背景技术：
1、新型冠状病毒（sars-cov-2，简称“新冠病毒”）及其持续进化产生系列变异株。根据世界卫生组织分类标准，这些变异株包括vocs如alpha、beta、gamma、delta，以及omicron进化分支下的ba.1、ba.2、ba.4/5、bq.1、xbb.1.5、ba.2.86/jn.1、kp.3和lb.1等新兴变异株。目前，omicron谱系变异株仍占据全球流行优势地位，其持续变异特性不仅导致突破性感染频发，更持续对全球公共卫生安全构成严峻挑战。有研究发现，针对sars-cov-2病毒spike蛋白的ntd特异性抗体，部分具有中和病毒的能力，而另一些则可能增强病毒对宿主细胞的感染。精准测定此类抗体结合病原的亲和力，并筛选高亲和力的抗体，将为体外检测试剂盒的研发提供参考依据和重要的指导意义。因此亟需寻找典型的靶向ntd的感染增强型抗体并鉴定其亲和力水平。
2、目前，针对ntd感染增强型抗体的深入研究相对有限，且已报道的相关抗体均来源于新冠病毒原始株感染诱导产生，主要包括8d2、dh1052、cov2-2369、cov2-2490等。这类抗体与ntd结合后能诱导rbd的构象变化，促进刺突蛋白与宿主细胞ace2受体结合，增强病毒的感染能力。这种增强感染的效应与靶细胞中ace2的表达量有关，例如在过表达ace2的hek-293t-ace2细胞中，抗体的感染增强效应较强，而在正常表达ace2的肺腺癌细胞（calu-3）和结肠腺癌细胞（caco-2）中较弱。另外值得注意的是，目前研究报道的ntd感染增强型抗体识别表位均集中在一段狭窄区域，主要作用位点为w64、h66、k187、v213和r214，并与刺突蛋白的中心轴成30°角的形式结合。然而目前鉴定的ntd感染增强型抗体均由原始株sars-cov-2病毒所诱导，sars-cov-2变异株是否能产生感染增强型抗体，以及是否存在具有交叉结合能力的ntd广谱感染增强型抗体等问题尚未明确。因此，科学界对ntd感染增强型抗体的研究目前尚处于持续探索阶段，需要科研人员开展更广泛深入的探索，才能充分合理地利用ntd感染增强型抗体的特异功能，为全面防控以及应对新型病毒变异株提供更为有力的支撑。
3、
技术实现要素：
4、本发明的目的是提供一种新冠病毒感染增强型单克隆抗体conc-861及其制备与应用。
5、为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：
6、本发明的第一方面公开了一种新冠病毒感染增强型单克隆抗体，所述新冠病毒感染增强型单克隆抗体为conc-861；该单克隆中和抗体由重链和与之配对的轻链组成；conc-861的重链的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列依序为gftvsgsy、iysdgst和araeitmttggldy，轻链的cdr1、cdr2和cdr3的氨基酸序列依序为alpkqy、kds和qsanksgtwv。
7、需要说明的是，本发明的关键在于，从新冠病毒c.1.2变异株感染的恢复期个体外周血特异性单个记忆b细胞中分离并鉴定获得一株全人源单克隆抗体，即conc-861，其能够显著增强新冠病毒c.1.2变异株假病毒对hek-293t-hace2靶细胞的感染作用。
8、本发明的一种实现方式中，新冠病毒感染增强型单克隆抗体conc-861的重链可变区序列为seq id no.1所示序列，轻链可变区序列为seq id no.2所示序列。
9、需要说明的是，以上具体序列的重链可变区和轻链可变区只是本发明的一种实现方式中具体采用的单克隆中和抗体序列；可以理解，对于单克隆中和抗体而言，影响其与抗原决定簇形成精密互补的区域是互补性决定区（缩写cdr），具体的，即重链的cdr1、cdr2和cdr3，以及轻链的cdr1、cdr2和cdr3；因此，只要保障本发明的重链和轻链的cdr1、cdr2和cdr3序列不变，都能够基本实现本发明新冠病毒感染增强型单克隆抗体的功能和作用。也就是说，本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体，其具体序列不仅限于以上具体序列的重链可变区和轻链可变区。
10、本发明的第二方面公开了一种编码本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体的核酸片段，该核酸片段编码conc-861的重链和轻链。
11、本发明的一种实现方式中，编码seq id no.1所示的重链可变区的核酸片段，其序列为seq id no.3所示序列；编码seq id no.2所示的轻链可变区的核酸片段，其序列为seqid no.4所示序列。
12、需要说明的是，以上具体的核酸序列只是本发明的一种实现方式中具体采用的核酸序列，可以理解，对于一个氨基酸而言可以有多个密码子；因此，根据密码子的简并性，在保障编码序列不变的情况下，除了以上限定的核酸序列以外，还可以有若干种编码相同重链或轻链的核酸序列，都在本发明的保护范围内。
13、本发明的第三方面公开了一种含有本发明的核酸片段的重组质粒。
14、需要说明的是，本发明的重组质粒是为了能够有效的表达本发明的核酸片段，从而获得相应的重链、轻链或新冠病毒感染增强型单克隆抗体；因此，原则上只要能够将核酸片段转染到宿主细胞中进行核酸表达的载体都可以用于本发明。
15、本发明的第四方面公开了一种含有本发明的核酸片段或本发明的重组质粒的重组细胞。
16、需要说明的是，本发明的重组细胞是指转染有本发明的核酸片段或重组质粒的宿主细胞；一般可以通过直接培养这样的宿主细胞获得本发明的重链、轻链或新冠病毒感染增强型单克隆抗体。
17、本发明的第五方面公开了一种本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体的制备方法，包括采用本发明的重组细胞对本发明的重组质粒进行蛋白表达，提取并纯化表达蛋白，即获得本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体。
18、本发明的第六方面公开了本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体，或者本发明的核酸片段，或者本发明的重组质粒，或者本发明的重组细胞，在制备新冠病毒检测试剂中的应用。
19、需要说明的是，本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体能够增强新冠病毒wt、delta、c.1.2、eg.5.1、xbb.1、bq.1.1、ba.2、ba.2.75、ba.2.86、jn.1假病毒对hek-293t-hace2靶细胞的感染作用，对于感染增强型抗体的广谱性作用机制的理解具有重要意义。
20、本发明的第七方面公开了一种新冠病毒检测试剂，所述新冠病毒检测试剂中含有本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体。
21、由于采用以上技术方案，本发明的有益效果在于：
22、本发明的新冠病毒感染增强型单克隆抗体conc-861，是一株能够促进新冠病毒wt、delta、c.1.2、eg.5.1、xbb.1、bq.1.1、ba.2、ba.2.75、ba.2.86、jn.1假病毒感染hek-293t-hace2靶细胞的特异性抗体，为新冠病毒的体外检测试剂的设计提供了一种新的参考。
23、附图说明
24、为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
25、图1为本发明实施例中感染增强型单克隆抗体conc-861对sars-cov-2 c.1.2变异株的假病毒感染实验结果。
26、图2为本发明实施例中感染增强型单克隆抗体conc-861对sars-cov-2 delta变异株s1蛋白、delta-rbd蛋白、wt-rbd蛋白及c.1.2-rbd蛋白的结合能力检测实验结果。
27、图3为本发明实施例中感染增强型单克隆抗体conc-861的表位鉴定结果。
28、图4为本发明实施例中感染增强型单克隆抗体conc-861对sars-cov-2野生株及变异株假病毒感染实验结果。
技术实现思路