中，其发生的任意变异本领域技术人员可以理解不影响功能特性（如抗体的功能变体与来源抗体具有相同或相近的亲和力，或能实现相同或相近的生物学功能，具体如特异性结合il-17a并阻断il-17a与其受体结合）。所述的“至少80%序列一致性”所涵盖的范围包括但不限于：至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%的序列同一性。在实现序列一致性时，可采用的技术手段包括但不限于具有至少1个，优选1、2、3、4或5个的氨基酸的添加、缺失、修饰和/或取代。

46、在一些实施方案中，所述氨基酸的取代为保守取代，这种保守性取代优选地是以下组（a）到（e）中的一个氨基酸被同组中的另一个氨基酸残基取代的取代：（a）小的脂肪族、非极性或弱极性残基：ala、ser、thr、pro和gly；（b）极性、带负电的残基及其（不带电的）酰胺：asp、asn、glu和gln；（c）极性、带正电的残基：his、arg和lys；（d）大的脂肪族、非极性残基：met、leu、he、val和cys；以及（e）芳香族残基：phe、tyr和trp。

47、在一些优选的实施方案中，保守性取代如下：ala到gly或到ser；arg到lys；asn到gln或到his；asp到glu；cys到ser；gln到asn；glu到asp；gly到ala或到pro；his到asn或到gln；ile到leu或到val；leu到ile或到val；lys到arg、到gln或到glu；met到leu、到tyr或到ile；phe到met、到leu或到tyr；ser到thr；thr到ser；trp到tyr；tyr到trp；和/或phe到val、到ile或到leu。

48、优选地，所述的第一抗体和第二抗体直接连接或通过连接子连接。

49、可选择地，所述的干细胞中还可以包括连接子。所述的连接子可以选自(gs)n、(ggs)n、(gggs)n、(ggggs)n或/和as(ggggs)n，优选n为1、2、3、4、5或6。

50、作为示例，所述的连接子可以是（ggggs）n，所述的n为≥1的整数，进一步优选为3。作为示例如：seq id no: 16和seq id no: 17通过seq id no: 15连接。

51、seq id no: 15：ggggsggggsggggs。

52、可选择地，所述的干细胞中还可以包括hinge区和ch区。

53、在一些具体的实施例中，所述的干细胞包含：

54、（1）如seq id no:16-seq id no:15-seq id no:17-seq id no: 26所表示的氨基酸序列或与该氨基酸序列具有至少80%序列一致性的氨基酸序列；

55、和/或；

56、（2）编码seq id no:16-seq id no:15-seq id no:17-seq id no: 26所表示的氨基酸序列或与该氨基酸序列具有至少80%序列一致性的氨基酸序列的核苷酸序列。

57、根据本领域技术人员的一般理解，本发明所述的干细胞中包括表达il-17a特异性串联抗体的载体。但本发明干细胞的含义实际上不仅限于以上形式。本领域已公开或未公开的通过抗体对干细胞进行修饰的方式均应为本领域技术人员所理解，并通过这些方式实现本发明的应用。

58、如本领域技术人员所公知，由于密码子简并性问题，在明确氨基酸序列的情况下，其对应的核酸序列是有无数可能性的，本发明优选的核酸的序列仅作为一个较优的示例，而非唯一可能性。

59、具体地，所述的细胞中还包括协助表达和/或分泌，或延长体内半衰期的生物活性蛋白或其功能片段；所述生物活性蛋白或其功能片段选自免疫球蛋白fc结构域、血清白蛋白、白蛋白结合多肽、前白蛋白、羧基末端肽、弹性蛋白样多肽、his标签、gst标签、mbp标签、flag标签和sumo标签中的至少一种；所述免疫球蛋白fc结构域源自人抗体、鼠抗体、灵长目动物抗体或骆驼科动物抗体、或其变体；较佳地，所述免疫球蛋白fc结构域源自人igg抗体，例如igg1 fc、igg2 fc、igg3 fc或igg4 fc，优选igg1 fc。

60、优选地，所述生物活性蛋白或其功能片段与所述串联单域抗体通过连接子连接，优选肽连接子；

61、较佳地，所述连接肽包含g（甘氨酸）、s（丝氨酸）和a（丙氨酸）或由g和s组成的柔性多肽，优选2-30个氨基酸残基的柔性多肽；

62、更佳地，所述连接肽包括(gs)n、(ggs)n、(gggs)n、(ggggs)n和as(ggggs)n，优选n为1、2、3、4、5或6。

63、优选地，所述的载体的类型包括但不限于：病毒性载体或非病毒性载体。

64、进一步优选地，所述病毒性载体包括慢病毒载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、反转录病毒载体、痘病毒载体、仙台病毒载体、单纯疱疹病毒载体中的至少一种。

65、进一步优选地，所述的非病毒性载体包括但不限于真核载体或原核载体。

66、本发明的应用中，所述的干细胞的类型按分化发育潜能区分可以包括：

67、全能干细胞：可以分化形成完整的个体，如胚胎干细胞（embryonic stem cell，es细胞）；多能干细胞：可以分化形成多种细胞组织器官，如造血干细胞、生殖干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、肝脏干细胞、胰腺干细胞等；单能干细胞：指具有向一种或两种相关的细胞类型分化的潜能，如肌肉中的成肌细胞、上皮组织基底层的干细胞。

68、本发明的应用中，所述的干细胞的类型按干细胞的发育阶段区分可以包括：

69、胚胎干细胞：高度未分化细胞，具有发育的全能型，能分化出成体的所有组织器官；成体干细胞：在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。

70、所述的成体干细胞包括但不限于：

71、造血干细胞：研究历史最长最深入的一类成体干细胞，具备分化为血液系统各种细胞的潜能，在疾病治疗、抗衰老保健等领域具有极大的应用潜能；生殖干细胞：具备分化为生殖细胞和性腺各种支持细胞的潜能，使成体得以发挥生育功能，并可以延缓性腺的衰老；间充质干细胞：具备分化为机体骨、软骨和各种器官细胞的潜能，还具备特有的免疫调节功能；神经干细胞：具备分化为神经系统各种细胞的潜能；视网膜干细胞：具备分化为视网膜各种细胞的潜能；心脏干细胞：具备分化为心脏各种细胞的潜能；肝脏干细胞：具备分化为肝脏各种细胞的潜能；胰腺干细胞：具备分化为胰腺各种细胞的潜能，在特定条件下，可以分化为胰岛细胞；肺脏干细胞：具备分化为肺脏各种细胞的潜能；肾脏干细胞：具备分化为肾脏各种细胞的潜能。

72、优选地，所述的干细胞为胚胎干细胞、成体干细胞、间充质干细胞、脐带血干细胞、造血干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞、皮肤干细胞和/或肌肉干细胞。

73、作为优选，所述的干细胞为间充质干细胞；所述的干细胞分离自脐带血、脐带、胎盘、脂肪组织、皮肤、神经组织、骨髓或胚胎。

74、本发明的应用中，所述炎性疾病包括但不限于多发性肌炎、皮肌炎、结节性动脉周围炎、主动脉炎综合征、恶性类风湿关节炎、类风湿关节炎、幼年特发性关节炎、脊椎关节炎、anca相关性血管炎、慢性萎缩性胃炎、急进性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、银屑病关节炎、颞动脉炎、嗜酸性筋膜炎、非酒精性脂肪性肝炎、嗜酸性粒细胞慢性鼻窦炎、强直性脊柱炎、包涵体肌炎、视神经脊髓炎、巨细胞动脉炎、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、炎症性肠病、血管炎、过敏性肉芽肿性血管炎、过敏性血管炎、类风湿性血管炎和/或大血管血管炎。基于干细胞的表达特性，本领域技术人员可以选择性将其应用于合适的适应症。

75、本发明的应用中，所述感染性疾病包括但不限于：脓毒血症和感染中毒性休克、感染性腹泻、腹腔感染、泌尿道感染、皮肤软组织感染；

76、优选地，所述感染性疾病包括但不限于：链球菌感染、葡萄球菌感染、链球菌感染、肠球菌感染、脑膜炎球菌感染、淋病奈瑟菌感染、霍乱和弧菌感染、沙门菌感染、志贺杆菌感染、假单胞菌及革兰阴性肠杆菌感染、军团杆菌感染、百日咳、白喉、厌氧菌感染、幽门螺杆菌感染、结核、鼠疫杆菌感染、炭疽、梅毒、钩端螺旋体病、莱姆病、立克次体病、支原体感染、衣原体感染、流行性感冒、禽流感、sars、病毒性出血热、流行性乙型脑炎、狂犬病、病毒性肝炎、慢性乙型肝炎和/或慢性丙型肝炎。

77、本发明的应用中，所述自身免疫性疾病包括但不限于白塞氏病、系统性红斑狼疮、慢性盘状红斑狼疮、多发性硬化症、系统性硬皮病、进行性系统性硬化症、硬皮病、混合性结缔组织病、卡斯尔曼病、干燥综合征、成人斯蒂尔病、cogan综合征、rs3pe综合征、风湿性多肌痛、纤维肌痛、抗磷脂抗体综合征、igg4相关疾病、格林巴利综合征、重症肌无力、自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、good-pasture综合征、巨幼红细胞性贫血、自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症、特发性血小板减少性紫癜、巴塞杜病、桥本病、自身免疫性肾上腺皮质功能减退症、原发性甲状腺功能减退症、艾迪生病、特发性艾迪生病、i型糖尿病、缓慢进展型i型糖尿病、局灶性硬皮病、银屑病、大疱性类天疱疮、天疱疮、类天疱疮、妊娠疱疹、线性iga大疱性皮肤病、获得性大疱性表皮松解症、斑秃、白斑病、寻常型白斑病、多灶性运动神经病、结节病、肌萎缩侧索硬化、原田病、自身免疫性视神经病、特发性无精子症、习惯性流产、乳糜泻、严重哮喘、慢性荨麻疹移植免疫、家族性地中海热、扩张型心肌病、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎、狼疮性肾炎和/或系统性肥大细胞增多症；

78、优选地，所述自身免疫性疾病为斑块状银屑病、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎和/或狼疮性肾炎。

79、本发明的应用中，所述肿瘤包括恶性肿瘤和/或非恶性肿瘤。

80、根据本领域技术人员的一般理解，所述的恶性肿瘤和/或非恶性肿瘤根据人体系统至少可以包括：运动系统、循环系统、消化系统、呼吸系统、神经系统、泌尿系统、内分泌系统、生殖系统和/或免疫系统的恶性肿瘤和/或非恶性肿瘤。

81、在一些具体的实施方式中，所述的恶性肿瘤包括但不限于：基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、乳腺癌、腹膜癌、宫颈癌、胆管癌、绒毛膜癌、结直肠癌、结缔组织癌、子宫内膜癌、食道癌、眼癌、头颈癌、胃癌、胶质母细胞瘤、肝癌、肾癌、喉癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴癌、黑色素瘤、骨髓瘤、神经母细胞癌、口腔癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、视网膜母细胞癌、直肠癌、呼吸系统癌、唾液腺癌、皮肤癌、鳞状细胞癌、睾丸癌、甲状腺癌、子宫癌、泌尿系统癌症、b细胞淋巴癌、慢性淋巴细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病和/或慢性成髓细胞性白血病。所述的非恶性肿瘤包括但不限于：脂肪瘤、神经纤维瘤、皮脂腺囊肿、乳腺囊肿、纤维瘤、平滑肌瘤、甲状腺乳头状瘤、错构瘤、肝血管瘤，肾囊肿、胃肠息肉和/或浆液性囊腺瘤。

82、作为优选，所述的疾病为关节炎或银屑病；所述的关节炎包括但不限于：类风湿性关节炎、银屑病关节炎或关节滑膜炎。在一些具体的实施例中，所述的药物具有降低炎症因子的效果。

83、所述的应用优选为制药用途、制备诊断产品的用途。

84、所述的应用为用于制备药物时，所述的药物中还包括药学上可接受的辅料。

85、本发明的有益效果：

86、本发明通过使用串联纳米抗体修饰干细胞，提高了干细胞治疗效果，所得修饰干细胞具有以下特点：高表达igg4，表达量高达10.43±0.52μg/ml；高表达il-17nb，浓度为4106±185.84 ng/ml；且可以稳定、持续地表达分泌il-17nb；分泌的il-17nb可以阻断il-17a/il17ra的结合，稀释5倍后抑制率高达60%。本发明经修饰后的干细胞通过实验动物模型进行了验证，表明其在il-17a相关疾病中的良好应用前景。